Nature.com-এ আসার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি এমন একটি ব্রাউজার সংস্করণ ব্যবহার করছেন যেখানে CSS সাপোর্ট সীমিত। সর্বোত্তম অভিজ্ঞতার জন্য, আমরা আপনাকে একটি আপডেটেড ব্রাউজার ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে কম্প্যাটিবিলিটি মোড নিষ্ক্রিয় করুন)। এছাড়াও, নিরবচ্ছিন্ন সাপোর্ট নিশ্চিত করার জন্য, আমরা সাইটটি স্টাইল এবং জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই প্রদর্শন করছি।
স্লাইডারগুলোতে প্রতি স্লাইডে তিনটি করে আর্টিকেল দেখানো হচ্ছে। স্লাইডগুলোর মধ্যে যাতায়াত করার জন্য ব্যাক এবং নেক্সট বাটন ব্যবহার করুন, অথবা প্রতিটি স্লাইডের মধ্যে দিয়ে যাওয়ার জন্য শেষে থাকা স্লাইড কন্ট্রোলার বাটনগুলো ব্যবহার করুন।
ইউনান প্রদেশে ঔষধি উদ্ভিদ প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর চাষের জন্য ক্যাডমিয়াম (Cd) দূষণ একটি হুমকি। বাহ্যিক Cd চাপের পরিস্থিতিতে, চুন প্রয়োগ (০.৭৫০, ২২৫০ এবং ৩৭৫০ কেজি bm-2) এবং অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে (০, ০.১ এবং ০.২ মোল l-1) এর প্রভাব বোঝার জন্য একটি মাঠ পর্যায়ের পরীক্ষা চালানো হয়েছিল। এর মাধ্যমে Cd সঞ্চয়ন, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্রিয়া এবং প্যানাক্স নটোগিনসেং-কে প্রভাবিতকারী সিস্টেমিক ও ঔষধি উপাদানগুলোর উপর এর প্রভাব জানা যায়। ফলাফলে দেখা গেছে যে, চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে পাতায় স্প্রে করলে Cd চাপের অধীনে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এ Ca2+ এর মাত্রা বৃদ্ধি পায় এবং Cd2+ এর বিষাক্ততা হ্রাস পায়। চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড যোগ করার ফলে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলোর কার্যকলাপ বৃদ্ধি পায় এবং অসমোরেগুলেটরগুলোর বিপাক পরিবর্তিত হয়। CAT-এর কার্যকলাপ সবচেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পায়, যা ২.৭৭ গুণ বেশি। অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগের ফলে SOD-এর সর্বোচ্চ কার্যকলাপ ১.৭৮ গুণ বৃদ্ধি পায়। MDA-এর পরিমাণ ৫৮.৩৮% হ্রাস পেয়েছে। দ্রবণীয় শর্করা, মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিড, প্রোলিন এবং দ্রবণীয় প্রোটিনের সাথে এর একটি অত্যন্ত তাৎপর্যপূর্ণ সম্পর্ক রয়েছে। চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড প্যানাক্স নটোগিনসেং-এ ক্যালসিয়াম আয়ন (Ca2+) বাড়াতে, Cd কমাতে, চাপ সহনশীলতা উন্নত করতে এবং মোট স্যাপোনিন ও ফ্ল্যাভোনয়েড উৎপাদন বাড়াতে পারে। Cd-এর পরিমাণ ছিল সর্বনিম্ন, যা কন্ট্রোলের তুলনায় ৬৮.৫৭% কম এবং এটি আদর্শ মানের (Cd≤০.৫ মিলিগ্রাম/কেজি, GB/T 19086-2008) সাথে সঙ্গতিপূর্ণ। SPN-এর অনুপাত ছিল ৭.৭৩%, যা প্রতিটি ট্রিটমেন্টের মধ্যে সর্বোচ্চ পর্যায়ে পৌঁছেছে এবং ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ ২১.৭৪% উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়ে ওষুধের আদর্শ মান ও সর্বোত্তম ফলনে পৌঁছেছে।
চাষের মাটির একটি সাধারণ দূষক হিসেবে ক্যাডমিয়াম (Cd) সহজেই স্থানান্তরিত হয় এবং এর উল্লেখযোগ্য জৈবিক বিষাক্ততা রয়েছে¹। এল শাফেই এবং অন্যান্যরা² জানিয়েছেন যে, ক্যাডমিয়ামের বিষাক্ততা ব্যবহৃত উদ্ভিদের গুণমান এবং উৎপাদনশীলতাকে প্রভাবিত করে। সাম্প্রতিক বছরগুলোতে, দক্ষিণ-পশ্চিম চীনের চাষের জমির মাটিতে অতিরিক্ত ক্যাডমিয়ামের উপস্থিতি একটি অত্যন্ত গুরুতর ঘটনা হয়ে উঠেছে। ইউনান প্রদেশ চীনের জীববৈচিত্র্যের রাজ্য, যেখানে ঔষধি উদ্ভিদের প্রজাতিগুলো দেশে প্রথম স্থান অধিকার করে। তবে, ইউনান প্রদেশের সমৃদ্ধ খনিজ সম্পদ উত্তোলনের সময় অনিবার্যভাবে মাটিতে ভারী ধাতুর দূষণ ঘটায়, যা স্থানীয় ঔষধি উদ্ভিদের উৎপাদনকে প্রভাবিত করে।
প্যানাক্স নটোগিনসেং (বার্কিল) চেন৩ হলো অ্যারালিয়াসি গোত্রের প্যানাক্স জিনসেং গণের অন্তর্গত একটি অত্যন্ত মূল্যবান বহুবর্ষজীবী ভেষজ ঔষধি উদ্ভিদ। প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর মূল রক্ত ​​সঞ্চালন বৃদ্ধি করে, রক্ত ​​জমাট বাঁধা দূর করে এবং ব্যথা উপশম করে। এর প্রধান উৎপাদন কেন্দ্র হলো ইউনান প্রদেশের ওয়েনশান প্রিফেকচার ৫। প্যানাক্স নটোগিনসেং চাষের এলাকার ৭৫%-এরও বেশি মাটিতে ক্যাডমিয়াম (Cd) দূষণ ছিল এবং বিভিন্ন স্থানে এর পরিমাণ ৮১-১০০% ছাড়িয়ে গিয়েছিল৬। ক্যাডমিয়ামের বিষাক্ত প্রভাব প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর ঔষধি উপাদান, বিশেষ করে স্যাপোনিন এবং ফ্ল্যাভোনয়েডের উৎপাদনও ব্যাপকভাবে হ্রাস করে। স্যাপোনিন হলো এক শ্রেণীর অ্যাগ্লাইকোন, যার মধ্যে ট্রাইটারপেনয়েড বা স্পাইরোস্টেরেন অন্তর্ভুক্ত, যা অনেক চীনা ভেষজ ওষুধের প্রধান সক্রিয় উপাদান এবং এতে স্যাপোনিন থাকে। কিছু স্যাপোনিনের মূল্যবান জৈবিক কার্যকলাপও রয়েছে যেমন অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল কার্যকলাপ, জ্বরনাশক, প্রশান্তিদায়ক এবং ক্যান্সার-বিরোধী কার্যকলাপ৭। ফ্ল্যাভোনয়েড সাধারণত এমন এক শ্রেণীর যৌগকে বোঝায় যেখানে ফেনোলিক হাইড্রোক্সিল গ্রুপ সহ দুটি বেনজিন রিং তিনটি কেন্দ্রীয় কার্বন পরমাণুর মাধ্যমে যুক্ত থাকে এবং এর মূল কেন্দ্র হল ২-ফিনাইলক্রোমানোন৮। এটি একটি শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, যা উদ্ভিদে অক্সিজেন ফ্রি র‍্যাডিকেল কার্যকরভাবে অপসারণ করতে পারে, প্রদাহ সৃষ্টিকারী জৈবিক এনজাইমের নিঃসরণকে বাধা দিতে পারে, ক্ষত নিরাময় এবং ব্যথা উপশমে সহায়তা করতে পারে এবং কোলেস্টেরলের মাত্রা কমাতে পারে। এটি প্যানাক্স জিনসেং-এর অন্যতম প্রধান সক্রিয় উপাদান। প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর প্রধান ঔষধি উপাদানগুলির উৎপাদন নিশ্চিত করার জন্য এর উৎপাদন এলাকায় ক্যাডমিয়াম দ্বারা মাটির দূষণের সমস্যার সমাধান করা একটি প্রয়োজনীয় শর্ত।
