nature.com-এ আসার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজার সংস্করণটি ব্যবহার করছেন, তাতে CSS-এর সমর্থন সীমিত। সর্বোত্তম অভিজ্ঞতার জন্য, আমরা আপনাকে ব্রাউজারের সর্বশেষ সংস্করণ ব্যবহার করার (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে কম্প্যাটিবিলিটি মোড বন্ধ করার) পরামর্শ দিচ্ছি। এছাড়াও, সাইটের নিরবচ্ছিন্ন সমর্থন নিশ্চিত করার জন্য, এই সাইটে কোনো স্টাইল বা জাভাস্ক্রিপ্ট অন্তর্ভুক্ত করা হবে না।
মেলামাইন একটি স্বীকৃত খাদ্য দূষক যা নির্দিষ্ট কিছু খাদ্য শ্রেণীতে দুর্ঘটনাবশত এবং ইচ্ছাকৃতভাবে উভয়ভাবেই উপস্থিত থাকতে পারে। এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল শিশুখাদ্য ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের সনাক্তকরণ এবং পরিমাণ নির্ণয় যাচাই করা। ইরানের বিভিন্ন অঞ্চল থেকে সংগৃহীত শিশুখাদ্য ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধসহ মোট ৪০টি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ খাদ্য নমুনা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। একটি হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি-আল্ট্রাভায়োলেট (HPLC-UV) সিস্টেম ব্যবহার করে নমুনাগুলির আনুমানিক মেলামাইন পরিমাণ নির্ধারণ করা হয়েছিল। ০.১–১.২ μg mL−1 পরিসরে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য একটি ক্যালিব্রেশন কার্ভ (R2 = ০.৯৯২৫) তৈরি করা হয়েছিল। পরিমাণ নির্ণয় এবং সনাক্তকরণের সীমা ছিল যথাক্রমে ১ μg mL−1 এবং ৩ μg mL−1। শিশুখাদ্য ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইন পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ফলাফলে দেখা গেছে যে, শিশুখাদ্য ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধের নমুনাগুলিতে মেলামাইনের মাত্রা ছিল যথাক্রমে ০.০০১–০.০৯৫ মিলিগ্রাম/কেজি এবং ০.০০১–০.০০৪ মিলিগ্রাম/কেজি। এই মানগুলি ইউরোপীয় ইউনিয়নের আইন এবং কোডেক্স অ্যালিমেন্টারিয়াসের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। এটি উল্লেখ করা গুরুত্বপূর্ণ যে, কম মেলামাইনযুক্ত এই দুগ্ধজাত পণ্যগুলি গ্রহণ করা ভোক্তার স্বাস্থ্যের জন্য কোনো উল্লেখযোগ্য ঝুঁকি তৈরি করে না। ঝুঁকি মূল্যায়নের ফলাফলও এই বিষয়টিকে সমর্থন করে।
মেলামাইন হলো একটি জৈব যৌগ যার আণবিক সংকেত C3H6N6 এবং এটি সায়ানামাইড থেকে উদ্ভূত। পানিতে এর দ্রবণীয়তা খুব কম এবং এতে প্রায় ৬৬% নাইট্রোজেন থাকে। মেলামাইন একটি বহুল ব্যবহৃত শিল্প যৌগ, যার প্লাস্টিক, সার এবং খাদ্য প্রক্রিয়াকরণ সরঞ্জাম (খাদ্য প্যাকেজিং এবং রান্নাঘরের সরঞ্জাম সহ) উৎপাদনে বিস্তৃত বৈধ ব্যবহার রয়েছে¹,²। মেলামাইন রোগের চিকিৎসার জন্য ঔষধ বাহক হিসেবেও ব্যবহৃত হয়। মেলামাইনে নাইট্রোজেনের উচ্চ অনুপাত এই যৌগটির অপব্যবহারের দিকে নিয়ে যেতে পারে এবং খাদ্য উপাদানগুলিতে প্রোটিন অণুর বৈশিষ্ট্য প্রদান করতে পারে³,⁴। অতএব, দুগ্ধজাত পণ্য সহ খাদ্যপণ্যে মেলামাইন যোগ করলে নাইট্রোজেনের পরিমাণ বেড়ে যায়। ফলে, দুধের প্রোটিনের পরিমাণ প্রকৃত পরিমাণের চেয়ে বেশি বলে ভুল সিদ্ধান্তে উপনীত হওয়া গিয়েছিল।
প্রতি গ্রাম মেলামাইন যোগ করলে খাদ্যের প্রোটিনের পরিমাণ ০.৪% বৃদ্ধি পায়। তবে, মেলামাইন পানিতে অত্যন্ত দ্রবণীয় এবং আরও গুরুতর ক্ষতি করতে পারে। দুধের মতো তরল পণ্যে ১.৩ গ্রাম মেলামাইন যোগ করলে দুধের প্রোটিনের পরিমাণ ৩০% পর্যন্ত বৃদ্ধি পেতে পারে৫,৬। যদিও প্রোটিনের পরিমাণ বাড়ানোর জন্য প্রাণীজ এবং এমনকি মানুষের খাদ্যেও মেলামাইন যোগ করা হয়৭, কোডেক্স অ্যালিমেন্টারিয়াস কমিশন (সিএসি) এবং জাতীয় কর্তৃপক্ষ মেলামাইনকে খাদ্য সংযোজক হিসাবে অনুমোদন দেয়নি এবং গিলে ফেললে, শ্বাস নিলে বা ত্বকের মাধ্যমে শোষিত হলে এটিকে বিপজ্জনক হিসাবে তালিকাভুক্ত করেছে। ২০১২ সালে, বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থার (ডব্লিউএইচও) ইন্টারন্যাশনাল এজেন্সি ফর রিসার্চ অন ক্যান্সার মেলামাইনকে ক্লাস ২বি কার্সিনোজেন হিসাবে তালিকাভুক্ত করে কারণ এটি মানব স্বাস্থ্যের জন্য ক্ষতিকর হতে পারে৮। দীর্ঘমেয়াদী মেলামাইনের সংস্পর্শে ক্যান্সার বা কিডনির ক্ষতি হতে পারে২। খাদ্যে থাকা মেলামাইন সায়ানুরিক অ্যাসিডের সাথে জটিল যৌগ গঠন করে পানিতে অদ্রবণীয় হলুদ স্ফটিক তৈরি করতে পারে যা কিডনি এবং মূত্রাশয়ের টিস্যুর ক্ষতি করতে পারে, সেইসাথে মূত্রনালীর ক্যান্সার এবং ওজন হ্রাস ঘটাতে পারে৯,১০। এটি তীব্র খাদ্য বিষক্রিয়া ঘটাতে পারে এবং উচ্চ ঘনত্বে, বিশেষ করে শিশু এবং অল্পবয়সী বাচ্চাদের ক্ষেত্রে, মৃত্যুও ঘটাতে পারে।