nature.com দেখার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজার সংস্করণটি ব্যবহার করছেন তাতে সীমিত CSS সমর্থন রয়েছে। সর্বোত্তম অভিজ্ঞতার জন্য, আমরা আপনাকে সর্বশেষ ব্রাউজার সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্যতা মোড বন্ধ করে দিন)। উপরন্তু, অব্যাহত সমর্থন নিশ্চিত করার জন্য, এই সাইটে স্টাইল বা জাভাস্ক্রিপ্ট অন্তর্ভুক্ত থাকবে না।
মেলামাইন একটি স্বীকৃত খাদ্য দূষণকারী যা দুর্ঘটনাক্রমে এবং ইচ্ছাকৃতভাবে নির্দিষ্ট খাদ্য শ্রেণীতে উপস্থিত থাকতে পারে। এই গবেষণার লক্ষ্য ছিল শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন সনাক্তকরণ এবং পরিমাণ নির্ধারণ যাচাই করা। ইরানের বিভিন্ন অঞ্চল থেকে শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়ো সহ মোট 40টি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ খাদ্য নমুনা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। নমুনাগুলির আনুমানিক মেলামাইন সামগ্রী একটি উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-আল্ট্রাভায়োলেট (HPLC-UV) সিস্টেম ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। 0.1–1.2 μg mL−1 পরিসরে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য একটি ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা (R2 = 0.9925) তৈরি করা হয়েছিল। পরিমাণ নির্ধারণ এবং সনাক্তকরণের সীমা ছিল যথাক্রমে 1 μg mL−1 এবং 3 μg mL−1। শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ফলাফলগুলি দেখায় যে শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়ো নমুনায় মেলামাইনের মাত্রা যথাক্রমে 0.001–0.095 mg kg−1 এবং 0.001–0.004 mg kg−1 ছিল। এই মানগুলি ইইউ আইন এবং কোডেক্স অ্যালিমেন্টারিয়াসের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ। এটি মনে রাখা গুরুত্বপূর্ণ যে মেলামাইনের পরিমাণ কম থাকা এই দুগ্ধজাত পণ্যগুলি ভোক্তাদের স্বাস্থ্যের জন্য উল্লেখযোগ্য ঝুঁকি তৈরি করে না। ঝুঁকি মূল্যায়নের ফলাফল দ্বারাও এটি সমর্থিত।
মেলামাইন হল একটি জৈব যৌগ যার আণবিক সূত্র C3H6N6, যা সায়ানামাইড থেকে প্রাপ্ত। পানিতে এর দ্রাব্যতা খুবই কম এবং প্রায় 66% নাইট্রোজেন রয়েছে। মেলামাইন হল একটি বহুল ব্যবহৃত শিল্প যৌগ যার প্লাস্টিক, সার এবং খাদ্য প্রক্রিয়াকরণ সরঞ্জাম (খাদ্য প্যাকেজিং এবং রান্নাঘরের জিনিসপত্র সহ) উৎপাদনে বিস্তৃত বৈধ ব্যবহার রয়েছে। রোগের চিকিৎসায় মেলামাইন ওষুধ বাহক হিসেবেও ব্যবহৃত হয়। মেলামাইনে নাইট্রোজেনের উচ্চ অনুপাত যৌগের অপব্যবহারের কারণ হতে পারে এবং খাদ্য উপাদানগুলিতে প্রোটিন অণুর বৈশিষ্ট্য প্রদান করতে পারে 3,4। অতএব, দুগ্ধজাত পণ্য সহ খাদ্য পণ্যগুলিতে মেলামাইন যোগ করলে নাইট্রোজেনের পরিমাণ বৃদ্ধি পায়। সুতরাং, ভুলভাবে সিদ্ধান্ত নেওয়া হয়েছিল যে দুধে প্রোটিনের পরিমাণ আসলের চেয়ে বেশি।
প্রতি গ্রাম মেলামাইন যোগ করলে খাবারের প্রোটিনের পরিমাণ ০.৪% বৃদ্ধি পাবে। তবে, মেলামাইন পানিতে অত্যন্ত দ্রবণীয় এবং আরও গুরুতর ক্ষতি করতে পারে। দুধের মতো তরল পণ্যে ১.৩ গ্রাম মেলামাইন যোগ করলে দুধের প্রোটিনের পরিমাণ ৩০% বৃদ্ধি পেতে পারে। প্রোটিনের পরিমাণ বৃদ্ধির জন্য প্রাণী এবং এমনকি মানুষের খাবারে মেলামাইন যোগ করা হলেও, কোডেক্স অ্যালিমেন্টারিয়াস কমিশন (CAC) এবং জাতীয় কর্তৃপক্ষ মেলামাইনকে খাদ্য সংযোজন হিসেবে অনুমোদন দেয়নি এবং গিলে ফেলা, শ্বাস নেওয়া বা ত্বকের মাধ্যমে শোষিত হলে এটি বিপজ্জনক হিসাবে তালিকাভুক্ত করেছে। ২০১২ সালে, বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থার (WHO) ইন্টারন্যাশনাল এজেন্সি ফর রিসার্চ অন ক্যান্সার মেলামাইনকে ক্লাস ২বি কার্সিনোজেন হিসেবে তালিকাভুক্ত করেছে কারণ এটি মানুষের স্বাস্থ্যের জন্য ক্ষতিকারক হতে পারে। মেলামাইনের দীর্ঘমেয়াদী সংস্পর্শে ক্যান্সার বা কিডনির ক্ষতি হতে পারে। খাবারে মেলামাইন সায়ানুরিক অ্যাসিডের সাথে মিশে জল-অদ্রবণীয় হলুদ স্ফটিক তৈরি করতে পারে যা কিডনি এবং মূত্রাশয়ের টিস্যুর ক্ষতি করতে পারে, সেইসাথে মূত্রনালীর ক্যান্সার এবং ওজন হ্রাস করতে পারে। এটি তীব্র খাদ্যে বিষক্রিয়া এবং উচ্চ ঘনত্বে মৃত্যু ঘটাতে পারে, বিশেষ করে শিশু এবং ছোট বাচ্চাদের ক্ষেত্রে।11 বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা (WHO) CAC নির্দেশিকা অনুসারে মানুষের জন্য মেলামাইনের সহনীয় দৈনিক গ্রহণ (TDI) 0.2 মিলিগ্রাম/কেজি দৈহিক ওজন নির্ধারণ করেছে।12 মার্কিন খাদ্য ও ওষুধ প্রশাসন (US FDA) মেলামাইনের সর্বোচ্চ অবশিষ্টাংশের মাত্রা শিশু সূত্রে 1 মিলিগ্রাম/কেজি এবং অন্যান্য খাবারে 2.5 মিলিগ্রাম/কেজি নির্ধারণ করেছে।2,7 সেপ্টেম্বর 2008 সালে, জানা গেছে যে বেশ কয়েকটি দেশীয় শিশু সূত্র প্রস্তুতকারক তাদের পণ্যের প্রোটিনের পরিমাণ বাড়ানোর জন্য দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন যোগ করেছে, যার ফলে দুধের গুঁড়োতে বিষক্রিয়া দেখা দিয়েছে এবং দেশব্যাপী মেলামাইন বিষক্রিয়ার ঘটনা ঘটেছে যা 294,000 এরও বেশি শিশুকে অসুস্থ করে তুলেছে এবং 50,000 এরও বেশি শিশুকে হাসপাতালে ভর্তি করেছে। 13