চুন হলো মাটিতে ক্যাডমিয়াম দূষণকে যথাস্থানে স্থির করার জন্য ব্যবহৃত একটি সাধারণ নিষ্ক্রিয়কারী। এটি মাটিতে ক্যাডমিয়ামের শোষণ এবং জমা হওয়াকে প্রভাবিত করে এবং মাটির pH বৃদ্ধি করে ও মাটির ক্যাটায়ন বিনিময় ক্ষমতা (CEC), মাটির লবণ সম্পৃক্ততা (BS), মাটির জারণ-বিজারণ বিভব (Eh)³,¹¹-এর কার্যকারিতা পরিবর্তন করে মাটিতে ক্যাডমিয়ামের জৈবিক কার্যকলাপ হ্রাস করে। এছাড়াও, চুন প্রচুর পরিমাণে Ca²⁺ সরবরাহ করে, যা Cd²⁺-এর সাথে আয়নিক বৈরিতা তৈরি করে, মূলের শোষণ স্থানের জন্য প্রতিযোগিতা করে, কাণ্ডে ক্যাডমিয়ামের পরিবহন প্রতিরোধ করে এবং এর জৈবিক বিষাক্ততা কম। ক্যাডমিয়াম চাপের অধীনে ৫০ mmol l⁻¹ Ca যোগ করার ফলে তিলের পাতায় ক্যাডমিয়ামের পরিবহন বাধাগ্রস্ত হয়েছিল এবং ক্যাডমিয়ামের সঞ্চয় ৮০% হ্রাস পেয়েছিল। ধান (Oryza sativa L.) এবং অন্যান্য ফসলের উপর অসংখ্য সম্পর্কিত গবেষণা প্রকাশিত হয়েছে¹²,¹³।
ফসলের পাতায় স্প্রে করে ভারী ধাতুর সঞ্চয় নিয়ন্ত্রণ করা সাম্প্রতিক বছরগুলিতে ভারী ধাতু মোকাবেলার একটি নতুন পদ্ধতি। এর মূলনীতি উদ্ভিদ কোষের চিলেশন প্রতিক্রিয়ার সাথে সম্পর্কিত, যা ভারী ধাতুকে কোষ প্রাচীরে জমা করে এবং উদ্ভিদের দ্বারা ভারী ধাতুর শোষণকে বাধা দেয়¹⁴,¹⁵। একটি স্থিতিশীল ডাইকার্বক্সিলিক অ্যাসিড চিলেটিং এজেন্ট হিসাবে, অক্সালিক অ্যাসিড সরাসরি উদ্ভিদে ভারী ধাতব আয়নকে চিলেট করতে পারে, যার ফলে বিষাক্ততা হ্রাস পায়। গবেষণায় দেখা গেছে যে সয়াবিনে অক্সালিক অ্যাসিড Cd²⁺ কে চিলেট করতে পারে এবং ট্রাইকোমের অগ্রভাগের কোষের মাধ্যমে Cd-যুক্ত স্ফটিক মুক্ত করে, যা দেহের Cd²⁺ এর মাত্রা হ্রাস করে¹⁶। অক্সালিক অ্যাসিড মাটির pH নিয়ন্ত্রণ করতে পারে, সুপারঅক্সাইড ডিসমিউটেজ (SOD), পারঅক্সিডেজ (POD), এবং ক্যাটারেজ (CAT) এর কার্যকলাপ বৃদ্ধি করতে পারে এবং দ্রবণীয় চিনি, দ্রবণীয় প্রোটিন, মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিড এবং প্রোলিনের অনুপ্রবেশ নিয়ন্ত্রণ করতে পারে। এটি বিপাকীয় নিয়ন্ত্রক হিসাবে কাজ করে¹⁷,¹⁸। অক্সালেট উদ্ভিদে থাকা অম্লীয় পদার্থ এবং অতিরিক্ত Ca2+ জার্ম প্রোটিনের ক্রিয়ায় ক্যালসিয়াম অক্সালেট অধঃক্ষেপ তৈরি করে। উদ্ভিদে Ca2+ এর ঘনত্ব নিয়ন্ত্রণ করলে তা কার্যকরভাবে দ্রবীভূত অক্সালিক অ্যাসিড এবং Ca2+ নিয়ন্ত্রণ করতে পারে এবং অক্সালিক অ্যাসিড ও Ca2+ এর অতিরিক্ত জমা হওয়া এড়াতে পারে19,20।
প্রয়োগকৃত চুনের পরিমাণ পুনরুদ্ধারের প্রভাবকে প্রভাবিত করে এমন একটি মূল কারণ। এটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে যে চুনের ব্যবহার 750 থেকে 6000 কেজি·ঘণ্টা·মি−2 পর্যন্ত হয়ে থাকে। pH 5.0-5.5 যুক্ত অম্লীয় মাটির ক্ষেত্রে, 3000-6000 কেজি·ঘণ্টা·মি-2 মাত্রায় চুন প্রয়োগের প্রভাব 750 কেজি·ঘণ্টা·মি-2 মাত্রার চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল21। তবে, অতিরিক্ত চুন প্রয়োগ মাটির উপর কিছু নেতিবাচক প্রভাব ফেলবে, যেমন মাটির pH-এর বড় পরিবর্তন এবং মাটির সংকোচন22। তাই, আমরা CaO প্রয়োগের মাত্রা 0, 750, 2250 এবং 3750 কেজি·ঘণ্টা·মি−2 নির্ধারণ করেছি। যখন অ্যারাবিডোপসিসে অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ করা হয়েছিল, তখন 10 mM L-1 মাত্রায় Ca2+ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেতে দেখা গেছে, এবং Ca2+ সংকেতকে প্রভাবিত করে এমন CRT জিন পরিবার দৃঢ়ভাবে প্রতিক্রিয়াশীল ছিল20। পূর্ববর্তী কিছু গবেষণার সমন্বয় আমাদের এই পরীক্ষার ঘনত্ব নির্ধারণ করতে এবং Ca2+ এবং Cd2+23,24,25-এর উপর বাহ্যিক সংযোজনের মিথস্ক্রিয়া অধ্যয়ন চালিয়ে যেতে সাহায্য করেছে। সুতরাং, এই গবেষণার লক্ষ্য হলো ক্যাডমিয়াম-দূষিত মাটিতে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর ক্যাডমিয়াম উপাদান এবং চাপ সহনশীলতার উপর বাহ্যিক চুন প্রয়োগ এবং অক্সালিক অ্যাসিড পাতায় স্প্রে করার প্রভাবের নিয়ন্ত্রণমূলক প্রক্রিয়া অনুসন্ধান করা এবং প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর ঔষধি গুণমান নিশ্চিত করার সর্বোত্তম উপায় ও পদ্ধতি আরও অন্বেষণ করা। এটি ক্যাডমিয়াম-দূষিত মাটিতে ভেষজ চাষের সম্প্রসারণ এবং ওষুধের বাজারের চাহিদা মেটাতে উচ্চ-মানের, টেকসই উৎপাদন সরবরাহের জন্য মূল্যবান তথ্য প্রদান করে।