১১ বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা (WHO) CAC নির্দেশিকার উপর ভিত্তি করে মানুষের জন্য মেলামাইনের সহনীয় দৈনিক গ্রহণমাত্রা (TDI) প্রতি কেজি দৈহিক ওজনের জন্য ০.২ মিলিগ্রাম নির্ধারণ করেছে।১২ মার্কিন খাদ্য ও ঔষধ প্রশাসন (US FDA) শিশু ফর্মুলায় মেলামাইনের সর্বোচ্চ অবশিষ্টাংশের মাত্রা প্রতি কেজি ১ মিলিগ্রাম এবং অন্যান্য খাদ্যে প্রতি কেজি ২.৫ মিলিগ্রাম নির্ধারণ করেছে।২,৭ ২০০৮ সালের সেপ্টেম্বরে, এমন খবর প্রকাশিত হয়েছিল যে বেশ কয়েকটি দেশীয় শিশু ফর্মুলা প্রস্তুতকারক তাদের পণ্যের প্রোটিনের পরিমাণ বাড়ানোর জন্য গুঁড়ো দুধে মেলামাইন যোগ করেছিল, যার ফলে গুঁড়ো দুধে বিষক্রিয়া ঘটে এবং দেশব্যাপী মেলামাইন বিষক্রিয়ার ঘটনা শুরু হয়, যাতে ২,৯৪,০০০-এরও বেশি শিশু অসুস্থ হয় এবং ৫০,০০০-এরও বেশি শিশুকে হাসপাতালে ভর্তি করা হয়।১৩
শহুরে জীবনের অসুবিধা, মা বা শিশুর অসুস্থতার মতো বিভিন্ন কারণে বুকের দুধ খাওয়ানো সবসময় সম্ভব হয় না, যার ফলে শিশুদের খাওয়ানোর জন্য ইনফ্যান্ট ফর্মুলা ব্যবহার করতে হয়। ফলস্বরূপ, গঠনে বুকের দুধের যতটা সম্ভব কাছাকাছি ইনফ্যান্ট ফর্মুলা উৎপাদনের জন্য কারখানা স্থাপন করা হয়েছে¹⁴। বাজারে বিক্রি হওয়া ইনফ্যান্ট ফর্মুলা সাধারণত গরুর দুধ থেকে তৈরি হয় এবং এতে সাধারণত চর্বি, প্রোটিন, শর্করা, ভিটামিন, খনিজ এবং অন্যান্য যৌগের একটি বিশেষ মিশ্রণ থাকে। বুকের দুধের কাছাকাছি হওয়ার জন্য, ফর্মুলার প্রোটিন এবং চর্বির পরিমাণ ভিন্ন ভিন্ন হয় এবং দুধের ধরনের উপর নির্ভর করে, এতে ভিটামিন এবং আয়রনের মতো খনিজ যৌগ যোগ করে পুষ্টিগুণ বাড়ানো হয়¹⁵। যেহেতু শিশুরা একটি সংবেদনশীল গোষ্ঠী এবং বিষক্রিয়ার ঝুঁকি থাকে, তাই স্বাস্থ্যের জন্য গুঁড়ো দুধ খাওয়ার নিরাপত্তা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। চীনা শিশুদের মধ্যে মেলামাইন বিষক্রিয়ার ঘটনার পর, বিশ্বজুড়ে দেশগুলো এই বিষয়ে গভীর মনোযোগ দিয়েছে এবং এই ক্ষেত্রের সংবেদনশীলতাও বেড়েছে। অতএব, শিশুদের স্বাস্থ্য রক্ষার জন্য ইনফ্যান্ট ফর্মুলা উৎপাদনের নিয়ন্ত্রণ জোরদার করা বিশেষভাবে গুরুত্বপূর্ণ। খাদ্যে মেলামাইন শনাক্ত করার বিভিন্ন পদ্ধতি রয়েছে, যার মধ্যে হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC), ইলেক্ট্রোফোরেসিস, সংবেদী পদ্ধতি, স্পেকট্রোফোটোমেট্রি এবং অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসরবেন্ট অ্যাসে¹⁶ অন্তর্ভুক্ত। ২০০৭ সালে, মার্কিন খাদ্য ও ঔষধ প্রশাসন (FDA) খাদ্যে মেলামাইন এবং সায়ানুরিক অ্যাসিড নির্ধারণের জন্য একটি HPLC পদ্ধতি তৈরি ও প্রকাশ করে, যা মেলামাইনের পরিমাণ নির্ধারণের সবচেয়ে কার্যকর পদ্ধতি¹⁷।
একটি নতুন ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি কৌশল ব্যবহার করে পরিমাপ করা শিশুখাদ্যে মেলামাইনের ঘনত্ব প্রতি কিলোগ্রামে ০.৩৩ থেকে ০.৯৬ মিলিগ্রাম (mg kg-1) পর্যন্ত ছিল। ১৮ শ্রীলঙ্কায় একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে সম্পূর্ণ দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের মাত্রা ০.৩৯ থেকে ০.৮৪ mg kg-1 পর্যন্ত থাকে। এছাড়াও, আমদানি করা শিশুখাদ্যের নমুনাগুলিতে মেলামাইনের সর্বোচ্চ মাত্রা ছিল, যথাক্রমে ০.৯৬ এবং ০.৯৪ mg/kg। এই মাত্রাগুলি নিয়ন্ত্রক সীমার (১ mg/kg) নিচে, কিন্তু ভোক্তাদের সুরক্ষার জন্য একটি পর্যবেক্ষণ কর্মসূচি প্রয়োজন। ১৯
বেশ কয়েকটি গবেষণায় ইরানের শিশুখাদ্যে মেলামাইনের মাত্রা পরীক্ষা করা হয়েছে। প্রায় ৬৫% নমুনায় মেলামাইন পাওয়া গেছে, যার গড় পরিমাণ ছিল ০.৭৩ মিলিগ্রাম/কেজি এবং সর্বোচ্চ ৩.৬৩ মিলিগ্রাম/কেজি। অন্য একটি গবেষণায় বলা হয়েছে যে, শিশুখাদ্যে মেলামাইনের মাত্রা ০.৩৫ থেকে ৩.৪০ মাইক্রোগ্রাম/কেজি পর্যন্ত ছিল, যার গড় ছিল ১.৩৮ মাইক্রোগ্রাম/কেজি। সামগ্রিকভাবে, বিভিন্ন গবেষণায় ইরানের শিশুখাদ্যে মেলামাইনের উপস্থিতি ও মাত্রা মূল্যায়ন করা হয়েছে, এবং কিছু নমুনায় নিয়ন্ত্রক কর্তৃপক্ষ কর্তৃক নির্ধারিত সর্বোচ্চ সীমা (২.৫ মিলিগ্রাম/কেজি/ফিড) অতিক্রমকারী মেলামাইন পাওয়া গেছে।
খাদ্য শিল্পে গুঁড়ো দুধের বিপুল প্রত্যক্ষ ও পরোক্ষ ব্যবহার এবং শিশুদের খাওয়ানোর ক্ষেত্রে শিশু ফর্মুলার বিশেষ গুরুত্ব বিবেচনা করে, এই গবেষণার লক্ষ্য ছিল গুঁড়ো দুধ এবং শিশু ফর্মুলায় মেলামাইন সনাক্তকরণের পদ্ধতির বৈধতা যাচাই করা। প্রকৃতপক্ষে, এই গবেষণার প্রথম উদ্দেশ্য ছিল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) এবং অতিবেগুনী (UV) সনাক্তকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করে শিশু ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইন ভেজাল সনাক্তকরণের জন্য একটি দ্রুত, সহজ এবং নির্ভুল পরিমাণগত পদ্ধতি তৈরি করা; দ্বিতীয়ত, এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল ইরানের বাজারে বিক্রি হওয়া শিশু ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের পরিমাণ নির্ণয় করা।
