nature.com দেখার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজার সংস্করণটি ব্যবহার করছেন তাতে সীমিত CSS সমর্থন রয়েছে। সর্বোত্তম অভিজ্ঞতার জন্য, আমরা আপনাকে সর্বশেষ ব্রাউজার সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্যতা মোড বন্ধ করে দিন)। উপরন্তু, অব্যাহত সমর্থন নিশ্চিত করার জন্য, এই সাইটে স্টাইল বা জাভাস্ক্রিপ্ট অন্তর্ভুক্ত থাকবে না।
হাইড্রোজেন সালফাইড (H2S) মানবদেহে একাধিক শারীরবৃত্তীয় এবং রোগগত প্রভাব ফেলে। জৈবিক পরীক্ষায় H2S এর প্রভাব মূল্যায়নের জন্য সোডিয়াম হাইড্রোসালফাইড (NaHS) ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। যদিও NaHS দ্রবণ থেকে H2S নষ্ট হতে মাত্র কয়েক মিনিট সময় লাগে, কিছু প্রাণী গবেষণায় পানীয় জলে H2S এর জন্য দাতা যৌগ হিসাবে NaHS দ্রবণ ব্যবহার করা হয়েছে। এই গবেষণায় অনুসন্ধান করা হয়েছে যে ইঁদুর/ইঁদুরের বোতলে প্রস্তুত 30 μM NaHS ঘনত্বের পানীয় জল কমপক্ষে 12-24 ঘন্টা স্থিতিশীল থাকতে পারে কিনা, যেমন কিছু লেখক পরামর্শ দিয়েছেন। পানীয় জলে NaHS (30 μM) এর একটি দ্রবণ প্রস্তুত করুন এবং তাৎক্ষণিকভাবে ইঁদুর/ইঁদুরের জলের বোতলে ঢেলে দিন। মিথিলিন নীল পদ্ধতি ব্যবহার করে সালফাইডের পরিমাণ পরিমাপ করার জন্য পানির বোতলের ডগা এবং ভেতর থেকে 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 এবং 24 ঘন্টা নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। এছাড়াও, পুরুষ ও স্ত্রী ইঁদুরকে দুই সপ্তাহ ধরে NaHS (30 μM) ইনজেকশন দেওয়া হয় এবং প্রথম সপ্তাহ এবং দ্বিতীয় সপ্তাহের শেষে প্রতি একদিন অন্তর সিরাম সালফাইডের ঘনত্ব পরিমাপ করা হয়। পানির বোতলের ডগা থেকে প্রাপ্ত নমুনায় NaHS দ্রবণ অস্থির ছিল; ১২ এবং ২৪ ঘন্টা পরে এটি যথাক্রমে ৭২% এবং ৭৫% হ্রাস পায়। পানির বোতলের ভেতর থেকে প্রাপ্ত নমুনায়, ২ ঘন্টার মধ্যে NaHS-এর হ্রাস উল্লেখযোগ্য ছিল না; তবে, ১২ এবং ২৪ ঘন্টা পরে এটি যথাক্রমে ৪৭% এবং ৭২% হ্রাস পায়। NaHS ইনজেকশন পুরুষ ও স্ত্রী ইঁদুরের সিরাম সালফাইড স্তরকে প্রভাবিত করেনি। উপসংহারে, পানীয় জল থেকে তৈরি NaHS দ্রবণ H2S দানের জন্য ব্যবহার করা উচিত নয় কারণ দ্রবণটি অস্থির। এই পদ্ধতিতে প্রয়োগের ফলে প্রাণীরা অনিয়মিত এবং প্রত্যাশিত পরিমাণে NaHS-এর সংস্পর্শে আসবে।
হাইড্রোজেন সালফাইড (H2S) ১৭০০ সাল থেকে বিষ হিসেবে ব্যবহৃত হয়ে আসছে; তবে, ১৯৯৬ সালে আবে এবং কিমুরা একটি অন্তঃসত্ত্বা জৈব সংকেত অণু হিসেবে এর সম্ভাব্য ভূমিকা বর্ণনা করেছিলেন। গত তিন দশক ধরে, বিভিন্ন মানব সিস্টেমে H2S এর অসংখ্য কার্যকারিতা ব্যাখ্যা করা হয়েছে, যার ফলে উপলব্ধি করা হয়েছে যে H2S দাতা অণুগুলির কিছু রোগের চিকিৎসা বা ব্যবস্থাপনায় ক্লিনিকাল প্রয়োগ থাকতে পারে; সাম্প্রতিক পর্যালোচনার জন্য চিরিনো এবং অন্যান্যদের দেখুন।