স্থানীয় জাত ওয়েনশান নটোগিনসেং-কে উপকরণ হিসেবে ব্যবহার করে ইউনান প্রদেশের ওয়েনশান প্রিফেকচারের কিউবেই কাউন্টির লান্নিঝাই (২৪°১১′ উত্তর, ১০৪°৩′ পূর্ব, উচ্চতা ১৪৪৬ মি.)-তে একটি মাঠ পর্যায়ের পরীক্ষা চালানো হয়েছিল। এখানকার গড় বার্ষিক তাপমাত্রা ১৭° সেলসিয়াস এবং গড় বার্ষিক বৃষ্টিপাত ১২৫০ মিমি। পরীক্ষিত মাটির পটভূমি মানগুলো হলো: মোট নাইট্রোজেন (TN) ০.৫৭ গ্রাম কেজি⁻¹, মোট ফসফরাস (TP) ১.৬৪ গ্রাম কেজি⁻¹, মোট কার্বন (TC) ১৬.৩১ গ্রাম কেজি⁻¹, আপেক্ষিক আর্দ্রতা (RH) ৩১.৮৬ গ্রাম কেজি⁻¹, ক্ষারীয় হাইড্রোলাইজড নাইট্রোজেন (N) ৮৮.৮২ মিলিগ্রাম কেজি⁻¹, কার্যকর ফসফরাস (P) ১৮.৫৫ মিলিগ্রাম কেজি⁻¹, সহজলভ্য পটাশিয়াম (K) ১০০.৩৭ মিলিগ্রাম কেজি⁻¹, মোট ক্যাডমিয়াম (Cd) ০.৩ মিলিগ্রাম কেজি⁻¹ এবং পিএইচ (pH) ৫.৪।
২০১৭ সালের ১০ই ডিসেম্বর, প্রতিটি প্লটের ০-১০ সেমি উপরিভাগের মাটির সাথে ৬ মিগ্রা/কেজি Cd2+ (CdCl2 2.5H2O) এবং চুন (০.৭৫০, ২২৫০ এবং ৩৭৫০ কেজি h m-2) প্রয়োগ ও মিশ্রিত করা হয়েছিল। প্রতিটি ট্রিটমেন্ট ৩ বার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল। পরীক্ষামূলক প্লটগুলো এলোমেলোভাবে স্থাপন করা হয়েছিল, প্রতিটি প্লটের ক্ষেত্রফল ছিল ৩ বর্গমিটার। এক বছর বয়সী প্যানাক্স নটোগিনসেং চারা মাটিতে ১৫ দিন চাষ করার পর রোপণ করা হয়েছিল। শেডিং নেট ব্যবহার করার সময়, ছায়াযুক্ত ছাউনির নিচে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর আলোর তীব্রতা স্বাভাবিক প্রাকৃতিক আলোর তীব্রতার প্রায় ১৮% ছিল। স্থানীয় ঐতিহ্যবাহী চাষ পদ্ধতি অনুসারে এর চাষ করা হয়েছিল। ২০১৯ সালে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর পরিপক্কতার পর্যায়ে সোডিয়াম অক্সালেট হিসাবে অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করা হবে। অক্সালিক অ্যাসিডের ঘনত্ব ছিল যথাক্রমে ০, ০.১ এবং ০.২ মোল/লিটার, এবং আবর্জনা পরিস্রুত তরলের গড় pH অনুকরণ করার জন্য NaOH দিয়ে pH ৫.১৬-তে সামঞ্জস্য করা হয়েছিল। সপ্তাহে একবার সকাল ৮টায় পাতার উপরের এবং নিচের পৃষ্ঠে স্প্রে করুন। ৪ বার স্প্রে করার পর, ৫ম সপ্তাহে ৩ বছর বয়সী প্যানাক্স নটোগিনসেং গাছ সংগ্রহ করা হয়েছিল।
২০১৯ সালের নভেম্বরে, মাঠ থেকে অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে শোধন করা তিন বছর বয়সী প্যানাক্স নটোগিনসেং গাছ সংগ্রহ করা হয়েছিল। শারীরবৃত্তীয় বিপাক এবং এনজাইমের কার্যকারিতা পরীক্ষার জন্য তিন বছর বয়সী প্যানাক্স নটোগিনসেং গাছের কিছু নমুনা ফ্রিজার টিউবে রেখে তরল নাইট্রোজেনে দ্রুত হিমায়িত করা হয় এবং তারপর -৮০°C তাপমাত্রার একটি রেফ্রিজারেটরে স্থানান্তর করা হয়। পরিণত পর্যায়ের মূলের নমুনাগুলিতে ক্যাডমিয়াম (Cd) এবং সক্রিয় উপাদানের পরিমাণ অবশ্যই নির্ণয় করতে হবে। কলের জল দিয়ে ধোয়ার পর, নমুনাগুলিকে ১০৫°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিট ধরে শুকিয়ে, মিশ্রণটিকে ৭৫°C তাপমাত্রায় রেখে একটি হামানদিস্তায় গুঁড়ো করে সংরক্ষণ করতে হবে।
একটি আর্লেনমেয়ার ফ্লাস্কে ০.২ গ্রাম শুকনো উদ্ভিদের নমুনা ওজন করে নিন, এতে ৮ মিলি HNO3 এবং ২ মিলি HClO4 যোগ করুন এবং সারারাতের জন্য মুখবন্ধ করে রাখুন। পরের দিন, একটি বাঁকানো গলাযুক্ত ফানেল একটি ত্রিকোণাকার ফ্লাস্কে রেখে তড়িৎ-তাপীয় বিয়োজন ঘটানো হয়, যতক্ষণ না সাদা ধোঁয়া দেখা যায় এবং বিয়োজন দ্রবণটি স্বচ্ছ হয়ে যায়। কক্ষ তাপমাত্রায় ঠান্ডা করার পর, মিশ্রণটি একটি ১০ মিলি আয়তনিক ফ্লাস্কে স্থানান্তর করা হয়। একটি অ্যাটমিক অ্যাবজর্পশন স্পেকট্রোমিটার (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) ব্যবহার করে ক্যাডমিয়ামের (Cd) পরিমাণ নির্ণয় করা হয়। (GB/T 23739-2009)।
একটি ৫০ মিলি প্লাস্টিকের বোতলে ০.২ গ্রাম শুকনো উদ্ভিদের নমুনা ওজন করে নিন, এতে ১০ মিলি ১ মোল/লিটার HCl যোগ করুন, বোতলের মুখ বন্ধ করে ১৫ ঘন্টা ঝাঁকান এবং ছেঁকে নিন। একটি পিপেট ব্যবহার করে, উপযুক্ত লঘুকরণের জন্য প্রয়োজনীয় পরিমাণ পরিস্রুত দ্রবণ তুলে নিন এবং Sr²⁺ এর ঘনত্ব ১ গ্রাম/লিটার-এ আনতে SrCl₂ দ্রবণ যোগ করুন। একটি অ্যাটমিক অ্যাবজর্পশন স্পেকট্রোমিটার (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) ব্যবহার করে ক্যালসিয়ামের (Ca) পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছিল।
ম্যালনডাইঅ্যালডিহাইড (MDA), সুপারঅক্সাইড ডিসমিউটেজ (SOD), পারঅক্সিডেজ (POD), এবং ক্যাটারেজ (CAT) রেফারেন্স কিট পদ্ধতি (DNM-9602, বেইজিং পুলাং নিউ টেকনোলজি কোং, লিমিটেড, পণ্য নিবন্ধন নম্বর), সংশ্লিষ্ট পরিমাপ কিট নং: জিংইয়াওডিয়ানজি (কোয়াসি) ওয়ার্ড ২০১৩ নং ২৪০০১৪৭ ব্যবহার করুন)।
প্যানাক্স নটোগিনসেং নমুনার ০.০৫ গ্রাম ওজন করে নিন এবং টিউবের একপাশে অ্যানথ্রোন-সালফিউরিক অ্যাসিড বিকারকটি যোগ করুন। তরলটি ভালোভাবে মেশানোর জন্য টিউবটি ২-৩ সেকেন্ড ঝাঁকান। টিউবটি ১৫ মিনিটের জন্য টেস্ট টিউব র‍্যাকে রাখুন। ৬২০ ন্যানোমিটার তরঙ্গদৈর্ঘ্যে ইউভি-ভিসিবল স্পেকট্রোফটোমেট্রি (UV-5800, সাংহাই ইউয়ানজি ইন্সট্রুমেন্ট কোং, লিমিটেড, চীন) ব্যবহার করে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছিল।
০.৫ গ্রাম তাজা প্যানাক্স নটোগিনসেং নমুনা ওজন করে, ৫ মিলি পাতিত জলের সাথে পিষে একটি সমজাতীয় মিশ্রণ তৈরি করুন এবং ১০,০০০ g গতিতে ১০ মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন। উপরিভাগের তরলকে একটি নির্দিষ্ট আয়তনে পাতলা করুন। কুমাশি ব্রিলিয়ান্ট ব্লু পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল। দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ বর্ণালীর অতিবেগুনি এবং দৃশ্যমান অঞ্চলে (UV-5800, সাংহাই ইউয়ানশি ইন্সট্রুমেন্ট কোং, লিমিটেড, চীন) ৫৯৫ nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে স্পেকট্রোফটোমেট্রি ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল এবং বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিনের স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ থেকে গণনা করা হয়েছিল।