খাদ্য উৎপাদনের স্থানের উপর নির্ভর করে মেলামাইন বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত যন্ত্র ভিন্ন ভিন্ন হয়ে থাকে। দুধ এবং শিশুখাদ্যে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ পরিমাপ করার জন্য একটি সংবেদনশীল এবং নির্ভরযোগ্য HPLC-UV বিশ্লেষণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল। দুগ্ধজাত পণ্যে বিভিন্ন প্রোটিন এবং ফ্যাট থাকে যা মেলামাইন পরিমাপে হস্তক্ষেপ করতে পারে। তাই, সান এট আল. 22-এর মতে, যন্ত্রভিত্তিক বিশ্লেষণের আগে একটি উপযুক্ত এবং কার্যকর পরিশোধন কৌশল প্রয়োজন। এই গবেষণায়, আমরা ডিসপোজেবল সিরিঞ্জ ফিল্টার ব্যবহার করেছি। এই গবেষণায়, আমরা শিশুখাদ্য এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইন পৃথক করার জন্য একটি C18 কলাম ব্যবহার করেছি। চিত্র ১ মেলামাইন সনাক্তকরণের ক্রোমাটোগ্রাম দেখায়। এছাড়াও, ০.১–১.২ মিলিগ্রাম/কেজি মেলামাইনযুক্ত নমুনাগুলির পুনরুদ্ধার ৯৫% থেকে ১০৯% পর্যন্ত ছিল, রিগ্রেশন সমীকরণটি ছিল y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), এবং আপেক্ষিক আদর্শ বিচ্যুতি (RSD) মান ০.৮ থেকে ২% পর্যন্ত ছিল। উপলব্ধ তথ্য থেকে বোঝা যায় যে, পরীক্ষিত ঘনত্বের পরিসরে পদ্ধতিটি নির্ভরযোগ্য (সারণি ১)। মেলামাইনের যন্ত্রগত শনাক্তকরণ সীমা (LOD) এবং পরিমাণ নির্ধারণ সীমা (LOQ) ছিল যথাক্রমে ১ μg mL−1 এবং ৩ μg mL−1। এছাড়াও, মেলামাইনের UV বর্ণালীতে ২৪২ nm-এ একটি শোষণ ব্যান্ড দেখা যায়। শনাক্তকরণ পদ্ধতিটি সংবেদনশীল, নির্ভরযোগ্য এবং নির্ভুল। এই পদ্ধতিটি নিয়মিতভাবে মেলামাইনের মাত্রা নির্ণয়ের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।
বেশ কয়েকজন লেখক একই ধরনের ফলাফল প্রকাশ করেছেন। দুগ্ধজাত পণ্যে মেলামাইন বিশ্লেষণের জন্য একটি হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি-ফোটোডায়োড অ্যারে (HPLC) পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছিল। ২৪০ nm-এ, গুঁড়ো দুধের জন্য পরিমাপের নিম্নসীমা ছিল ৩৪০ μg kg−1 এবং শিশু ফর্মুলার জন্য ছিল ২৮০ μg kg−1। ফিলাজ্জি এট আল. (২০১২) রিপোর্ট করেছেন যে HPLC দ্বারা শিশু ফর্মুলায় মেলামাইন সনাক্ত করা যায়নি। তবে, গুঁড়ো দুধের ৮% নমুনায় ০.৫০৫–০.৮৬ mg/kg মাত্রায় মেলামাইন ছিল। টিটলমিট এট আল.²³ একটি অনুরূপ গবেষণা পরিচালনা করেন এবং হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি-মাস স্পেকট্রোমেট্রি/এমএস (HPLC-MS/MS) দ্বারা শিশু ফর্মুলার (নমুনা সংখ্যা: ৭২) মেলামাইনের পরিমাণ প্রায় ০.০৪৩১–০.৩৪৬ mg kg−1 নির্ধারণ করেন। ভেঙ্কটাসামি এট আল. দ্বারা পরিচালিত একটি গবেষণায়... (২০১০)-এ, শিশুখাদ্য ও দুধে মেলামাইনের পরিমাণ নির্ণয়ের জন্য একটি গ্রিন কেমিস্ট্রি পদ্ধতি (অ্যাসিটোনাইট্রাইল ছাড়া) এবং রিভার্সড-ফেজ হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (RP-HPLC) ব্যবহার করা হয়েছিল। নমুনার ঘনত্বের পরিসর ছিল ১.০ থেকে ৮০ গ্রাম/মিলি এবং ফলাফল ছিল রৈখিক (r > ০.৯৯৯)। এই পদ্ধতিতে ৫–৪০ গ্রাম/মিলি ঘনত্বের পরিসরে ৯৭.২–১০১.২ শতাংশ পুনরুদ্ধার দেখা যায় এবং এর পুনরুৎপাদনযোগ্যতা ছিল ১.০% আপেক্ষিক আদর্শ বিচ্যুতির চেয়ে কম। অধিকন্তু, পর্যবেক্ষিত LOD এবং LOQ ছিল যথাক্রমে ০.১ গ্রাম/মিলি এবং ০.২ গ্রাম/মিলি। লুটার এট আল. (২০১১) HPLC-UV ব্যবহার করে গরুর দুধ এবং দুধ-ভিত্তিক শিশুখাদ্যে মেলামাইন দূষণ নির্ণয় করেন। মেলামাইনের ঘনত্ব ছিল < ০.২ থেকে ২.৫২ মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত। HPLC-UV পদ্ধতির লিনিয়ার ডাইনামিক রেঞ্জ ছিল গরুর দুধের জন্য ০.০৫ থেকে ২.৫ মিলিগ্রাম/কেজি, <১৫% প্রোটিন ভর ভগ্নাংশযুক্ত শিশু ফর্মুলার জন্য ০.১৩ থেকে ৬.২৫ মিলিগ্রাম/কেজি, এবং ১৫% প্রোটিন ভর ভগ্নাংশযুক্ত শিশু ফর্মুলার জন্য ০.২৫ থেকে ১২.৫ মিলিগ্রাম/কেজি। LOD (এবং LOQ)-এর ফলাফল ছিল গরুর দুধের জন্য ০.০৩ মিলিগ্রাম/কেজি (০.০৯ মিলিগ্রাম/কেজি), <১৫% প্রোটিনযুক্ত শিশু ফর্মুলার জন্য ০.০৬ মিলিগ্রাম/কেজি (০.১৮ মিলিগ্রাম/কেজি), এবং ১৫% প্রোটিনযুক্ত শিশু ফর্মুলার জন্য ০.১২ মিলিগ্রাম/কেজি (০.৩৬ মিলিগ্রাম/কেজি), যেখানে LOD এবং LOQ-এর জন্য সিগন্যাল-টু-নয়েজ অনুপাত ছিল যথাক্রমে ৩ এবং ১০২৫। ডাইবেস এট আল। (২০১২) HPLC/DMD ব্যবহার করে শিশুখাদ্য এবং গুঁড়ো দুধের নমুনায় মেলামাইনের মাত্রা পরীক্ষা করেন। শিশুখাদ্যে সর্বনিম্ন ও সর্বোচ্চ মাত্রা ছিল যথাক্রমে ৯.৪৯ মিগ্রা কেজি⁻¹ এবং ২৫৮ মিগ্রা কেজি⁻¹। শনাক্তকরণের সীমা (LOD) ছিল ০.০৫ মিগ্রা কেজি⁻¹।