অনেক কোষ সংস্কৃতি এবং প্রাণী গবেষণায় H2S এর প্রভাব মূল্যায়নের জন্য ফার্মাকোলজিকাল হাতিয়ার হিসেবে সোডিয়াম হাইড্রোসালফাইড (NaHS) ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে5,6,7,8। তবে, NaHS একটি আদর্শ H2S দাতা নয় কারণ এটি দ্রুত H2S/HS- দ্রবণে রূপান্তরিত হয়, সহজেই পলিসালফাইড দ্বারা দূষিত হয় এবং সহজেই জারিত এবং উদ্বায়ী হয়4,9। অনেক জৈবিক পরীক্ষায়, NaHS পানিতে দ্রবীভূত হয়, যার ফলে নিষ্ক্রিয় উদ্বায়ীকরণ এবং H2S10,11,12 এর ক্ষতি, H2S11,12,13 এর স্বতঃস্ফূর্ত জারণ এবং ফটোলাইসিস14 হয়। H2S11 এর উদ্বায়ীকরণের কারণে মূল দ্রবণে সালফাইড খুব দ্রুত নষ্ট হয়ে যায়। একটি খোলা পাত্রে, H2S এর অর্ধ-জীবন (t1/2) প্রায় 5 মিনিট, এবং এর ঘনত্ব প্রতি মিনিটে প্রায় 13% হ্রাস পায়10। যদিও NaHS দ্রবণ থেকে হাইড্রোজেন সালফাইডের ক্ষতি হতে মাত্র কয়েক মিনিট সময় লাগে, কিছু প্রাণী গবেষণায় ১-২১ সপ্তাহ ধরে পানীয় জলে হাইড্রোজেন সালফাইডের উৎস হিসেবে NaHS দ্রবণ ব্যবহার করা হয়েছে, প্রতি ১২-২৪ ঘন্টা অন্তর NaHS-ধারণকারী দ্রবণ প্রতিস্থাপন করা হয়েছে। ১৫, ১৬, ১৭, ১৮, ১৯, ২০, ২১, ২২, ২৩, ২৪, ২৫, ২৬ এই অনুশীলন বৈজ্ঞানিক গবেষণার নীতির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ নয়, কারণ ওষুধের ডোজ অন্যান্য প্রজাতির, বিশেষ করে মানুষের ক্ষেত্রে তাদের ব্যবহারের উপর ভিত্তি করে হওয়া উচিত। ২৭
বায়োমেডিসিনের প্রাক-ক্লিনিক্যাল গবেষণার লক্ষ্য রোগীর যত্ন বা চিকিৎসার ফলাফলের মান উন্নত করা। তবে, বেশিরভাগ প্রাণী গবেষণার ফলাফল এখনও মানুষের কাছে অনুবাদ করা হয়নি28,29,30। এই অনুবাদমূলক ব্যর্থতার একটি কারণ হল প্রাণী গবেষণার পদ্ধতিগত মানের প্রতি মনোযোগের অভাব30। অতএব, এই গবেষণার লক্ষ্য ছিল ইঁদুর/ইঁদুরের পানির বোতলে প্রস্তুত 30 μM NaHS দ্রবণ 12-24 ঘন্টার জন্য পানীয় জলে স্থিতিশীল থাকতে পারে কিনা তা তদন্ত করা, যেমন কিছু গবেষণায় দাবি করা হয়েছে বা পরামর্শ দেওয়া হয়েছে।
এই গবেষণার সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষা ইরানে পরীক্ষাগার প্রাণীদের যত্ন এবং ব্যবহারের জন্য প্রকাশিত নির্দেশিকা অনুসারে পরিচালিত হয়েছিল31। এই গবেষণার সমস্ত পরীক্ষামূলক প্রতিবেদনগুলি ARRIVE নির্দেশিকাও অনুসরণ করেছে32। শহীদ বেহেশতি মেডিকেল সায়েন্সেস বিশ্ববিদ্যালয়, এন্ডোক্রাইন সায়েন্সেস ইনস্টিটিউটের নীতিশাস্ত্র কমিটি এই গবেষণায় সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি অনুমোদন করেছে।