০.৫ গ্রাম তাজা নমুনা ওজন করে, ৫ মিলি ১০% অ্যাসিটিক অ্যাসিড যোগ করে পিষে সমজাতীয় করুন, ছেঁকে নিন এবং স্থির আয়তন পর্যন্ত লঘু করুন। নিনহাইড্রিন দ্রবণ ব্যবহার করে ক্রোমোজেটিক পদ্ধতি। মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ আল্ট্রাভায়োলেট-ভিজিবল স্পেকট্রোফটোমেট্রি (UV-5800, সাংহাই ইউয়ানশি ইন্সট্রুমেন্ট কোং, লিমিটেড, চীন) দ্বারা ৫৭০ ন্যানোমিটার তরঙ্গদৈর্ঘ্যে নির্ণয় করা হয়েছিল এবং স্ট্যান্ডার্ড লিউসিন কার্ভ থেকে গণনা করা হয়েছিল।
০.৫ গ্রাম তাজা নমুনা ওজন করে, এর সাথে ৫ মিলি ৩% সালফোসালিসাইলিক অ্যাসিড দ্রবণ যোগ করা হয়, এরপর ওয়াটার বাথে রেখে ১০ মিনিট ধরে গরম ও ঝাঁকানো হয়। ঠান্ডা হওয়ার পর, দ্রবণটি ছেঁকে একটি নির্দিষ্ট আয়তন পর্যন্ত লঘু করা হয়। এক্ষেত্রে অ্যাসিড নিনহাইড্রিন ক্রোমোজেটিক পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রোলিনের পরিমাণ ইউভি-ভিসিবল স্পেকট্রোফোটোমেট্রি (UV-5800, সাংহাই ইউয়ানশি ইন্সট্রুমেন্ট কোং, লিমিটেড, চীন) ব্যবহার করে ৫২০ ন্যানোমিটার তরঙ্গদৈর্ঘ্যে নির্ণয় করা হয় এবং প্রোলিন স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ থেকে তা গণনা করা হয়।
গণপ্রজাতন্ত্রী চীনের ফার্মাকোপিয়া (২০১৫ সংস্করণ) অনুসারে হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) দ্বারা স্যাপোনিনের পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছিল। HPLC-এর মূল নীতি হলো, মোবাইল ফেজ হিসেবে একটি উচ্চ-চাপের তরল ব্যবহার করা এবং অতিসূক্ষ্ম কণার জন্য একটি স্টেশনারি ফেজ কলামে অত্যন্ত কার্যকর পৃথকীকরণ প্রযুক্তি প্রয়োগ করা। পরিচালনার দক্ষতা নিম্নরূপ:
HPLC শর্তাবলী এবং সিস্টেম উপযুক্ততা পরীক্ষা (সারণি ১): নিম্নলিখিত সারণি অনুসারে গ্রেডিয়েন্ট এলুশন করা হয়েছিল, যেখানে ফিলার হিসাবে অক্টাডেসিলসিলেন-আবদ্ধ সিলিকা জেল, মোবাইল ফেজ A হিসাবে অ্যাসিটোনাইট্রাইল, মোবাইল ফেজ B হিসাবে জল ব্যবহার করা হয়েছিল এবং সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য ছিল ২০৩ nm। প্যানাক্স নটোগিনসেং স্যাপোনিনের R1 পিক থেকে গণনা করা তাত্ত্বিক কাপের সংখ্যা কমপক্ষে ৪০০০ হওয়া উচিত।
রেফারেন্স দ্রবণ প্রস্তুতকরণ: জিনসেনোসাইড Rg1, জিনসেনোসাইড Rb1 এবং নোটোজিনসেনোসাইড R1 সঠিকভাবে ওজন করুন, এরপর মিথানল যোগ করে প্রতি মিলিলিটারে ০.৪ মিলিগ্রাম জিনসেনোসাইড Rg1, ০.৪ মিলিগ্রাম জিনসেনোসাইড Rb1 এবং ০.১ মিলিগ্রাম নোটোজিনসেনোসাইড R1-এর একটি মিশ্র দ্রবণ তৈরি করুন।
পরীক্ষার দ্রবণ প্রস্তুতি: ০.৬ গ্রাম সানশিন পাউডার মেপে নিন এবং এর সাথে ৫০ মিলি মিথানল যোগ করুন। মিশ্রণটির ওজন (W1) নিয়ে সারারাত রেখে দেওয়া হয়। এরপর মিশ্র দ্রবণটিকে একটি ওয়াটার বাথে ৮০° সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ২ ঘণ্টা ধরে হালকাভাবে ফোটানো হয়। ঠান্ডা হওয়ার পর, মিশ্র দ্রবণটির ওজন নিন এবং প্রাপ্ত মিথানলটি W1-এর প্রথম ভরের সাথে যোগ করুন। তারপর ভালোভাবে ঝাঁকিয়ে ফিল্টার করুন। ফিল্টার করা দ্রবণটি পরিমাপের জন্য রেখে দেওয়া হয়।
১০ µl স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ এবং ১০ µl পরিস্রুত দ্রবণ দ্বারা স্যাপোনিনের পরিমাণ সঠিকভাবে শোষণ করে HPLC (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.)24-এ ইনজেক্ট করা হয়েছিল।
স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ: Rg1, Rb1, R1 মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণের পরিমাণ নির্ণয়ের জন্য, ক্রোমাটোগ্রাফির শর্তাবলী পূর্বের মতোই। y-অক্ষে পরিমাপকৃত পিক এরিয়া এবং অ্যাবসিসাতে স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণে স্যাপোনিনের ঘনত্ব বসিয়ে স্ট্যান্ডার্ড কার্ভটি গণনা করুন। স্যাপোনিনের ঘনত্ব গণনা করার জন্য নমুনার পরিমাপকৃত পিক এরিয়া স্ট্যান্ডার্ড কার্ভে বসান।
P. notogensings-এর ০.১ গ্রাম নমুনা ওজন করে নিন এবং ৫০ মিলি ৭০% CH3OH দ্রবণ যোগ করুন। ২ ঘন্টা ধরে সনিকেট করুন, তারপর ৪০০০ আরপিএম-এ ১০ মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন। সুপারন্যাট্যান্ট থেকে ১ মিলি নিন এবং এটিকে ১২ গুণ পাতলা করুন। ২৪৯ ন্যানোমিটার তরঙ্গদৈর্ঘ্যে আল্ট্রাভায়োলেট-ভিজিবল স্পেকট্রোফোটোমেট্রি (UV-5800, সাংহাই ইউয়ানজি ইন্সট্রুমেন্ট কোং, লিমিটেড, চীন) দ্বারা ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছিল। কোয়ারসেটিন একটি আদর্শ প্রচুর পরিমাণে প্রাপ্ত পদার্থ৮।
এক্সেল ২০১০ সফটওয়্যার ব্যবহার করে ডেটা সাজানো হয়েছিল। এসপিএসএস স্ট্যাটিস্টিকস ২০ সফটওয়্যার ব্যবহার করে ডেটার ভেদাঙ্ক বিশ্লেষণ মূল্যায়ন করা হয়েছিল। অরিজিন প্রো ৯.১ দ্বারা ছবিটি আঁকা হয়েছে। গণনাকৃত পরিসংখ্যানের মধ্যে রয়েছে গড় ± আদর্শ বিচ্যুতি। পরিসংখ্যানগত তাৎপর্যের বিবৃতি P<0.05 এর উপর ভিত্তি করে দেওয়া হয়েছে।