জাভাইদ ও অন্যান্যরা ফুরিয়ার ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি (FT-MIR) ব্যবহার করে রিপোর্ট করেছেন যে, শিশুখাদ্যে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ 0.002–2 mg kg−1 পরিসরে ছিল (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1)। রেজাই ও অন্যান্যরা²⁷ মেলামাইন পরিমাপের জন্য একটি HPLC-DDA (λ = 220 nm) পদ্ধতি প্রস্তাব করেন এবং গুঁড়ো দুধের জন্য 0.08 μg mL−1 এর একটি LOQ অর্জন করেন, যা এই গবেষণায় প্রাপ্ত মাত্রার চেয়ে কম ছিল। সান ও অন্যান্যরা সলিড ফেজ এক্সট্র্যাকশন (SPE) দ্বারা তরল দুধে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য একটি RP-HPLC-DAD তৈরি করেন। তারা যথাক্রমে 18 এবং 60 μg kg−1²⁸ এর একটি LOD এবং LOQ অর্জন করেন, যা বর্তমান গবেষণার চেয়ে বেশি সংবেদনশীল। মন্টেসানো ও অন্যান্যরা। প্রোটিন সম্পূরকগুলিতে মেলামাইনের পরিমাণ নির্ণয়ের জন্য HPLC-DMD পদ্ধতির কার্যকারিতা নিশ্চিত করা হয়েছে, যার পরিমাপের সীমা 0.05–3 mg/kg, যা এই গবেষণায় ব্যবহৃত পদ্ধতির চেয়ে কম সংবেদনশীল ছিল29।
নিঃসন্দেহে, বিশ্লেষণাত্মক পরীক্ষাগারগুলো বিভিন্ন নমুনায় দূষক পর্যবেক্ষণের মাধ্যমে পরিবেশ সুরক্ষায় একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। তবে, বিশ্লেষণের সময় প্রচুর পরিমাণে বিকারক এবং দ্রাবক ব্যবহারের ফলে বিপজ্জনক অবশিষ্টাংশ তৈরি হতে পারে। তাই, অপারেটর এবং পরিবেশের উপর বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতির প্রতিকূল প্রভাব কমাতে বা দূর করতে ২০০০ সালে গ্রীন অ্যানালিটিক্যাল কেমিস্ট্রি (GAC) তৈরি করা হয়েছিল। মেলামাইন শনাক্ত করার জন্য ক্রোমাটোগ্রাফি, ইলেক্ট্রোফোরেসিস, ক্যাপিলারি ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসরবেন্ট অ্যাসে (ELISA) সহ প্রচলিত মেলামাইন সনাক্তকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছে। তবে, অসংখ্য সনাক্তকরণ পদ্ধতির মধ্যে, ইলেক্ট্রোকেমিক্যাল সেন্সরগুলো তাদের চমৎকার সংবেদনশীলতা, নির্বাচনযোগ্যতা, দ্রুত বিশ্লেষণ সময় এবং ব্যবহার-বান্ধব বৈশিষ্ট্যের কারণে অনেক মনোযোগ আকর্ষণ করেছে। গ্রীন ন্যানোপ্রযুক্তি জৈবিক পথ ব্যবহার করে ন্যানোম্যাটেরিয়াল সংশ্লেষণ করে, যা বিপজ্জনক বর্জ্য উৎপাদন এবং শক্তি খরচ কমাতে পারে, যার ফলে টেকসই অনুশীলনের বাস্তবায়নকে উৎসাহিত করে। উদাহরণস্বরূপ, পরিবেশবান্ধব উপাদান দিয়ে তৈরি ন্যানোকম্পোজিট, মেলামাইনের মতো পদার্থ শনাক্ত করতে বায়োসেন্সরে ব্যবহার করা যেতে পারে³²,³³,³⁴।
গবেষণায় দেখা গেছে যে, প্রচলিত নিষ্কাশন পদ্ধতির তুলনায় উচ্চতর শক্তি দক্ষতা এবং স্থায়িত্বের কারণে সলিড-ফেজ মাইক্রোএক্সট্রাকশন (SPME) কার্যকরভাবে ব্যবহৃত হয়। SPME-এর পরিবেশ-বান্ধবতা এবং শক্তি দক্ষতা এটিকে বিশ্লেষণাত্মক রসায়নে প্রচলিত নিষ্কাশন পদ্ধতির একটি চমৎকার বিকল্প করে তোলে এবং নমুনা প্রস্তুতির জন্য একটি আরও টেকসই ও কার্যকর পদ্ধতি প্রদান করে।
২০১৩ সালে, উ ও তার সহযোগীরা একটি অত্যন্ত সংবেদনশীল এবং নির্বাচনী সারফেস প্লাজমন রেজোন্যান্স (মিনি-এসপিআর) বায়োসেন্সর তৈরি করেন, যা একটি ইমিউনোঅ্যাসে ব্যবহার করে শিশুখাদ্যে মেলামাইন এবং অ্যান্টি-মেলামাইন অ্যান্টিবডির মধ্যে সংযোগ স্থাপনের মাধ্যমে দ্রুত মেলামাইন শনাক্ত করে। ইমিউনোঅ্যাসের (মেলামাইন-সংযুক্ত বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন ব্যবহার করে) সাথে যুক্ত এই এসপিআর বায়োসেন্সরটি একটি সহজে ব্যবহারযোগ্য এবং স্বল্প খরচের প্রযুক্তি, যার শনাক্তকরণ সীমা মাত্র ০.০২ μg mL-136।
নাসিরি এবং আব্বাসিয়ান বাণিজ্যিক নমুনায় মেলামাইন শনাক্ত করার জন্য গ্রাফিন অক্সাইড-কাইটোসান কম্পোজিট (GOCS)-এর সাথে একটি উচ্চ-ক্ষমতাসম্পন্ন বহনযোগ্য সেন্সর ব্যবহার করেছিলেন। এই পদ্ধতিটি অতি-উচ্চ নির্বাচনক্ষমতা, নির্ভুলতা এবং প্রতিক্রিয়া প্রদর্শন করেছিল। GOCS সেন্সরটি উল্লেখযোগ্য সংবেদনশীলতা (২৩৯.১ μM−1), ০.০১ থেকে ২০০ μM পর্যন্ত একটি রৈখিক পরিসর, ১.৭৩ × ১০⁴ এর একটি আকর্ষণ ধ্রুবক এবং ১০ nM পর্যন্ত একটি LOD প্রদর্শন করেছিল। অধিকন্তু, ২০২৪ সালে চন্দ্রশেখর প্রমুখের দ্বারা পরিচালিত একটি গবেষণায় একটি পরিবেশ-বান্ধব এবং সাশ্রয়ী পদ্ধতি গ্রহণ করা হয়েছিল। তারা একটি পরিবেশ-বান্ধব পদ্ধতিতে জিঙ্ক অক্সাইড ন্যানো পার্টিকেল (ZnO-NPs) সংশ্লেষণ করার জন্য বিজারক পদার্থ হিসেবে পেঁপের খোসার নির্যাস ব্যবহার করেছিলেন। পরবর্তীতে, শিশু ফর্মুলায় মেলামাইন নির্ণয়ের জন্য একটি অনন্য মাইক্রো-রামান স্পেকট্রোস্কোপি কৌশল তৈরি করা হয়েছিল। কৃষি বর্জ্য থেকে প্রাপ্ত ZnO-NPs মেলামাইন পর্যবেক্ষণ ও সনাক্তকরণের জন্য একটি মূল্যবান রোগনির্ণয়ক সরঞ্জাম এবং একটি নির্ভরযোগ্য, স্বল্প-ব্যয়ী প্রযুক্তি হিসেবে সম্ভাবনা দেখিয়েছে।