শহুরে জীবনের অসুবিধা, মা বা শিশুর অসুস্থতার মতো বিভিন্ন কারণে বুকের দুধ খাওয়ানো সবসময় সম্ভব হয় না, যার ফলে শিশুদের খাওয়ানোর জন্য ইনফ্যান্ট ফর্মুলা ব্যবহার করা হয়। ফলস্বরূপ, এমন কারখানা তৈরি করা হয়েছে যেখানে ইনফ্যান্ট ফর্মুলা তৈরি করা হয় যা যতটা সম্ভব বুকের দুধের কাছাকাছি থাকে14। বাজারে বিক্রি হওয়া ইনফ্যান্ট ফর্মুলা সাধারণত গরুর দুধ থেকে তৈরি করা হয় এবং সাধারণত চর্বি, প্রোটিন, কার্বোহাইড্রেট, ভিটামিন, খনিজ এবং অন্যান্য যৌগের একটি বিশেষ মিশ্রণ দিয়ে তৈরি করা হয়। বুকের দুধের কাছাকাছি থাকার জন্য, ফর্মুলার প্রোটিন এবং ফ্যাটের পরিমাণ পরিবর্তিত হয় এবং দুধের ধরণের উপর নির্ভর করে, এগুলি ভিটামিন এবং খনিজ যেমন আয়রন দিয়ে সুরক্ষিত করা হয়15। যেহেতু শিশুরা একটি সংবেদনশীল গোষ্ঠী এবং বিষক্রিয়ার ঝুঁকি থাকে, তাই দুধের গুঁড়ো খাওয়ার নিরাপত্তা স্বাস্থ্যের জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। চীনা শিশুদের মধ্যে মেলামাইন বিষক্রিয়ার ঘটনার পর, বিশ্বের বিভিন্ন দেশ এই বিষয়টির প্রতি গভীর মনোযোগ দিয়েছে এবং এই ক্ষেত্রের সংবেদনশীলতাও বৃদ্ধি পেয়েছে। অতএব, শিশুদের স্বাস্থ্য রক্ষার জন্য ইনফ্যান্ট ফর্মুলা উৎপাদন নিয়ন্ত্রণ জোরদার করা বিশেষভাবে গুরুত্বপূর্ণ। খাবারে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য বিভিন্ন পদ্ধতি রয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC), ইলেক্ট্রোফোরেসিস, সংবেদনশীল পদ্ধতি, স্পেকট্রোফটোমেট্রি এবং অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাসে। 2007 সালে, মার্কিন খাদ্য ও ওষুধ প্রশাসন (FDA) খাবারে মেলামাইন এবং সায়ানিউরিক অ্যাসিড নির্ধারণের জন্য একটি HPLC পদ্ধতি তৈরি এবং প্রকাশ করে, যা মেলামাইনের পরিমাণ নির্ধারণের জন্য সবচেয়ে কার্যকর পদ্ধতি।
নতুন ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি কৌশল ব্যবহার করে পরিমাপ করা শিশু সূত্রে মেলামাইনের ঘনত্ব প্রতি কিলোগ্রামে 0.33 থেকে 0.96 মিলিগ্রাম (mg kg-1) পর্যন্ত ছিল। 18 শ্রীলঙ্কায় একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে পুরো দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের মাত্রা 0.39 থেকে 0.84 mg kg-1 পর্যন্ত ছিল। এছাড়াও, আমদানি করা শিশু সূত্রের নমুনাগুলিতে সর্বোচ্চ মাত্রা মেলামাইন পাওয়া গেছে, যথাক্রমে 0.96 এবং 0.94 mg/kg। এই মাত্রাগুলি নিয়ন্ত্রক সীমার (1 mg/kg) নীচে, তবে ভোক্তাদের সুরক্ষার জন্য একটি পর্যবেক্ষণ কর্মসূচি প্রয়োজন। 19
বেশ কয়েকটি গবেষণায় ইরানি শিশু সূত্রে মেলামাইনের মাত্রা পরীক্ষা করা হয়েছে। প্রায় ৬৫% নমুনায় মেলামাইন ছিল, গড়ে ০.৭৩ মিলিগ্রাম/কেজি এবং সর্বোচ্চ ৩.৬৩ মিলিগ্রাম/কেজি। আরেকটি গবেষণায় জানা গেছে যে শিশু সূত্রে মেলামাইনের মাত্রা ০.৩৫ থেকে ৩.৪০ মাইক্রোগ্রাম/কেজি পর্যন্ত ছিল, গড়ে ১.৩৮ মাইক্রোগ্রাম/কেজি। সামগ্রিকভাবে, ইরানি শিশু সূত্রে মেলামাইনের উপস্থিতি এবং মাত্রা বিভিন্ন গবেষণায় মূল্যায়ন করা হয়েছে, কিছু নমুনায় মেলামাইন রয়েছে যা নিয়ন্ত্রক কর্তৃপক্ষ কর্তৃক নির্ধারিত সর্বোচ্চ সীমা (২.৫ মিলিগ্রাম/কেজি/খাওয়ানো) অতিক্রম করেছে।
খাদ্য শিল্পে দুধের গুঁড়োর বিপুল প্রত্যক্ষ ও পরোক্ষ ব্যবহার এবং শিশুদের খাওয়ানোর ক্ষেত্রে শিশু সূত্রের বিশেষ গুরুত্ব বিবেচনা করে, এই গবেষণার লক্ষ্য ছিল দুধের গুঁড়ো এবং শিশু সূত্রে মেলামাইন সনাক্তকরণ পদ্ধতি যাচাই করা। প্রকৃতপক্ষে, এই গবেষণার প্রথম লক্ষ্য ছিল উচ্চ কার্যকারিতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) এবং অতিবেগুনী (UV) সনাক্তকরণ ব্যবহার করে শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন ভেজাল সনাক্তকরণের জন্য একটি দ্রুত, সহজ এবং সঠিক পরিমাণগত পদ্ধতি তৈরি করা; দ্বিতীয়ত, এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল ইরানের বাজারে বিক্রি হওয়া শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের পরিমাণ নির্ধারণ করা।