একই ঘনত্বের অক্সালিক অ্যাসিড পাতায় স্প্রে করার ক্ষেত্রে, চুন প্রয়োগ বৃদ্ধির সাথে সাথে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর মূলে ক্যালসিয়ামের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (সারণি ২)। চুন প্রয়োগ না করার তুলনায়, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে ছাড়া ৩৭৫০ কেজি পিপিএম চুন প্রয়োগে ক্যালসিয়ামের পরিমাণ ২১২% বৃদ্ধি পেয়েছে। একই চুন প্রয়োগের হারে, স্প্রে করা অক্সালিক অ্যাসিডের ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে ক্যালসিয়ামের পরিমাণ সামান্য বৃদ্ধি পেয়েছে।
শিকড়ে ক্যাডমিয়ামের (Cd) পরিমাণ ০.২২ থেকে ০.৭০ মিলিগ্রাম/কেজি পর্যন্ত পরিবর্তিত হয়েছে। অক্সালিক অ্যাসিডের একই স্প্রে ঘনত্বে, চুন প্রয়োগের হার বৃদ্ধির সাথে সাথে ২২৫০ কেজি/হেক্টর ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। নিয়ন্ত্রণের তুলনায়, যখন শিকড়ে ২২৫০ কেজি/গ্রাম চুন এবং ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করা হয়, তখন ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ ৬৮.৫৭% হ্রাস পায়। চুন ছাড়া এবং ৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর শিকড়ে ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। ২২৫০ কেজি/গ্রাম এবং ৩৭৫০ কেজি/গ্রাম চুন প্রয়োগের ফলে, অক্সালিক অ্যাসিডের ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে শিকড়ে ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ প্রথমে হ্রাস পায় এবং তারপর বৃদ্ধি পায়। এছাড়াও, 2D বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে প্যানাক্স নটোগিনসেং মূলের ক্যালসিয়াম (Ca) উপাদান চুন (F = 82.84**), ক্যাডমিয়াম (Cd) উপাদান চুন (F = 74.99**) এবং অক্সালিক অ্যাসিড (F = 74.99**), (F = 7.72*) দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত হয়েছে।
চুন প্রয়োগের হার এবং অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে MDA-এর পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। চুন এবং ৩৭৫০ কেজি/বর্গমিটার চুন দিয়ে শোধন করা প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর মূলের মধ্যে MDA-এর পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পাওয়া যায়নি। ৭৫০ কেজি/হেক্টর এবং ২২৫০ কেজি/হেক্টর চুন প্রয়োগের হারে, স্প্রে করা ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিডে MDA-এর পরিমাণ, স্প্রে না করা অক্সালিক অ্যাসিডের তুলনায় যথাক্রমে ৫৮.৩৮% এবং ৪০.২১% কম ছিল। যখন ৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন এবং ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ করা হয়েছিল, তখন MDA-এর পরিমাণ (৭.৫৭ ন্যানোমোল/গ্রাম) সর্বনিম্ন ছিল (চিত্র ১)।
ক্যাডমিয়াম স্ট্রেসের অধীনে প্যানাক্স নটোগিনসেং মূলে অক্সালিক অ্যাসিড পাতা স্প্রে করার ফলে ম্যালনডাইঅ্যালডিহাইডের পরিমাণের উপর প্রভাব [জে]। পি<০.০৫)। নিচেও একই।
৩৭৫০ কেজি/হেক্টর/বর্গমিটার চুন প্রয়োগ ব্যতীত, প্যানাক্স নটোগিনসেং মূলতন্ত্রের এসওডি (SOD) সক্রিয়তায় কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি। ০, ৭৫০ এবং ২২৫০ কেজি/হেক্টর চুন ব্যবহারের ক্ষেত্রে, ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে এসওডি-র সক্রিয়তা অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ না করার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যা যথাক্রমে ১৭৭.৮৯%, ৬১.৬২% এবং ৪৫.০৮% বৃদ্ধি পেয়েছিল। চুন প্রয়োগ ছাড়া এবং ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে মূলে এসওডি-র সক্রিয়তা (৫৯৮.১৮ ইউনিট/গ্রাম) সর্বোচ্চ ছিল। অক্সালিক অ্যাসিড ছাড়া একই ঘনত্বে অথবা ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে, চুনের পরিমাণ বৃদ্ধির সাথে সাথে এসওডি-র সক্রিয়তা বৃদ্ধি পায়। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার পর এসওডি-র সক্রিয়তা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায় (চিত্র ২)।
ক্যাডমিয়াম পীড়নের অধীনে প্যানাক্স নটোগিনসেং মূলের সুপারঅক্সাইড ডিসমিউটেজ, পারঅক্সিডেজ এবং ক্যাটালেজ এনজাইমের কার্যকলাপের উপর অক্সালিক অ্যাসিড পাতায় স্প্রে করার প্রভাব [জে]।
মূলে SOD কার্যকলাপের মতোই, চুন ছাড়া এবং ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার সময় মূলে POD কার্যকলাপ (৬৩.৩৩ µmol/g) সর্বোচ্চ ছিল, যা কন্ট্রোলের (২৫.৫০ µmol/g) চেয়ে ১৪৮.৩৫% বেশি ছিল। অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে-র ঘনত্ব বৃদ্ধি এবং ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন প্রয়োগের ফলে POD কার্যকলাপ প্রথমে বৃদ্ধি পায় এবং পরে হ্রাস পায়। ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগের তুলনায়, ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগে POD কার্যকলাপ ৩৬.৩১% হ্রাস পায় (চিত্র ২)।