আলিজাদেহ এট আল. (২০২৪) দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন নির্ণয় করার জন্য একটি অত্যন্ত সংবেদনশীল মেটাল-অর্গানিক ফ্রেমওয়ার্ক (MOF) ফ্লুরোসেন্স প্ল্যাটফর্ম ব্যবহার করেছেন। 3σ/S ব্যবহার করে নির্ধারিত সেন্সরটির রৈখিক পরিসর এবং নিম্ন শনাক্তকরণ সীমা ছিল যথাক্রমে ৪০ থেকে ৩৯৬.৪৫ nM (যা ২৫ μg kg−1 থেকে ০.২৫ mg kg−1 এর সমতুল্য) এবং ৪০ nM (যা ২৫ μg kg−1 এর সমতুল্য)। এই পরিসরটি শিশুখাদ্য (১ mg kg−1) এবং অন্যান্য খাদ্য/পশু খাদ্যের নমুনায় (২.৫ mg kg−1) মেলামাইন শনাক্তকরণের জন্য নির্ধারিত সর্বোচ্চ অবশিষ্টাংশ মাত্রা (MRLs) থেকে অনেক নিচে। ফ্লুরোসেন্ট সেন্সর (টারবিয়াম (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন শনাক্তকরণের ক্ষেত্রে HPLC39 এর চেয়ে উচ্চতর নির্ভুলতা এবং আরও সুনির্দিষ্ট পরিমাপ ক্ষমতা প্রদর্শন করেছে। সবুজ রসায়নের বায়োসেন্সর এবং ন্যানোকম্পোজিট শুধু সনাক্তকরণ ক্ষমতাই বৃদ্ধি করে না, বরং টেকসই উন্নয়নের নীতিমালার সাথে সঙ্গতি রেখে পরিবেশগত ঝুঁকিও হ্রাস করে।
মেলামাইন নির্ণয়ের বিভিন্ন পদ্ধতিতে সবুজ রসায়নের নীতি প্রয়োগ করা হয়েছে। একটি পদ্ধতি হলো সাইট্রিক অ্যাসিড দ্বারা ক্রস-লিঙ্কযুক্ত প্রাকৃতিক পোলার পলিমার β-সাইক্লোডেক্সট্রিন ব্যবহার করে একটি সবুজ ডিসপারসিভ সলিড-ফেজ মাইক্রোএক্সট্রাকশন পদ্ধতির বিকাশ, যা শিশু ফর্মুলা এবং গরম জলের মতো নমুনা থেকে মেলামাইন 40-এর কার্যকর নিষ্কাশনের জন্য ব্যবহৃত হয়। আরেকটি পদ্ধতিতে দুধের নমুনায় মেলামাইন নির্ণয়ের জন্য ম্যানিক বিক্রিয়া ব্যবহার করা হয়। এই পদ্ধতিটি সাশ্রয়ী, পরিবেশবান্ধব এবং অত্যন্ত নির্ভুল, যার রৈখিক পরিসর ০.১–২.৫ পিপিএম এবং সনাক্তকরণ সীমা কম 41। অধিকন্তু, ফুরিয়ার ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড ট্রান্সমিশন স্পেকট্রোস্কোপি ব্যবহার করে তরল দুধ এবং শিশু ফর্মুলায় মেলামাইনের পরিমাণগত নির্ণয়ের জন্য একটি সাশ্রয়ী ও পরিবেশবান্ধব পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছে, যার উচ্চ নির্ভুলতা এবং সনাক্তকরণ সীমা যথাক্রমে ১ পিপিএম এবং ৩.৫ পিপিএম 42। এই পদ্ধতিগুলো মেলামাইন নির্ণয়ের জন্য কার্যকর এবং টেকসই পদ্ধতির বিকাশে সবুজ রসায়নের নীতির প্রয়োগ প্রদর্শন করে।
মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য বেশ কিছু গবেষণায় উদ্ভাবনী পদ্ধতি প্রস্তাব করা হয়েছে, যেমন সলিড-ফেজ এক্সট্রাকশন এবং হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC)⁴³-এর ব্যবহার, সেইসাথে দ্রুত হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC), যার জন্য জটিল প্রাক-প্রক্রিয়াকরণ বা আয়ন-জোড় বিকারকের প্রয়োজন হয় না, ফলে রাসায়নিক বর্জ্যের পরিমাণ হ্রাস পায়⁴⁴। এই পদ্ধতিগুলো দুগ্ধজাত পণ্যে মেলামাইন নির্ণয়ের জন্য কেবল সঠিক ফলাফলই প্রদান করে না, বরং সবুজ রসায়নের নীতিগুলোও মেনে চলে, যা বিপজ্জনক রাসায়নিকের ব্যবহার কমিয়ে আনে এবং বিশ্লেষণ প্রক্রিয়ার সামগ্রিক পরিবেশগত প্রভাব হ্রাস করে।
বিভিন্ন ব্র্যান্ডের চল্লিশটি নমুনা তিনবার করে পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ফলাফল সারণি ২-এ উপস্থাপন করা হয়েছে। শিশু ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধের নমুনাগুলিতে মেলামাইনের মাত্রা ছিল যথাক্রমে ০.০০১ থেকে ০.০০৪ মিলিগ্রাম/কেজি এবং ০.০০১ থেকে ০.০৯৫ মিলিগ্রাম/কেজি। শিশু ফর্মুলার তিনটি বয়স-গোষ্ঠীর মধ্যে কোনো উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন লক্ষ্য করা যায়নি। এছাড়াও, ৮০% গুঁড়ো দুধে মেলামাইন শনাক্ত করা হয়েছিল, কিন্তু ৬৫% শিশু ফর্মুলা মেলামাইন দ্বারা দূষিত ছিল।
শিল্পজাত গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের পরিমাণ শিশুখাদ্যের চেয়ে বেশি ছিল এবং এই পার্থক্যটি তাৎপর্যপূর্ণ ছিল (p<0.05) (চিত্র ২)।
প্রাপ্ত ফলাফলগুলি এফডিএ (FDA) দ্বারা নির্ধারিত সীমার (১ এবং ২.৫ মিলিগ্রাম/কেজি-এর নিচে) নীচে ছিল। এছাড়াও, ফলাফলগুলি সিএসি (CAC) (২০১০) এবং ইইউ (EU) দ্বারা নির্ধারিত সীমার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, অর্থাৎ, শিশু ফর্মুলার জন্য সর্বোচ্চ অনুমোদিত সীমা হল ১ মিলিগ্রাম/কেজি এবং দুগ্ধজাত পণ্যের জন্য ২.৫ মিলিগ্রাম/কেজি।