মেলামাইন বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত যন্ত্রগুলি খাদ্য উৎপাদনের অবস্থানের উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হয়। দুধ এবং শিশু সূত্রে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ পরিমাপ করার জন্য একটি সংবেদনশীল এবং নির্ভরযোগ্য HPLC-UV বিশ্লেষণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল। দুগ্ধজাত পণ্যগুলিতে বিভিন্ন প্রোটিন এবং চর্বি থাকে যা মেলামাইন পরিমাপে হস্তক্ষেপ করতে পারে। অতএব, সান এট আল 22 দ্বারা উল্লিখিত হিসাবে, যন্ত্র বিশ্লেষণের আগে একটি উপযুক্ত এবং কার্যকর পরিষ্কার কৌশল প্রয়োজন। এই গবেষণায়, আমরা ডিসপোজেবল সিরিঞ্জ ফিল্টার ব্যবহার করেছি। এই গবেষণায়, আমরা শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন পৃথক করার জন্য একটি C18 কলাম ব্যবহার করেছি। চিত্র 1 মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য ক্রোমাটোগ্রাম দেখায়। এছাড়াও, 0.1–1.2 মিলিগ্রাম/কেজি মেলামাইন ধারণকারী নমুনাগুলির পুনরুদ্ধার 95% থেকে 109% পর্যন্ত ছিল, রিগ্রেশন সমীকরণ ছিল y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), এবং আপেক্ষিক মান বিচ্যুতি (RSD) মান 0.8 থেকে 2% পর্যন্ত ছিল। উপলব্ধ তথ্য থেকে বোঝা যায় যে, অধ্যয়নকৃত ঘনত্ব পরিসরে (সারণী ১) পদ্ধতিটি নির্ভরযোগ্য। মেলামাইনের সনাক্তকরণের যন্ত্রগত সীমা (LOD) এবং পরিমাণ নির্ধারণের সীমা (LOQ) যথাক্রমে ১ μg mL−১ এবং ৩ μg mL−১ ছিল। এছাড়াও, মেলামাইনের UV বর্ণালী ২৪২ nm-এ একটি শোষণ ব্যান্ড প্রদর্শন করেছে। সনাক্তকরণ পদ্ধতিটি সংবেদনশীল, নির্ভরযোগ্য এবং নির্ভুল। এই পদ্ধতিটি মেলামাইন স্তরের নিয়মিত নির্ধারণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।
একই রকম ফলাফল বেশ কয়েকজন লেখক প্রকাশ করেছেন। দুগ্ধজাত পণ্যে মেলামাইন বিশ্লেষণের জন্য একটি উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ফটোডিওড অ্যারে (HPLC) পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছিল। ২৪০ ন্যানোমিটারে দুধের গুঁড়োর জন্য পরিমাপের নিম্ন সীমা ছিল ৩৪০ μg kg−১ এবং শিশু সূত্রের জন্য ২৮০ μg kg−১। ফিলাজ্জি এট আল. (২০১২) রিপোর্ট করেছেন যে HPLC দ্বারা শিশু সূত্রে মেলামাইন সনাক্ত করা যায়নি। তবে, দুধের গুঁড়োর ৮% নমুনায় ০.৫০৫–০.৮৬ মিলিগ্রাম/কেজি স্তরে মেলামাইন রয়েছে। Tittlemiet এট আল.২৩ একই রকম একটি গবেষণা পরিচালনা করেছেন এবং উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ভর স্পেকট্রোমেট্রি/MS (HPLC-MS/MS) দ্বারা শিশু সূত্রে মেলামাইনের পরিমাণ (নমুনা নম্বর: ৭২) প্রায় ০.০৪৩১–০.৩৪৬ মিলিগ্রাম kg−১ নির্ধারণ করেছেন। ভেঙ্কটাসামি এট আল দ্বারা পরিচালিত একটি গবেষণায়। (২০১০), শিশু সূত্র এবং দুধে মেলামাইনের পরিমাণ অনুমান করার জন্য একটি সবুজ রসায়ন পদ্ধতি (এসিটোনাইট্রাইল ছাড়া) এবং বিপরীত-পর্যায়ের উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (RP-HPLC) ব্যবহার করা হয়েছিল। নমুনা ঘনত্বের পরিসর ছিল ১.০ থেকে ৮০ গ্রাম/মিলি এবং প্রতিক্রিয়া ছিল রৈখিক (r > ০.৯৯৯)। পদ্ধতিটি ৫-৪০ গ্রাম/মিলি ঘনত্বের পরিসরের তুলনায় ৯৭.২-১০১.২ পুনরুদ্ধার দেখিয়েছে এবং পুনরুৎপাদনযোগ্যতা ১.০% এর কম আপেক্ষিক মান বিচ্যুতি ছিল। অধিকন্তু, পর্যবেক্ষণ করা LOD এবং LOQ যথাক্রমে ০.১ গ্রাম mL−১ এবং ০.২ গ্রাম mL−১২৪ ছিল। লুটার এবং অন্যান্যরা (২০১১) HPLC-UV ব্যবহার করে গরুর দুধ এবং দুধ-ভিত্তিক শিশু সূত্রে মেলামাইন দূষণ নির্ধারণ করেছেন। মেলামাইনের ঘনত্ব < ০.২ থেকে ২.৫২ মিলিগ্রাম kg−১ পর্যন্ত ছিল। HPLC-UV পদ্ধতির রৈখিক গতিশীল পরিসর ছিল গরুর দুধের জন্য 0.05 থেকে 2.5 mg kg−1, <15% প্রোটিন ভর ভগ্নাংশ সহ শিশু সূত্রের জন্য 0.13 থেকে 6.25 mg kg−1 এবং 15% প্রোটিন ভর ভগ্নাংশ সহ শিশু সূত্রের জন্য 0.25 থেকে 12.5 mg kg−1। LOD (এবং LOQ) ফলাফল ছিল গরুর দুধের জন্য 0.03 mg kg−1 (0.09 mg kg−1), <15% প্রোটিন সহ শিশু সূত্রের জন্য 0.06 mg kg−1 (0.18 mg kg−1), এবং শিশু সূত্র 15% প্রোটিনের জন্য 0.12 mg kg−1 (0.36 mg kg−1), LOD এবং LOQ এর জন্য যথাক্রমে 3 এবং 1025 এর সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত সহ। Diebes et al. (২০১২) HPLC/DMD ব্যবহার করে শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়ো নমুনায় মেলামাইনের মাত্রা পরীক্ষা করে। শিশু সূত্রে, সর্বনিম্ন এবং সর্বোচ্চ মাত্রা ছিল যথাক্রমে ৯.৪৯ মিলিগ্রাম কেজি−১ এবং ২৫৮ মিলিগ্রাম কেজি−১। সনাক্তকরণের সীমা (LOD) ছিল ০.০৫ মিলিগ্রাম কেজি−১।