০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করা এবং ২২৫০ কেজি/হেক্টর বা ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন প্রয়োগ করা ছাড়া, CAT সক্রিয়তা নিয়ন্ত্রণের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। কোনো অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ না করার তুলনায়, ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড এবং ০.২২৫০ কেজি/হেক্টর/বর্গমিটার বা ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর/বর্গমিটার চুন প্রয়োগে CAT সক্রিয়তা যথাক্রমে ২৭৬.০৮%, ২৭৬.৬৯% এবং ৩৩.০৫% বৃদ্ধি পেয়েছিল। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ করা শিকড়ের CAT সক্রিয়তা (৮০৩.৫২ µmol/g) ছিল সর্বোচ্চ। ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন এবং ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগে CAT সক্রিয়তা (১৭২.৮৮ µmol/g) ছিল সর্বনিম্ন (চিত্র ২)।
দ্বিচলকীয় বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে, প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর CAT সক্রিয়তা এবং MDA অক্সালিক অ্যাসিড বা চুন স্প্রে করার পরিমাণ এবং উভয় ট্রিটমেন্টের সাথেই উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল (সারণি ৩)। মূলে SOD সক্রিয়তা চুন ও অক্সালিক অ্যাসিড ট্রিটমেন্ট অথবা অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে-এর ঘনত্বের সাথে অত্যন্ত সম্পর্কযুক্ত ছিল। মূলের POD সক্রিয়তা প্রয়োগকৃত চুনের পরিমাণ অথবা চুন ও অক্সালিক অ্যাসিডের যুগপৎ প্রয়োগের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল।
চুন প্রয়োগের হার এবং অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে মূল জাতীয় ফসলে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ হ্রাস পেয়েছে। চুন প্রয়োগ ছাড়া এবং ৭৫০ কেজি·হেক্টর·মি−২ হারে চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর মূলে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না। ২২৫০ কেজি·হেক্টর·মি−২ হারে চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, ০.২ মোল·লিটার−১ অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে শোধন করা হলে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ, অ-অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে স্প্রে করার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যা ২২.৮১% বৃদ্ধি পেয়েছিল। ৩৭৫০ কেজি·হেক্টর·মি−২ হারে চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। ০.২ মোল·লিটার−১ অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ক্ষেত্রে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ, অক্সালিক অ্যাসিড ছাড়া শোধনের তুলনায় ৩৮.৭৭% কম ছিল। এছাড়াও, ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ সর্বনিম্ন ২০৫.৮০ মিলিগ্রাম/গ্রাম পাওয়া গেছে (চিত্র ৩)।
ক্যাডমিয়াম স্ট্রেসের অধীনে প্যানাক্স নটোগিনসেং উদ্ভিদের মূলে অক্সালিক অ্যাসিড পাতা স্প্রে করার ফলে মোট দ্রবণীয় শর্করা এবং দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণের উপর প্রভাব [জে]।
চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগের হার বৃদ্ধির সাথে সাথে শিকড়ে দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ হ্রাস পেয়েছে। চুনের অনুপস্থিতিতে, ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ কন্ট্রোলের তুলনায় ১৬.২০% উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। প্রতি হেক্টরে ৭৫০ কেজি চুন প্রয়োগ করলে, প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর শিকড়ে দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি। প্রতি হেক্টরে ২২৫০ কেজি চুন প্রয়োগের হারে, ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ অক্সালিক অ্যাসিডবিহীন স্প্রে করার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল (৩৫.১১%)। প্রতি হেক্টরে ৩৭৫০ কেজি চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে-এর ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, এবং ০.২ মোল/লিটার ঘনত্বে প্রয়োগ করলে দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ (২৬৯.৮৪ মাইক্রোগ্রাম/গ্রাম) সর্বনিম্ন ছিল। ১. অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে স্প্রে করা (চিত্র ৩)।
চুন প্রয়োগ ছাড়া প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর মূলে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পাওয়া যায়নি। অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধি এবং প্রতি হেক্টরে ৭৫০ কেজি হারে চুন প্রয়োগের ফলে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ প্রথমে কমে এবং পরে বেড়ে যায়। প্রতি হেক্টরে ২২৫০ কেজি চুন এবং ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগের ফলে, অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ না করার তুলনায় মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ ৩৩.৫৮% উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পায়। অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধি এবং প্রতি হেক্টরে ৩৭৫০ কেজি চুন প্রয়োগের ফলে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে কমে যায়। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে প্রয়োগে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ, অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ ছাড়া প্রয়োগের তুলনায় ৪৯.৭৬% কম ছিল। অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ ছাড়া প্রয়োগে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ সর্বোচ্চ ছিল, যা ছিল ২.০৯ মিলিগ্রাম/গ্রাম। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ফলে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ (১.০৫ মিলিগ্রাম/গ্রাম) সর্বনিম্ন ছিল (চিত্র ৪)।