ঘানাতি এট আল.⁴⁷-এর ২০২৩ সালের একটি গবেষণা অনুসারে, ইরানে বিভিন্ন ধরণের প্যাকেটজাত দুধে মেলামাইনের পরিমাণ ছিল ৫০.৭ থেকে ৭৯০ μg kg⁻¹। তাদের ফলাফল এফডিএ (FDA)-এর অনুমোদিত সীমার নিচে ছিল। আমাদের ফলাফল শোডার এট আল.⁴⁸ এবং রিমা এট আল.⁴⁹-এর ফলাফলের চেয়ে কম। শোডার এট আল. (২০১০) দেখেছেন যে ELISA পদ্ধতিতে নির্ধারিত গুঁড়ো দুধে (n=৪৯) মেলামাইনের মাত্রা ছিল ০.৫ থেকে ৫.৫ mg/kg। রিমা এট আল. ফ্লুরোসেন্স স্পেকট্রোফোটোমেট্রির মাধ্যমে গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ বিশ্লেষণ করে দেখেছেন যে গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের পরিমাণ ছিল ০.৭২–৫.৭৬ mg/kg। লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (LC/MS) ব্যবহার করে শিশু ফর্মুলায় (n=৯৪) মেলামাইনের মাত্রা নিরীক্ষণের জন্য ২০১১ সালে কানাডায় একটি গবেষণা পরিচালিত হয়েছিল। মেলামাইনের ঘনত্ব গ্রহণযোগ্য সীমার (প্রাথমিক মান: ০.৫ মিলিগ্রাম কেজি−১) নিচে পাওয়া গেছে। শনাক্তকৃত প্রতারণামূলক মেলামাইনের মাত্রা প্রোটিনের পরিমাণ বাড়ানোর জন্য ব্যবহৃত একটি কৌশল ছিল, এমন সম্ভাবনা কম। তবে, সারের ব্যবহার, কন্টেইনারের ভেতরের জিনিসপত্রের স্থান পরিবর্তন বা অনুরূপ কারণ দ্বারা এটি ব্যাখ্যা করা যায় না। অধিকন্তু, কানাডায় আমদানিকৃত গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের উৎস প্রকাশ করা হয়নি৫০।
হাসানি ও তার সহযোগীরা ২০১৩ সালে ইরানের বাজারে গুঁড়ো দুধ এবং তরল দুধে মেলামাইনের পরিমাণ পরিমাপ করেন এবং একই ধরনের ফলাফল পান। ফলাফলে দেখা যায় যে, গুঁড়ো দুধ এবং তরল দুধের একটি ব্র্যান্ড ছাড়া বাকি সব নমুনাই মেলামাইন দ্বারা দূষিত ছিল, যার মাত্রা গুঁড়ো দুধে ছিল ১.৫০ থেকে ৩০.৩২ μg g−1 এবং দুধে ছিল ০.১১ থেকে ১.৪৮ μg ml−1। উল্লেখযোগ্যভাবে, কোনো নমুনাতেই সায়ানুরিক অ্যাসিড শনাক্ত করা যায়নি, যা ভোক্তাদের জন্য মেলামাইন বিষক্রিয়ার সম্ভাবনা কমিয়ে দেয়। ৫১ পূর্ববর্তী গবেষণায় গুঁড়ো দুধযুক্ত চকোলেট পণ্যে মেলামাইনের ঘনত্ব মূল্যায়ন করা হয়েছে। প্রায় ৯৪% আমদানিকৃত নমুনা এবং ৭৭% ইরানি নমুনায় মেলামাইন পাওয়া গেছে। আমদানিকৃত নমুনায় মেলামাইনের মাত্রা ছিল ০.০৩২ থেকে ২.৬৯২ mg/kg, যেখানে ইরানি নমুনায় এর মাত্রা ছিল ০.০১৩ থেকে ২.৬০০ mg/kg। সামগ্রিকভাবে, ৮৫% নমুনায় মেলামাইন শনাক্ত করা হয়েছিল, কিন্তু শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডে এর মাত্রা অনুমোদিত সীমার উপরে ছিল।৪৪ টিটলমিয়ার ও অন্যান্যরা গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের মাত্রা ০.০০৫২৮ থেকে ০.০১২2 মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত হওয়ার কথা জানিয়েছেন।
সারণি ৩-এ তিনটি বয়স গ্রুপের জন্য ঝুঁকি মূল্যায়নের ফলাফল সংক্ষিপ্তভাবে তুলে ধরা হয়েছে। সকল বয়স গ্রুপেই ঝুঁকির পরিমাণ ১-এর কম ছিল। সুতরাং, শিশু ফর্মুলায় থাকা মেলামাইন থেকে ক্যান্সার সৃষ্টিকারী নয় এমন কোনো স্বাস্থ্য ঝুঁকি নেই।
দুগ্ধজাত পণ্যে কম মাত্রার দূষণ প্রস্তুতির সময় অনিচ্ছাকৃত দূষণের কারণে হতে পারে, অন্যদিকে উচ্চ মাত্রার দূষণ ইচ্ছাকৃতভাবে কিছু যোগ করার কারণে হতে পারে। অধিকন্তু, কম মেলামাইনযুক্ত দুগ্ধজাত পণ্য গ্রহণের ফলে মানব স্বাস্থ্যের জন্য সামগ্রিক ঝুঁকি কম বলে মনে করা হয়। এই সিদ্ধান্তে আসা যায় যে, এত কম মাত্রার মেলামাইনযুক্ত পণ্য গ্রহণ করা ভোক্তার স্বাস্থ্যের জন্য কোনো ঝুঁকি তৈরি করে না৫২।
দুগ্ধ শিল্পে খাদ্য নিরাপত্তা ব্যবস্থাপনার গুরুত্ব, বিশেষ করে জনস্বাস্থ্য সুরক্ষার পরিপ্রেক্ষিতে, গুঁড়ো দুধ এবং শিশুখাদ্যে মেলামাইনের মাত্রা ও অবশিষ্টাংশ মূল্যায়ন এবং তুলনা করার জন্য একটি পদ্ধতি তৈরি ও যাচাই করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। শিশুখাদ্য এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইন নির্ণয়ের জন্য একটি সহজ ও নির্ভুল HPLC-UV স্পেকট্রোফোটোমেট্রিক পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছে। এর নির্ভরযোগ্যতা ও নির্ভুলতা নিশ্চিত করার জন্য পদ্ধতিটি যাচাই করা হয়েছে। পদ্ধতিটির সনাক্তকরণ এবং পরিমাণ নির্ধারণের সীমা শিশুখাদ্য এবং গুঁড়ো দুধে মেলামাইনের মাত্রা পরিমাপের জন্য যথেষ্ট সংবেদনশীল বলে প্রমাণিত হয়েছে। আমাদের তথ্য অনুযায়ী, ইরানের বেশিরভাগ নমুনাতেই মেলামাইন সনাক্ত করা হয়েছে। সনাক্তকৃত সমস্ত মেলামাইনের মাত্রা CAC দ্বারা নির্ধারিত সর্বোচ্চ অনুমোদিত সীমার নিচে ছিল, যা নির্দেশ করে যে এই ধরনের দুগ্ধজাত পণ্য গ্রহণ মানব স্বাস্থ্যের জন্য কোনো ঝুঁকি তৈরি করে না।