জাভেদ প্রমুখ রিপোর্ট করেছেন যে ফোরিয়ার ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি (FT-MIR) দ্বারা শিশু সূত্রে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ 0.002–2 mg kg−1 এর মধ্যে ছিল (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1)। রেজাই প্রমুখ। 27 মেলামাইন অনুমান করার জন্য একটি HPLC-DDA (λ = 220 nm) পদ্ধতি প্রস্তাব করেছিলেন এবং দুধের গুঁড়োর জন্য 0.08 μg mL−1 এর LOQ অর্জন করেছিলেন, যা এই গবেষণায় প্রাপ্ত স্তরের চেয়ে কম ছিল। সান প্রমুখ। কঠিন পর্যায় নিষ্কাশন (SPE) দ্বারা তরল দুধে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য একটি RP-HPLC-DAD তৈরি করেছিলেন। তারা যথাক্রমে 18 এবং 60 μg kg−128 এর LOD এবং LOQ অর্জন করেছিলেন, যা বর্তমান গবেষণার চেয়ে বেশি সংবেদনশীল। মন্টেসানো প্রমুখ। প্রোটিন সম্পূরকগুলিতে মেলামাইনের পরিমাণ নির্ধারণের জন্য HPLC-DMD পদ্ধতির কার্যকারিতা নিশ্চিত করেছে, যার পরিমাণ 0.05–3 মিলিগ্রাম/কেজি, যা এই গবেষণায় ব্যবহৃত পদ্ধতির তুলনায় কম সংবেদনশীল ছিল।
নিঃসন্দেহে, বিভিন্ন নমুনায় দূষণকারী পদার্থ পর্যবেক্ষণ করে পরিবেশ রক্ষায় বিশ্লেষণাত্মক পরীক্ষাগারগুলি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। তবে, বিশ্লেষণের সময় প্রচুর পরিমাণে বিকারক এবং দ্রাবক ব্যবহারের ফলে বিপজ্জনক অবশিষ্টাংশ তৈরি হতে পারে। অতএব, অপারেটর এবং পরিবেশের উপর বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতির প্রতিকূল প্রভাব কমাতে বা নির্মূল করার জন্য 2000 সালে সবুজ বিশ্লেষণাত্মক রসায়ন (GAC) তৈরি করা হয়েছিল। মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য ক্রোমাটোগ্রাফি, ইলেক্ট্রোফোরেসিস, ক্যাপিলারি ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাসে (ELISA) সহ ঐতিহ্যবাহী মেলামাইন সনাক্তকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছে। তবে, অসংখ্য সনাক্তকরণ পদ্ধতির মধ্যে, ইলেক্ট্রোকেমিক্যাল সেন্সরগুলি তাদের চমৎকার সংবেদনশীলতা, নির্বাচনীতা, দ্রুত বিশ্লেষণ সময় এবং ব্যবহারকারী-বান্ধব বৈশিষ্ট্যগুলির কারণে অনেক মনোযোগ আকর্ষণ করেছে 30,31। সবুজ ন্যানোপ্রযুক্তি ন্যানোম্যাটেরিয়াল সংশ্লেষণের জন্য জৈবিক পথ ব্যবহার করে, যা বিপজ্জনক বর্জ্য এবং শক্তি খরচ কমাতে পারে, যার ফলে টেকসই অনুশীলন বাস্তবায়নকে উৎসাহিত করে। উদাহরণস্বরূপ, পরিবেশ বান্ধব উপকরণ থেকে তৈরি ন্যানোকম্পোজিটগুলি মেলামাইনের মতো পদার্থ সনাক্ত করতে বায়োসেন্সরে ব্যবহার করা যেতে পারে 32,33,34।
গবেষণায় দেখা গেছে যে সলিড-ফেজ মাইক্রোএক্সট্রাকশন (SPME) কার্যকরভাবে ব্যবহৃত হয় কারণ এটি ঐতিহ্যবাহী নিষ্কাশন পদ্ধতির তুলনায় উচ্চ শক্তি দক্ষতা এবং স্থায়িত্বের কারণে। SPME এর পরিবেশগত বন্ধুত্ব এবং শক্তি দক্ষতা এটিকে বিশ্লেষণাত্মক রসায়নে ঐতিহ্যবাহী নিষ্কাশন পদ্ধতির একটি চমৎকার বিকল্প করে তোলে এবং নমুনা প্রস্তুতির জন্য আরও টেকসই এবং দক্ষ পদ্ধতি প্রদান করে।
২০১৩ সালে, উ এবং অন্যান্যরা একটি অত্যন্ত সংবেদনশীল এবং নির্বাচনী পৃষ্ঠ প্লাজমন রেজোন্যান্স (মিনি-এসপিআর) বায়োসেন্সর তৈরি করেন যা মেলামাইন এবং অ্যান্টি-মেলামাইন অ্যান্টিবডিগুলির মধ্যে সংযোগ ব্যবহার করে একটি ইমিউনোঅ্যাসে ব্যবহার করে শিশু সূত্রে মেলামাইন দ্রুত সনাক্ত করে। একটি ইমিউনোঅ্যাসে (মেলামাইন-কনজুগেটেড বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন ব্যবহার করে) এর সাথে মিলিত এসপিআর বায়োসেন্সরটি একটি সহজে ব্যবহারযোগ্য এবং কম খরচের প্রযুক্তি যার সনাক্তকরণ সীমা মাত্র 0.02 μg mL-136।
নাসিরি এবং আব্বাসিয়ান বাণিজ্যিক নমুনায় মেলামাইন সনাক্ত করার জন্য গ্রাফিন অক্সাইড-চিটোসান কম্পোজিট (GOCS) এর সাথে একত্রে একটি উচ্চ-সম্ভাব্য পোর্টেবল সেন্সর ব্যবহার করেছিলেন37। এই পদ্ধতিটি অতি-উচ্চ নির্বাচনীতা, নির্ভুলতা এবং প্রতিক্রিয়া দেখিয়েছিল। GOCS সেন্সরটি উল্লেখযোগ্য সংবেদনশীলতা (239.1 μM−1), 0.01 থেকে 200 μM এর একটি রৈখিক পরিসর, 1.73 × 104 এর একটি অ্যাফিনিটি ধ্রুবক এবং 10 nM পর্যন্ত LOD প্রদর্শন করেছিল। অধিকন্তু, 2024 সালে চন্দ্রশেখর এবং অন্যান্যদের দ্বারা পরিচালিত একটি গবেষণায় একটি পরিবেশ-বান্ধব এবং সাশ্রয়ী পদ্ধতি গ্রহণ করা হয়েছিল। তারা পরিবেশ-বান্ধব পদ্ধতিতে জিঙ্ক অক্সাইড ন্যানো পার্টিকেল (ZnO-NPs) সংশ্লেষণ করার জন্য একটি হ্রাসকারী এজেন্ট হিসাবে পেঁপের খোসার নির্যাস ব্যবহার করেছিলেন। পরবর্তীকালে, শিশু সূত্রে মেলামাইন নির্ধারণের জন্য একটি অনন্য মাইক্রো-রমন স্পেকট্রোস্কোপি কৌশল তৈরি করা হয়েছিল। কৃষি বর্জ্য থেকে প্রাপ্ত ZnO-NPs একটি মূল্যবান ডায়াগনস্টিক হাতিয়ার এবং মেলামাইন পর্যবেক্ষণ এবং সনাক্তকরণের জন্য একটি নির্ভরযোগ্য, কম খরচের প্রযুক্তি হিসাবে সম্ভাবনা প্রদর্শন করেছে38।