ক্যাডমিয়াম পীড়নের অধীনে প্যানাক্স নটোগিনসেং উদ্ভিদের মূলে অক্সালিক অ্যাসিড পত্র স্প্রে করার ফলে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিড এবং প্রোলিনের পরিমাণের উপর প্রভাব [জে]।
চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগের হার বৃদ্ধির সাথে সাথে শিকড়ে প্রোলিনের পরিমাণ হ্রাস পেয়েছে। চুন প্রয়োগ না করলে প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর প্রোলিনের পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না। অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব এবং ৭৫০, ২২৫০ কেজি/হেক্টর হারে চুন প্রয়োগের সাথে সাথে প্রোলিনের পরিমাণ প্রথমে হ্রাস পায় এবং তারপর বৃদ্ধি পায়। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ক্ষেত্রে প্রোলিনের পরিমাণ ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যা যথাক্রমে ১৯.৫২% এবং ৪৪.৩৩% বৃদ্ধি পেয়েছে। ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে প্রোলিনের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার পর প্রোলিনের পরিমাণ অক্সালিক অ্যাসিড ছাড়া অবস্থার তুলনায় ৫৪.৬৮% কম ছিল। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে প্রক্রিয়াকরণের পর প্রোলিনের পরিমাণ সর্বনিম্ন ছিল এবং এর পরিমাণ ছিল ১১.৩৭ মাইক্রোগ্রাম/গ্রাম (চিত্র ৪)।
প্যানাক্স নটোগিনসেং-এ মোট স্যাপোনিনের পরিমাণ ছিল Rg1>Rb1>R1। অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে-এর ঘনত্ব বৃদ্ধি এবং চুন প্রয়োগ না করার ক্ষেত্রে তিনটি স্যাপোনিনের পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না (সারণি ৪)।
০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার সময় R1-এর পরিমাণ, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে না করে ৭৫০ বা ৩৭৫০ কেজি·হেক্টর·বর্গমিটার চুন ব্যবহারের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। ০ বা ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে ঘনত্বের ক্ষেত্রে, চুন প্রয়োগের হার বৃদ্ধির সাথে R1-এর পরিমাণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখা যায়নি। ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে ঘনত্বের ক্ষেত্রে, ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর চুনের R1-এর পরিমাণ, চুন ছাড়া ৪৩.৮৪%-এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (সারণি ৪)।
অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব এবং ৭৫০ কেজি·ঘণ্টা·বর্গমিটার−২ হারে চুন প্রয়োগের সাথে সাথে Rg1-এর পরিমাণ প্রথমে বৃদ্ধি পায় এবং তারপর হ্রাস পায়। ২২৫০ বা ৩৭৫০ কেজি·ঘণ্টা·বর্গমিটার−২ হারে চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে-এর ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে Rg1-এর পরিমাণ হ্রাস পায়। অক্সালিক অ্যাসিডের একই স্প্রে ঘনত্বে, চুন প্রয়োগের হার বৃদ্ধির সাথে সাথে Rg1-এর পরিমাণ প্রথমে বৃদ্ধি পায় এবং তারপর হ্রাস পায়। নিয়ন্ত্রণের তুলনায়, অক্সালিক অ্যাসিডের তিনটি স্প্রে ঘনত্ব এবং ৭৫০ কেজি·ঘণ্টা·বর্গমিটার−২ ব্যতীত, Rg1-এর পরিমাণ নিয়ন্ত্রণের চেয়ে বেশি ছিল; অন্যান্য ট্রিটমেন্টের ক্ষেত্রে শিকড়ে Rg1-এর পরিমাণ নিয়ন্ত্রণের চেয়ে কম ছিল। ৭৫০ কেজি·গ্রাম−২ চুন এবং ০.১ মোল·লিটার−১ অক্সালিক অ্যাসিড দিয়ে স্প্রে করার সময় Rg1-এর পরিমাণ সর্বোচ্চ ছিল, যা নিয়ন্ত্রণের চেয়ে ১১.৫৪% বেশি ছিল (সারণি ৪)।
অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বৃদ্ধি এবং প্রতি হেক্টরে ২২৫০ কেজি চুন প্রয়োগের হারের সাথে Rb1-এর পরিমাণ প্রথমে বৃদ্ধি পায় এবং তারপর হ্রাস পায়। ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার পর, Rb1-এর পরিমাণ সর্বোচ্চ ৩.৪৬%-এ পৌঁছায়, যা অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে না করার তুলনায় ৭৪.৭৫% বেশি। অন্যান্য চুন প্রয়োগের ক্ষেত্রে, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে-এর বিভিন্ন ঘনত্বের মধ্যে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না। ০.১ এবং ০.২ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার সময়, Rb1-এর পরিমাণ প্রথমে হ্রাস পায় এবং তারপর যোগ করা চুনের পরিমাণ বৃদ্ধির সাথে সাথে হ্রাস পায় (সারণি ৪)।