ব্যবহৃত সমস্ত রাসায়নিক বিকারক বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের ছিল: মেলামাইন (২,৪,৬-ট্রাইঅ্যামিনো-১,৩,৫-ট্রায়াজিন) ৯৯% বিশুদ্ধ (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও); এইচপিএলসি-গ্রেড অ্যাসিটোনাইট্রাইল (মার্ক, ডার্মস্ট্যাড, জার্মানি); অতিবিশুদ্ধ জল (মিলিপোর, মর্ফহাইম, ফ্রান্স)। ডিসপোজেবল সিরিঞ্জ ফিল্টার (ক্রোমাফিল এক্সট্রা পিভিডিএফ-৪৫/২৫, ছিদ্রের আকার ০.৪৫ μm, মেমব্রেনের ব্যাস ২৫ মিমি) (মাশেরে-নাগেল, ডুরেন, জার্মানি)।
নমুনাগুলো প্রস্তুত করার জন্য একটি আলট্রাসনিক বাথ (এলমা, জার্মানি), একটি সেন্ট্রিফিউজ (বেকম্যান কুলটার, ক্রেফেল্ড, জার্মানি) এবং এইচপিএলসি (নাউয়ার, জার্মানি) ব্যবহার করা হয়েছিল।
একটি ইউভি ডিটেক্টরযুক্ত হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফ (KNAUER, জার্মানি) ব্যবহার করা হয়েছিল। এইচপিএলসি বিশ্লেষণের শর্তাবলী নিম্নরূপ ছিল: একটি ODS-3 C18 অ্যানালিটিক্যাল কলাম (৪.৬ মিমি × ২৫০ মিমি, কণার আকার ৫ μm) (MZ, জার্মানি) সহ একটি UHPLC আলটিমেট সিস্টেম ব্যবহার করা হয়েছিল। এইচপিএলসি এলুয়েন্ট (মোবাইল ফেজ) ছিল একটি TFA/মিথানল মিশ্রণ (৪৫০:৫০ মিলি) যার প্রবাহের হার ছিল ১ মিলি/মিনিট। সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য ছিল ২৪২ এনএম। ইনজেকশনের পরিমাণ ছিল ১০০ μL, কলামের তাপমাত্রা ছিল ২০ °C। যেহেতু ওষুধটির রিটেনশন টাইম দীর্ঘ (১৫ মিনিট), তাই পরবর্তী ইনজেকশনটি ২৫ মিনিট পর করা উচিত। মেলামাইন স্ট্যান্ডার্ডের রিটেনশন টাইম এবং ইউভি স্পেকট্রাম পিকের তুলনা করে মেলামাইন শনাক্ত করা হয়েছিল।
জল ব্যবহার করে মেলামাইনের একটি স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (১০ μg/mL) তৈরি করা হয়েছিল এবং আলো থেকে দূরে একটি রেফ্রিজারেটরে (৪ °C) সংরক্ষণ করা হয়েছিল। স্টক দ্রবণটিকে মোবাইল ফেজ দিয়ে লঘু করে ওয়ার্কিং স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ প্রস্তুত করুন। প্রতিটি স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ HPLC-তে ৭ বার ইনজেক্ট করা হয়েছিল। নির্ধারিত পিক এরিয়া এবং নির্ধারিত ঘনত্বের রিগ্রেশন বিশ্লেষণের মাধ্যমে ক্যালিব্রেশন সমীকরণ ১০ গণনা করা হয়েছিল।
ইরানের স্থানীয় সুপারমার্কেট এবং ফার্মেসি থেকে বিভিন্ন বয়সের (০-৬ মাস, ৬-১২ মাস, এবং >১২ মাস) শিশুদের খাওয়ানোর জন্য বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ গরুর দুধের গুঁড়ো (২০টি নমুনা) এবং গরুর দুধ-ভিত্তিক বিভিন্ন ব্র্যান্ডের শিশু ফর্মুলার নমুনা (২০টি নমুনা) সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং বিশ্লেষণের আগ পর্যন্ত রেফ্রিজারেটরের তাপমাত্রায় (৪ °C) সংরক্ষণ করা হয়েছিল। এরপর, ১ ± ০.০১ গ্রাম সমজাতীয় দুধের গুঁড়ো ওজন করে অ্যাসিটোনাইট্রিল:পানির (৫০:৫০, v/v; ৫ মিলি) সাথে মেশানো হয়েছিল। মিশ্রণটি ১ মিনিট নাড়ানো হয়েছিল, তারপর একটি আলট্রাসনিক বাথে ৩০ মিনিট ধরে সনিক করা হয়েছিল এবং সবশেষে ১ মিনিট ঝাঁকানো হয়েছিল। এরপর মিশ্রণটিকে ঘরের তাপমাত্রায় ১০ মিনিটের জন্য ৯০০০ × g গতিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং উপরের তরল অংশটি একটি ০.৪৫ μm সিরিঞ্জ ফিল্টার ব্যবহার করে একটি ২ মিলি অটোস্যাম্পলার ভায়ালে ছেঁকে নেওয়া হয়েছিল। এরপর পরিস্রুত দ্রবণ (২৫০ μl) পানির (৭৫০ μl) সাথে মিশিয়ে HPLC সিস্টেমে¹⁰,⁴² ইনজেক্ট করা হয়েছিল।
পদ্ধতিটির বৈধতা যাচাই করার জন্য, আমরা সর্বোত্তম পরিস্থিতিতে রিকভারি, অ্যাকুরেসি, লিমিট অফ ডিটেকশন (LOD), লিমিট অফ কোয়ান্টিফিকেশন (LOQ) এবং প্রিসিশন নির্ণয় করেছি। LOD-কে সেই স্যাম্পল কন্টেন্ট হিসেবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে যার পিক হাইট বেসলাইন নয়েজ লেভেলের তিনগুণ। অন্যদিকে, যে স্যাম্পল কন্টেন্টের পিক হাইট সিগন্যাল-টু-নয়েজ রেশিওর ১০ গুণ, তাকে LOQ হিসেবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে।