আলিজাদেহ এবং অন্যান্যরা (২০২৪) দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন নির্ধারণের জন্য একটি অত্যন্ত সংবেদনশীল ধাতু-জৈব কাঠামো (MOF) ফ্লুরোসেন্স প্ল্যাটফর্ম ব্যবহার করেছেন। 3σ/S ব্যবহার করে নির্ধারিত সেন্সরের রৈখিক পরিসর এবং নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা ছিল যথাক্রমে 40 থেকে 396.45 nM (25 μg kg−1 থেকে 0.25 mg kg−1 এর সমতুল্য) এবং 40 nM (25 μg kg−1 এর সমতুল্য)। এই পরিসরটি শিশু সূত্রে (1 mg kg−1) এবং অন্যান্য খাদ্য/খাদ্যের নমুনায় (2.5 mg kg−1) মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য নির্ধারিত সর্বোচ্চ অবশিষ্টাংশ স্তর (MRLs) এর অনেক নিচে। দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন সনাক্তকরণে ফ্লুরোসেন্ট সেন্সর (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) HPLC39 এর তুলনায় উচ্চ নির্ভুলতা এবং আরও সুনির্দিষ্ট পরিমাপ ক্ষমতা প্রদর্শন করেছে। সবুজ রসায়নে বায়োসেন্সর এবং ন্যানোকম্পোজিটগুলি কেবল সনাক্তকরণ ক্ষমতা বৃদ্ধি করে না বরং টেকসই উন্নয়ন নীতির সাথে সামঞ্জস্য রেখে পরিবেশগত ঝুঁকিও হ্রাস করে।
মেলামাইন নির্ধারণের জন্য বিভিন্ন পদ্ধতিতে সবুজ রসায়ন নীতি প্রয়োগ করা হয়েছে। একটি পদ্ধতি হল প্রাকৃতিক পোলার পলিমার β-সাইক্লোডেক্সট্রিন ব্যবহার করে সাইট্রিক অ্যাসিডের সাথে ক্রস-লিঙ্কযুক্ত একটি সবুজ বিচ্ছুরণকারী কঠিন-ফেজ মাইক্রোএক্সট্রাকশন পদ্ধতি তৈরি করা, যাতে শিশু সূত্র এবং গরম জলের মতো নমুনা থেকে মেলামাইন 40 কার্যকরভাবে নিষ্কাশন করা যায়। আরেকটি পদ্ধতিতে দুধের নমুনায় মেলামাইন নির্ধারণের জন্য ম্যানিচ বিক্রিয়া ব্যবহার করা হয়। এই পদ্ধতিটি সস্তা, পরিবেশ বান্ধব এবং অত্যন্ত নির্ভুল, যার রৈখিক পরিসর 0.1-2.5 ppm এবং একটি কম সনাক্তকরণ সীমা 41। তদুপরি, তরল দুধ এবং শিশু সূত্রে মেলামাইনের পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য একটি সাশ্রয়ী এবং পরিবেশ বান্ধব পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছিল, যার উচ্চ নির্ভুলতা এবং সনাক্তকরণ সীমা যথাক্রমে 1 ppm এবং 3.5 ppm, 42। এই পদ্ধতিগুলি মেলামাইন নির্ধারণের জন্য দক্ষ এবং টেকসই পদ্ধতির বিকাশে সবুজ রসায়ন নীতির প্রয়োগ প্রদর্শন করে।
বেশ কয়েকটি গবেষণায় মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য উদ্ভাবনী পদ্ধতি প্রস্তাব করা হয়েছে, যেমন সলিড-ফেজ নিষ্কাশন এবং উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC)43 ব্যবহার, সেইসাথে দ্রুত উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC), যার জন্য জটিল প্রাক-চিকিৎসা বা আয়ন-জোড়া বিকারক প্রয়োজন হয় না, যার ফলে রাসায়নিক বর্জ্যের পরিমাণ হ্রাস পায়44। এই পদ্ধতিগুলি কেবল দুগ্ধজাত পণ্যে মেলামাইন নির্ধারণের জন্য সঠিক ফলাফল প্রদান করে না, বরং সবুজ রসায়নের নীতিগুলিও মেনে চলে, বিপজ্জনক রাসায়নিকের ব্যবহার কমিয়ে দেয় এবং বিশ্লেষণাত্মক প্রক্রিয়ার সামগ্রিক পরিবেশগত প্রভাব হ্রাস করে।
বিভিন্ন ব্র্যান্ডের চল্লিশটি নমুনা তিনটি করে পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ফলাফলগুলি সারণি ২-এ উপস্থাপন করা হয়েছে। শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়ো নমুনায় মেলামাইনের মাত্রা যথাক্রমে ০.০০১ থেকে ০.০০৪ মিলিগ্রাম/কেজি এবং ০.০০১ থেকে ০.০৯৫ মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত ছিল। শিশু সূত্রের তিনটি বয়সের মধ্যে কোনও উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন দেখা যায়নি। এছাড়াও, ৮০% দুধের গুঁড়োতে মেলামাইন সনাক্ত করা হয়েছিল, তবে ৬৫% শিশু সূত্র মেলামাইন দ্বারা দূষিত ছিল।
শিল্পজাত দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের পরিমাণ শিশু সূত্রের তুলনায় বেশি ছিল এবং পার্থক্যটি উল্লেখযোগ্য ছিল (p<0.05) (চিত্র 2)।
প্রাপ্ত ফলাফলগুলি FDA দ্বারা নির্ধারিত সীমার নীচে ছিল (১ এবং ২.৫ মিলিগ্রাম/কেজির নিচে)। এছাড়াও, ফলাফলগুলি CAC (২০১০) এবং EU৪৫,৪৬ দ্বারা নির্ধারিত সীমার সাথে সঙ্গতিপূর্ণ, অর্থাৎ সর্বোচ্চ অনুমোদিত সীমা হল শিশু সূত্রের জন্য ১ মিলিগ্রাম কেজি-১ এবং দুগ্ধজাত পণ্যের জন্য ২.৫ মিলিগ্রাম কেজি-১।