একই ঘনত্বের অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ক্ষেত্রে, চুনের প্রয়োগের হার বাড়ার সাথে সাথে ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ প্রথমে বাড়ে এবং তারপর কমে যায়। চুন প্রয়োগ না করা হলে অথবা বিভিন্ন ঘনত্বের অক্সালিক অ্যাসিডের সাথে ৩৭৫০ কেজি/হেক্টর চুন স্প্রে করা হলে ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখা যায়। যখন ৭৫০ এবং ২২৫০ কেজি/হেক্টর/হেক্টর হারে চুন প্রয়োগ করা হয়, তখন অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব বাড়ার সাথে সাথে ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ প্রথমে বাড়ে এবং তারপর কমে যায়। যখন ৭৫০ কেজি/হেক্টর হারে ০.১ মোল/লিটার অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করা হয়, তখন ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ সর্বোচ্চ হয় এবং এর পরিমাণ দাঁড়ায় ৪.৩৮ মিলিগ্রাম/গ্রাম, যা একই প্রয়োগ হারে অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে না করা চুনের চেয়ে ১৮.৩৮% বেশি। অক্সালিক অ্যাসিড ০.১ মোল/লিটার স্প্রে করার ফলে ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে না করা এবং ২২৫০ কেজি/হেক্টর চুন প্রয়োগের তুলনায় ২১.৭৪% বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র ৫)।
ক্যাডমিয়াম পীড়নের অধীনে প্যানাক্স নটোগিনসেং মূলের ফ্ল্যাভোনয়েড উপাদানের উপর অক্সালেট পত্র স্প্রে করার প্রভাব [জে]।
দ্বিচলকীয় বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে, প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর দ্রবণীয় শর্করার পরিমাণ প্রয়োগকৃত চুনের পরিমাণ এবং স্প্রে করা অক্সালিক অ্যাসিডের ঘনত্বের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত। মূল ফসলের দ্রবণীয় প্রোটিনের পরিমাণ চুন, চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড উভয়ের প্রয়োগের হারের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত। মূলে মুক্ত অ্যামিনো অ্যাসিড এবং প্রোলিনের পরিমাণ চুন, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব এবং চুন ও অক্সালিক অ্যাসিডের প্রয়োগের হারের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত (সারণি ৫)।
প্যানাক্স নটোগিনসেং-এর মূলে R1-এর পরিমাণ, অক্সালিক অ্যাসিড স্প্রে করার ঘনত্ব, প্রয়োগকৃত চুনের পরিমাণ এবং চুন ও অক্সালিক অ্যাসিডের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল। ফ্ল্যাভোনয়েডের পরিমাণ, স্প্রে করা অক্সালিক অ্যাসিডের ঘনত্ব এবং প্রয়োগকৃত চুনের পরিমাণের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল।
মাটিতে ক্যাডমিয়ামকে (Cd) অচল করে উদ্ভিদের ক্যাডমিয়াম কমানোর জন্য অনেক সংশোধনী ব্যবহার করা হয়েছে, যেমন চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিড³⁰। ফসলে ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ কমাতে মাটির সংযোজনী হিসেবে চুন ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়³¹। লিয়াং এবং অন্যান্যরা³² রিপোর্ট করেছেন যে ভারী ধাতু দ্বারা দূষিত মাটি পুনরুদ্ধার করতে অক্সালিক অ্যাসিডও ব্যবহার করা যেতে পারে। দূষিত মাটিতে বিভিন্ন ঘনত্বের অক্সালিক অ্যাসিড প্রয়োগ করার পর, মাটির জৈব পদার্থ বৃদ্ধি পায়, ক্যাটায়ন বিনিময় ক্ষমতা হ্রাস পায় এবং পিএইচ (pH) মান বৃদ্ধি পায়³³। অক্সালিক অ্যাসিড মাটিতে থাকা ধাতব আয়নের সাথেও বিক্রিয়া করতে পারে। ক্যাডমিয়ামের চাপের অধীনে, নিয়ন্ত্রিত নমুনার তুলনায় প্যানাক্স নটোগিনসেং-এ ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পায়। তবে, চুন ব্যবহার করার পর, এটি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায়। এই গবেষণায়, প্রতি হেক্টরে ৭৫০ কেজি চুন প্রয়োগ করলে গাছের মূলে ক্যাডমিয়ামের (Cd) পরিমাণ জাতীয় মানদণ্ডে (Cd সীমা: Cd≤০.৫ মিলিগ্রাম/কেজি, AQSIQ, GB/T 19086-200834) পৌঁছায় এবং প্রতি হেক্টরে ২২৫০ কেজি চুন প্রয়োগে সবচেয়ে ভালো ফল পাওয়া যায়। চুন প্রয়োগের ফলে মাটিতে ক্যালসিয়াম (Ca2+) এবং ক্যাডমিয়াম (Cd2+) এর মধ্যে প্রতিযোগিতার জন্য প্রচুর ক্ষেত্র তৈরি হয় এবং অক্সালিক অ্যাসিড যোগ করলে প্যানাক্স নটোগিনসেং গাছের মূলে ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ হ্রাস পেতে পারে। তবে, চুন এবং অক্সালিক অ্যাসিডের সংমিশ্রণে প্যানাক্স নটোগিনসেং গাছের মূলে ক্যাডমিয়ামের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়ে জাতীয় মানদণ্ডে পৌঁছায়। মাটির Ca2+ ভর প্রবাহের সময় মূলের পৃষ্ঠে শোষিত হয় এবং ক্যালসিয়াম চ্যানেল (Ca2+-চ্যানেল), ক্যালসিয়াম পাম্প (Ca2+-AT-Pase) এবং Ca2+/H+ অ্যান্টিপোর্টারের মাধ্যমে মূল কোষ দ্বারা গৃহীত হতে পারে, এবং তারপর অনুভূমিকভাবে মূলের জাইলেমে পরিবাহিত হয়। মূলের Ca-এর পরিমাণ Cd-এর পরিমাণের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে নেতিবাচকভাবে সম্পর্কিত ছিল (P<0.05)। Ca-এর পরিমাণ বৃদ্ধির সাথে Cd-এর পরিমাণ হ্রাস পেয়েছে, যা Ca এবং Cd-এর বৈরিতার মতামতের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। ভেদাঙ্ক বিশ্লেষণ দেখিয়েছে যে চুনের পরিমাণ Panax notoginseng-এর মূলে Ca-এর পরিমাণকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে। Pongrac et al. 35 রিপোর্ট করেছেন যে Cd ক্যালসিয়াম অক্সালেট স্ফটিকে অক্সালেটের সাথে আবদ্ধ হয় এবং Ca-এর সাথে প্রতিযোগিতা করে। যাইহোক, অক্সালেট দ্বারা Ca-এর নিয়ন্ত্রণ উল্লেখযোগ্য ছিল না। এটি দেখায় যে অক্সালিক অ্যাসিড এবং Ca2+ দ্বারা গঠিত ক্যালসিয়াম অক্সালেটের অধঃক্ষেপণ একটি সাধারণ অধঃক্ষেপণ ছিল না, এবং সহ-অধঃক্ষেপণ প্রক্রিয়াটি বিভিন্ন বিপাকীয় পথ দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হতে পারে।