সাতটি ডেটা পয়েন্ট সমন্বিত একটি ক্যালিব্রেশন কার্ভ ব্যবহার করে ডিভাইসটির প্রতিক্রিয়া নির্ধারণ করা হয়েছিল। বিভিন্ন মাত্রার মেলামাইন ব্যবহার করা হয়েছিল (০, ০.২, ০.৩, ০.৫, ০.৮, ১ এবং ১.২)। মেলামাইন গণনা পদ্ধতির রৈখিকতা নির্ধারণ করা হয়েছিল। এছাড়াও, ব্ল্যাঙ্ক নমুনাগুলিতে বিভিন্ন মাত্রার মেলামাইন যোগ করা হয়েছিল। ইনফ্যান্ট ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধের নমুনায় ০.১–১.২ μg mL−1 স্ট্যান্ডার্ড মেলামাইন দ্রবণ ক্রমাগত ইনজেক্ট করে ক্যালিব্রেশন কার্ভটি তৈরি করা হয়েছিল এবং এর R2 = ০.৯৯২৫। পদ্ধতিটির পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা এবং পুনরুৎপাদনযোগ্যতার মাধ্যমে নির্ভুলতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং এটি প্রথম ও পরবর্তী তিন দিনে (তিনবার করে) নমুনা ইনজেক্ট করার মাধ্যমে সম্পন্ন করা হয়েছিল। যোগ করা মেলামাইনের তিনটি ভিন্ন ঘনত্বের জন্য RSD % গণনা করে পদ্ধতিটির পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। নির্ভুলতা নির্ধারণের জন্য রিকভারি স্টাডি করা হয়েছিল। শিশু ফর্মুলা এবং গুঁড়ো দুধের নমুনায় মেলামাইনের ঘনত্বের তিনটি স্তরে (0.1, 1.2, 2) নিষ্কাশন পদ্ধতির মাধ্যমে পুনরুদ্ধারের মাত্রা গণনা করা হয়েছিল9,11,15।
নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে আনুমানিক দৈনিক গ্রহণমাত্রা (EDI) নির্ধারণ করা হয়েছিল: EDI = Ci × Cc/BW।
যেখানে Ci হলো গড় মেলামাইনের পরিমাণ, Cc হলো দুধ পানের পরিমাণ এবং BW হলো শিশুদের গড় ওজন।
SPSS 24 ব্যবহার করে ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। কোলমোগোরভ-স্মিরনভ পরীক্ষার মাধ্যমে ডেটার স্বাভাবিকতা যাচাই করা হয়েছিল; সমস্ত ডেটা ছিল নন-প্যারামেট্রিক (p = 0)। তাই, গ্রুপগুলোর মধ্যে তাৎপর্যপূর্ণ পার্থক্য নির্ধারণের জন্য ক্রুসকাল-ওয়ালিস পরীক্ষা এবং ম্যান-হুইটনি পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছিল।
ইনগেলফিঙ্গার, জুনিয়র। মেলামাইন এবং বিশ্বব্যাপী খাদ্য দূষণে এর প্রভাব। নিউ ইংল্যান্ড জার্নাল অফ মেডিসিন 359(26), 2745–2748 (2008)।
লিঞ্চ, আরএ, প্রমুখ। শিশুদের বাটিতে মেলামাইনের স্থানান্তরের উপর pH-এর প্রভাব। আন্তর্জাতিক খাদ্য দূষণ জার্নাল, ২, ১–৮ (২০১৫)।
ব্যারেট, এমপি এবং গিলবার্ট, আইএইচ ট্রাইপানোসোমের অভ্যন্তরে বিষাক্ত যৌগের প্রয়োগ। প্রোগ্রেস ইন প্যারাসাইটোলজি ৬৩, ১২৫–১৮৩ (২০০৬)।
নির্মাণ, এমএফ, প্রমুখ। ঔষধ সরবরাহ বাহন হিসেবে মেলামাইন ডেনড্রাইমারের ইন ভিট্রো এবং ইন ভিভো মূল্যায়ন। ইন্টারন্যাশনাল জার্নাল অফ ফার্মেসি, 281(1–2), 129–132(2004)।
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা। মেলামাইন ও সায়ানুরিক অ্যাসিডের বিষক্রিয়াগত দিক পর্যালোচনা বিষয়ক বিশেষজ্ঞ সভা ১–৪ (২০০৮)।
হাও, একে-সি., কোয়ান, টিএইচ এবং লি, পিকে-টি. মেলামাইন বিষক্রিয়া এবং কিডনি। জার্নাল অফ দ্য আমেরিকান সোসাইটি অফ নেফ্রোলজি 20(2), 245–250 (2009)।
ওজতুর্ক, এস. এবং দেমির, এন.। উচ্চ কার্যক্ষম তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (এইচপিএলসি) দ্বারা দুগ্ধজাত পণ্যে মেলামাইন শনাক্তকরণের জন্য একটি অভিনব আইম্যাক (IMAC) অধিশোষকের উন্নয়ন। জার্নাল অফ ফুড সিন্থেসিস অ্যান্ড অ্যানালাইসিস ১০০, ১০৩৯৩১ (২০২১)।
চানসুবর্ণ, ভি., প্যানিক, এস. এবং ইমিম, এ.। ম্যানিক গ্রিন বিক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে তরল দুধে মেলামাইনের সরল বর্ণালিবীক্ষণিক নির্ণয়। স্পেকট্রোকেম. অ্যাক্টা পার্ট এ মল. বায়োমল. স্পেকট্রোস্ক. ১১৩, ১৫৪–১৫৮ (২০১৩)।
ডিয়াবেস, এম. এবং এল-হাবিব, আর. এইচপিএলসি/ডায়োড অ্যারে ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা শিশু ফর্মুলা, গুঁড়ো দুধ এবং পাঙ্গাস মাছের নমুনায় মেলামাইন নির্ণয়। জার্নাল অফ এনভায়রনমেন্টাল অ্যানালিটিক্যাল টক্সিকোলজি, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012)।
স্কিনার, কে.জি., থমাস, জে.ডি., এবং অস্টারলোহ, জে.ডি. মেলামাইনের বিষাক্ততা। জার্নাল অফ মেডিকেল টক্সিকোলজি, ৬, ৫০–৫৫ (২০১০)।
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা (WHO), মেলামাইন এবং সায়ানুরিক অ্যাসিডের বিষবিদ্যা এবং স্বাস্থ্যগত দিক: হেলথ কানাডার সহায়তায় অনুষ্ঠিত একটি WHO/FAO যৌথ বিশেষজ্ঞ সভার প্রতিবেদন, অটোয়া, কানাডা, ১-৪ ডিসেম্বর ২০০৮ (২০০৯)।
কর্মা, এসএ, প্রমুখ। নতুন কার্যকরী কাঠামোগত লিপিডযুক্ত শিশু ফর্মুলা পাউডার এবং বাণিজ্যিক শিশু ফর্মুলার লিপিড গঠন ও গুণমানের তুলনামূলক অধ্যয়ন। ইউরোপীয় খাদ্য গবেষণা ও প্রযুক্তি ২৪৬, ২৫৬৯–২৫৮৬ (২০২০)।
এল-ওয়াসিফ, এম. এবং হাশেম, এইচ.। পাম তেল ব্যবহার করে শিশুখাদ্যের পুষ্টিগুণ, বৈশিষ্ট্য এবং সংরক্ষণকাল বৃদ্ধি। মিডল ইস্ট জার্নাল অফ এগ্রিকালচারাল রিসার্চ ৬, ২৭৪–২৮১ (২০১৭)।
ইন, ডব্লিউ., এট আল। মেলামাইনের বিরুদ্ধে মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি উৎপাদন এবং কাঁচা দুধ, গুঁড়ো দুধ এবং পশুখাদ্যে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য একটি পরোক্ষ প্রতিযোগিতামূলক ELISA পদ্ধতির উন্নয়ন। জার্নাল অফ এগ্রিকালচারাল অ্যান্ড ফুড কেমিস্ট্রি 58(14), 8152–8157 (2010)।