২০২৩ সালে Ghanati et al.47-এর একটি গবেষণা অনুসারে, ইরানে বিভিন্ন ধরণের প্যাকেটজাত দুধে মেলামাইনের পরিমাণ ৫০.৭ থেকে ৭৯০ μg kg−১ পর্যন্ত ছিল। তাদের ফলাফল FDA-এর অনুমোদিত সীমার নিচে ছিল। আমাদের ফলাফল Shoder et al.48 এবং Rima et al.49-এর তুলনায় কম। Shoder et al. (২০১০) দেখেছেন যে ELISA দ্বারা নির্ধারিত দুধের গুঁড়োতে (n=৪৯) মেলামাইনের মাত্রা ০.৫ থেকে ৫.৫ মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত ছিল। Rima et al. ফ্লুরোসেন্স স্পেকট্রোফটোমেট্রি দ্বারা দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ বিশ্লেষণ করে দেখেছেন যে দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের অবশিষ্টাংশ ০.৭২–৫.৭৬ মিলিগ্রাম/কেজি। ২০১১ সালে কানাডায় তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (LC/MS) ব্যবহার করে শিশু সূত্রে (n=৯৪) মেলামাইনের মাত্রা পর্যবেক্ষণ করার জন্য একটি গবেষণা পরিচালিত হয়েছিল। মেলামাইনের ঘনত্ব গ্রহণযোগ্য সীমার নিচে পাওয়া গেছে (প্রাথমিক মান: ০.৫ মিলিগ্রাম kg−১)। এটা অসম্ভব যে জাল মেলামাইনের মাত্রা সনাক্ত করা হয়েছে যা প্রোটিনের পরিমাণ বৃদ্ধির জন্য ব্যবহৃত একটি কৌশল ছিল। তবে, সারের ব্যবহার, পাত্রের সামগ্রী স্থানান্তর বা অনুরূপ কারণ দ্বারা এটি ব্যাখ্যা করা যায় না। অধিকন্তু, কানাডায় আমদানি করা দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের উৎস প্রকাশ করা হয়নি।
হাসানি প্রমুখ ২০১৩ সালে ইরানের বাজারে দুধের গুঁড়া এবং তরল দুধে মেলামাইনের পরিমাণ পরিমাপ করেছিলেন এবং একই রকম ফলাফল পেয়েছিলেন। ফলাফলে দেখা গেছে যে একটি ব্র্যান্ডের দুধের গুঁড়া এবং তরল দুধ ছাড়া, বাকি সমস্ত নমুনায় মেলামাইনের পরিমাণ ছিল, যার মাত্রা ছিল ১.৫০ থেকে ৩০.৩২ μg g−১ দুধের গুঁড়ায় এবং ০.১১ থেকে ১.৪৮ μg ml−১ দুধে। উল্লেখযোগ্যভাবে, কোনও নমুনায় সায়ানুরিক অ্যাসিড সনাক্ত করা যায়নি, যা গ্রাহকদের জন্য মেলামাইন বিষক্রিয়ার সম্ভাবনা হ্রাস করে। ৫১ পূর্ববর্তী গবেষণায় দুধের গুঁড়াযুক্ত চকোলেট পণ্যে মেলামাইনের ঘনত্ব মূল্যায়ন করা হয়েছে। আমদানি করা নমুনার প্রায় ৯৪% এবং ইরানের ৭৭% নমুনায় মেলামাইন ছিল। আমদানি করা নমুনায় মেলামাইনের মাত্রা ০.০৩২ থেকে ২.৬৯২ মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত ছিল, যেখানে ইরানের নমুনায় ০.০১৩ থেকে ২.৬০০ মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত ছিল। সামগ্রিকভাবে, ৮৫% নমুনায় মেলামাইন সনাক্ত করা হয়েছে, কিন্তু শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডের মাত্রা অনুমোদিত সীমার বেশি ছিল। 44 টিটলমিয়ার এবং অন্যান্যরা দুধের গুঁড়োতে মেলামাইনের মাত্রা 0.00528 থেকে 0.0122 মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত রিপোর্ট করেছেন।
সারণি ৩-এ তিনটি বয়সের জন্য ঝুঁকি মূল্যায়নের ফলাফলের সারসংক্ষেপ দেওয়া হয়েছে। সকল বয়সের ক্ষেত্রে ঝুঁকি ১-এর কম ছিল। সুতরাং, শিশু সূত্রে মেলামাইনের কারণে ক্যান্সার-বিরোধী কোনও স্বাস্থ্য ঝুঁকি নেই।
দুগ্ধজাত দ্রব্যে দূষণের মাত্রা কম হতে পারে প্রস্তুতির সময় অনিচ্ছাকৃত দূষণের কারণে, অন্যদিকে উচ্চ মাত্রা ইচ্ছাকৃতভাবে সংযোজনের কারণে হতে পারে। অধিকন্তু, কম মেলামাইনের মাত্রা সহ দুগ্ধজাত দ্রব্য গ্রহণের ফলে মানব স্বাস্থ্যের সামগ্রিক ঝুঁকি কম বলে বিবেচিত হয়। এটি উপসংহারে পৌঁছানো যেতে পারে যে এত কম মাত্রার মেলামাইনযুক্ত পণ্য গ্রহণ ভোক্তা স্বাস্থ্যের জন্য কোনও ঝুঁকি তৈরি করে না।
দুগ্ধ শিল্পে খাদ্য নিরাপত্তা ব্যবস্থাপনার গুরুত্ব বিবেচনা করে, বিশেষ করে জনস্বাস্থ্য রক্ষার ক্ষেত্রে, দুধের গুঁড়া এবং শিশু সূত্রে মেলামাইনের মাত্রা এবং অবশিষ্টাংশ মূল্যায়ন এবং তুলনা করার জন্য একটি পদ্ধতি তৈরি এবং বৈধকরণ অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়ায় মেলামাইন নির্ধারণের জন্য একটি সহজ এবং নির্ভুল HPLC-UV স্পেকট্রোফটোমেট্রিক পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছিল। এর নির্ভরযোগ্যতা এবং নির্ভুলতা নিশ্চিত করার জন্য পদ্ধতিটি বৈধ করা হয়েছিল। পদ্ধতির সনাক্তকরণ এবং পরিমাণ নির্ধারণের সীমা শিশু সূত্র এবং দুধের গুঁড়ায় মেলামাইনের মাত্রা পরিমাপ করার জন্য যথেষ্ট সংবেদনশীল বলে প্রমাণিত হয়েছিল। আমাদের তথ্য অনুসারে, বেশিরভাগ ইরানি নমুনায় মেলামাইন সনাক্ত করা হয়েছিল। সমস্ত সনাক্ত করা মেলামাইনের মাত্রা CAC দ্বারা নির্ধারিত সর্বোচ্চ অনুমোদিত সীমার নীচে ছিল, যা ইঙ্গিত করে যে এই ধরণের দুগ্ধজাত পণ্যের ব্যবহার মানুষের স্বাস্থ্যের জন্য কোনও ঝুঁকি তৈরি করে না।
ব্যবহৃত সমস্ত রাসায়নিক বিকারক বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের ছিল: মেলামাইন (2,4,6-ট্রায়ামিনো-1,3,5-ট্রায়াজিন) 99% বিশুদ্ধ (সিগমা-অ্যালড্রিচ, সেন্ট লুইস, MO); HPLC-গ্রেড অ্যাসিটোনিট্রাইল (Merck, Darmstadt, জার্মানি); অতি-বিশুদ্ধ জল (মিলিপুর, মরফেইম, ফ্রান্স)। ডিসপোজেবল সিরিঞ্জ ফিল্টার (Chromafil Xtra PVDF-45/25, ছিদ্রের আকার 0.45 μm, ঝিল্লির ব্যাস 25 মিমি) (Macherey-Nagel, Düren, জার্মানি)।
নমুনা প্রস্তুত করার জন্য একটি অতিস্বনক স্নান (এলমা, জার্মানি), একটি সেন্ট্রিফিউজ (বেকম্যান কুল্টার, ক্রেফেল্ড, জার্মানি) এবং HPLC (KNAUER, জার্মানি) ব্যবহার করা হয়েছিল।
UV ডিটেক্টর সহ একটি উচ্চ কার্যকারিতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফ (KNAUER, জার্মানি) ব্যবহার করা হয়েছিল। HPLC বিশ্লেষণের শর্তগুলি নিম্নরূপ ছিল: একটি ODS-3 C18 বিশ্লেষণাত্মক কলাম (4.6 মিমি × 250 মিমি, কণার আকার 5 μm) (MZ, জার্মানি) দিয়ে সজ্জিত একটি UHPLC আলটিমেট সিস্টেম ব্যবহার করা হয়েছিল। HPLC ইলুয়েন্ট (মোবাইল ফেজ) ছিল একটি TFA/মিথানল মিশ্রণ (450:50 mL) যার প্রবাহ হার 1 mL min-1। সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য ছিল 242 nm। ইনজেকশনের পরিমাণ ছিল 100 μL, কলামের তাপমাত্রা ছিল 20 °C। যেহেতু ওষুধের ধারণ সময় দীর্ঘ (15 মিনিট), পরবর্তী ইনজেকশন 25 মিনিট পরে করা উচিত। ধারণ সময় এবং মেলামাইন মানের UV বর্ণালী শীর্ষ তুলনা করে মেলামাইন সনাক্ত করা হয়েছিল।
মেলামাইনের একটি আদর্শ দ্রবণ (১০ μg/mL) জল ব্যবহার করে প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং আলো থেকে দূরে একটি রেফ্রিজারেটরে (৪ °C) সংরক্ষণ করা হয়েছিল। স্টক দ্রবণটিকে মোবাইল ফেজ দিয়ে পাতলা করুন এবং কার্যকরী আদর্শ দ্রবণ প্রস্তুত করুন। প্রতিটি আদর্শ দ্রবণ HPLC-তে ৭ বার ইনজেক্ট করা হয়েছিল। নির্ধারিত শীর্ষ এলাকা এবং নির্ধারিত ঘনত্বের রিগ্রেশন বিশ্লেষণের মাধ্যমে ক্রমাঙ্কন সমীকরণ ১০ গণনা করা হয়েছিল।
ইরানের স্থানীয় সুপারমার্কেট এবং ফার্মেসি থেকে বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ গরুর দুধের গুঁড়ো (২০টি নমুনা) এবং বিভিন্ন ব্র্যান্ডের গরুর দুধ-ভিত্তিক শিশু সূত্রের নমুনা (২০টি নমুনা) বিভিন্ন বয়সের (০-৬ মাস, ৬-১২ মাস এবং >১২ মাস) শিশুদের খাওয়ানোর জন্য ক্রয় করা হয়েছিল এবং বিশ্লেষণ না হওয়া পর্যন্ত ফ্রিজে (৪ ডিগ্রি সেলসিয়াস) তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। তারপর, ১ ± ০.০১ গ্রাম সমজাতীয় দুধের গুঁড়ো ওজন করে অ্যাসিটোনিট্রাইল: জলের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল (৫০:৫০, v/v; ৫ মিলি)। মিশ্রণটি ১ মিনিটের জন্য নাড়াচাড়া করা হয়েছিল, তারপর ৩০ মিনিটের জন্য একটি অতিস্বনক স্নানে সনিকেট করা হয়েছিল এবং অবশেষে ১ মিনিটের জন্য ঝাঁকানো হয়েছিল। তারপর মিশ্রণটি ঘরের তাপমাত্রায় ১০ মিনিটের জন্য ৯০০০ × গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং সুপারন্যাট্যান্টকে ০.৪৫ μm সিরিঞ্জ ফিল্টার ব্যবহার করে ২ মিলি অটোস্যাম্পলার শিশিতে ফিল্টার করা হয়েছিল। এরপর ফিল্টারেট (২৫০ μl) জলের সাথে (৭৫০ μl) মিশিয়ে HPLC সিস্টেমে ইনজেক্ট করা হয় ১০,৪২।
পদ্ধতিটি যাচাই করার জন্য, আমরা সর্বোত্তম পরিস্থিতিতে পুনরুদ্ধার, নির্ভুলতা, সনাক্তকরণের সীমা (LOD), পরিমাণ নির্ধারণের সীমা (LOQ) এবং নির্ভুলতা নির্ধারণ করেছি। LOD কে বেসলাইন শব্দ স্তরের তিনগুণ উচ্চতার নমুনা সামগ্রী হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল। অন্যদিকে, সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাতের 10 গুণ উচ্চতার নমুনা সামগ্রীকে LOQ হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল।
সাতটি ডেটা পয়েন্টের সমন্বয়ে গঠিত একটি ক্যালিব্রেশন কার্ভ ব্যবহার করে ডিভাইসের প্রতিক্রিয়া নির্ধারণ করা হয়েছিল। বিভিন্ন মেলামাইন সামগ্রী ব্যবহার করা হয়েছিল (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 এবং 1.2)। মেলামাইন গণনা পদ্ধতির রৈখিকতা নির্ধারণ করা হয়েছিল। এছাড়াও, ফাঁকা নমুনাগুলিতে মেলামাইনের বিভিন্ন স্তর যোগ করা হয়েছিল। শিশু সূত্র এবং গুঁড়ো দুধের নমুনায় একটি স্ট্যান্ডার্ড মেলামাইন দ্রবণের 0.1–1.2 μg mL−1 এবং এর R2 = 0.9925 ক্রমাগত ইনজেকশনের মাধ্যমে ক্যালিব্রেশন কার্ভ তৈরি করা হয়েছিল। পদ্ধতির পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা এবং পুনরুৎপাদনযোগ্যতা দ্বারা নির্ভুলতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং প্রথম এবং পরবর্তী তিন দিনে (ত্রিপ্রতিলিপিতে) নমুনা ইনজেকশনের মাধ্যমে অর্জন করা হয়েছিল। যোগ করা মেলামাইনের তিনটি ভিন্ন ঘনত্বের জন্য RSD % গণনা করে পদ্ধতির পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। নির্ভুলতা নির্ধারণের জন্য পুনরুদ্ধার অধ্যয়ন করা হয়েছিল। শিশু সূত্র এবং শুকনো দুধের নমুনায় মেলামাইন ঘনত্বের তিনটি স্তরে (0.1, 1.2, 2) নিষ্কাশন পদ্ধতি দ্বারা পুনরুদ্ধারের মাত্রা গণনা করা হয়েছিল9,11,15।
আনুমানিক দৈনিক গ্রহণ (EDI) নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল: EDI = Ci × Cc/BW।
যেখানে Ci হল গড় মেলামাইনের পরিমাণ, Cc হল দুধ গ্রহণ এবং BW হল শিশুদের গড় ওজন।
SPSS 24 ব্যবহার করে ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। কোলমোগোরভ-স্মিরনভ পরীক্ষা ব্যবহার করে স্বাভাবিকতা পরীক্ষা করা হয়েছিল; সমস্ত ডেটা ছিল ননপ্যারামেট্রিক পরীক্ষা (p = 0)। অতএব, গ্রুপগুলির মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্ধারণের জন্য ক্রুসকাল-ওয়ালিস পরীক্ষা এবং মান-হুইটনি পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছিল।
ইঙ্গেলফিঙ্গার, জুনিয়র। মেলামাইন এবং বিশ্বব্যাপী খাদ্য দূষণের উপর এর প্রভাব। নিউ ইংল্যান্ড জার্নাল অফ মেডিসিন 359(26), 2745–2748 (2008)।
লিঞ্চ, আরএ, প্রমুখ। শিশুদের বাটিতে মেলামাইন স্থানান্তরের উপর pH এর প্রভাব। আন্তর্জাতিক খাদ্য দূষণ জার্নাল, 2, 1–8 (2015)।
ব্যারেট, এমপি এবং গিলবার্ট, আইএইচ ট্রাইপানোসোমের অভ্যন্তরে বিষাক্ত যৌগগুলিকে লক্ষ্য করে। পরজীবীবিদ্যায় অগ্রগতি 63, 125–183 (2006)।
নির্মাণ, এমএফ, প্রমুখ। ওষুধ সরবরাহের বাহন হিসেবে মেলামাইন ডেন্ড্রিমারের ইন ভিট্রো এবং ইন ভিভো মূল্যায়ন। ইন্টারন্যাশনাল জার্নাল অফ ফার্মেসি, 281(1–2), 129–132(2004)।
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা। মেলামাইন এবং সায়ানুরিক অ্যাসিডের বিষাক্ত দিকগুলি পর্যালোচনা করার জন্য বিশেষজ্ঞ সভা ১-৪ (২০০৮)।
হাও, একে-সি., কোয়ান, টিএইচ এবং লি, পিকে-টি. মেলামাইন বিষাক্ততা এবং কিডনি। জার্নাল অফ দ্য আমেরিকান সোসাইটি অফ নেফ্রোলজি 20(2), 245–250 (2009)।
ওজতুর্ক, এস. এবং ডেমির, এন. উচ্চ কার্যকারিতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) দ্বারা দুগ্ধজাত পণ্যে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য একটি অভিনব IMAC শোষণকারীর বিকাশ। জার্নাল অফ ফুড সিন্থেসিস অ্যান্ড অ্যানালাইসিস 100, 103931 (2021)।
চানসুভার্ন, ভি., প্যানিক, এস. এবং ইমিম, এ. ম্যানিচ সবুজ বিক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে তরল দুধে মেলামাইনের সরল বর্ণালী ফটোমেট্রিক নির্ধারণ। স্পেকট্রোকেম। অ্যাক্টা পার্ট এ মোল। বায়োমল। স্পেকট্রোস্ক। ১১৩, ১৫৪–১৫৮ (২০১৩)।
ডিবেস, এম. এবং এল-হাবিব, আর. এইচপিএলসি/ডায়োড অ্যারে ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা শিশু সূত্র, দুধের গুঁড়ো এবং প্যাঙ্গাসিয়াস নমুনায় মেলামাইন নির্ধারণ। জার্নাল অফ এনভায়রনমেন্টাল অ্যানালিটিক্যাল টক্সিকোলজি, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012)।
স্কিনার, কেজি, থমাস, জেডি, এবং অস্টারলো, জেডি মেলামাইন বিষাক্ততা। জার্নাল অফ মেডিকেল টক্সিকোলজি, 6, 50–55 (2010)।
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা (WHO), মেলামাইন এবং সায়ানুরিক অ্যাসিডের বিষবিদ্যা এবং স্বাস্থ্যগত দিক: হেলথ কানাডা, অটোয়া, কানাডা, ১-৪ ডিসেম্বর ২০০৮ (২০০৯) দ্বারা সমর্থিত একটি WHO/FAO সহযোগী বিশেষজ্ঞ সভার প্রতিবেদন।
কোরমা, এসএ, প্রমুখ। নতুন কার্যকরী কাঠামোগত লিপিড এবং বাণিজ্যিক শিশু সূত্র ধারণকারী শিশু সূত্র পাউডারের লিপিড গঠন এবং মানের তুলনামূলক অধ্যয়ন। ইউরোপীয় খাদ্য গবেষণা ও প্রযুক্তি 246, 2569–2586 (2020)।
এল-ওয়াসিফ, এম. এবং হাশেম, এইচ. পাম তেল ব্যবহার করে শিশু সূত্রের পুষ্টিগুণ, গুণগত বৈশিষ্ট্য এবং শেলফ লাইফ বৃদ্ধি। মিডল ইস্ট জার্নাল অফ এগ্রিকালচারাল রিসার্চ 6, 274–281 (2017)।
ইয়িন, ডব্লিউ., প্রমুখ। কাঁচা দুধ, শুকনো দুধ এবং পশুখাদ্যে মেলামাইন সনাক্তকরণের জন্য মেলামাইনের বিরুদ্ধে মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি উৎপাদন এবং একটি পরোক্ষ প্রতিযোগিতামূলক ELISA পদ্ধতির বিকাশ। জার্নাল অফ এগ্রিকালচারাল অ্যান্ড ফুড কেমিস্ট্রি 58(14), 8152–8157 (2010)।