জিঙ্ক অ্যাসিটেট ডাইহাইড্রেট (CAS: 5970-45-6) এবং অ্যানহাইড্রাস ফেরিক ক্লোরাইড (CAS: 7705-08-0) কেমোপাহরামার বায়োকেম (কোসনে-সুর-লোয়ার, ফ্রান্স) থেকে কেনা হয়েছিল। সোডিয়াম হাইড্রোসালফাইড হাইড্রেট (CAS: 207683-19-0) এবং N,N-ডাইমিথাইল-পি-ফেনাইলেনেডিয়ামিন (DMPD) (CAS: 535-47-0) সিগমা-অ্যালড্রিচ (সেন্ট লুইস, MO, USA) থেকে কেনা হয়েছিল। আইসোফ্লুরেন পিরামল (বেথলেহেম, PA, USA) থেকে কেনা হয়েছিল। হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড (HCl) মার্ক (ডার্মস্ট্যাড, জার্মানি) থেকে কেনা হয়েছিল।
পানীয় জলে NaHS (30 μM) এর দ্রবণ তৈরি করুন এবং তাৎক্ষণিকভাবে ইঁদুর/ইঁদুরের পানির বোতলে ঢেলে দিন। NaHS কে H2S এর উৎস হিসেবে ব্যবহার করে অসংখ্য প্রকাশনার উপর ভিত্তি করে এই ঘনত্ব নির্বাচন করা হয়েছে; আলোচনা বিভাগটি দেখুন। NaHS হল একটি হাইড্রেটেড অণু যাতে বিভিন্ন পরিমাণে হাইড্রেশনের জল (অর্থাৎ, NaHS•xH2O) থাকতে পারে; প্রস্তুতকারকের মতে, আমাদের গবেষণায় ব্যবহৃত NaHS এর শতাংশ ছিল 70.7% (অর্থাৎ, NaHS•1.3 H2O), এবং আমরা আমাদের গণনায় এই মানটি বিবেচনা করেছি, যেখানে আমরা 56.06 গ্রাম/মোলের আণবিক ওজন ব্যবহার করেছি, যা নির্জল NaHS এর আণবিক ওজন। জলজ জল (যাকে স্ফটিককরণের জলও বলা হয়) হল জলের অণু যা স্ফটিক গঠন তৈরি করে 33। অ্যানহাইড্রেটের তুলনায় হাইড্রেটের বিভিন্ন ভৌত এবং তাপগতিগত বৈশিষ্ট্য রয়েছে 34।
পানীয় জলে NaHS যোগ করার আগে, দ্রাবকের pH এবং তাপমাত্রা পরিমাপ করুন। অবিলম্বে NaHS দ্রবণটি পশুর খাঁচায় ইঁদুর/ইঁদুরের পানির বোতলে ঢেলে দিন। সালফাইডের পরিমাণ পরিমাপ করার জন্য পানির বোতলের ডগা এবং ভেতর থেকে 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 এবং 24 ঘন্টা নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্রতিটি নমুনা নেওয়ার পরপরই সালফাইড পরিমাপ করা হয়েছিল। আমরা টিউবের ডগা থেকে নমুনা সংগ্রহ করেছি কারণ কিছু গবেষণায় দেখা গেছে যে পানির নলের ছোট ছিদ্রের আকার H2S বাষ্পীভবনকে কমিয়ে আনতে পারে15,19। এই সমস্যাটি বোতলের দ্রবণের ক্ষেত্রেও প্রযোজ্য বলে মনে হচ্ছে। তবে, পানির বোতলের গলায় থাকা দ্রবণের ক্ষেত্রে এটি প্রযোজ্য ছিল না, যার বাষ্পীভবনের হার বেশি ছিল এবং এটি অটোঅক্সিডাইজিং করছিল; আসলে, প্রাণীরা প্রথমে এই জল পান করেছিল।
গবেষণায় পুরুষ এবং মহিলা উইস্টার ইঁদুর ব্যবহার করা হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে পলিপ্রোপিলিন খাঁচায় (প্রতি খাঁচায় 2-3টি ইঁদুর) স্ট্যান্ডার্ড অবস্থায় (তাপমাত্রা 21-26 °C, আর্দ্রতা 32-40%) রাখা হয়েছিল যেখানে 12 ঘন্টা আলো (সকাল 7 টা থেকে সন্ধ্যা 7 টা) এবং 12 ঘন্টা অন্ধকার (সন্ধ্যা 7 টা থেকে সকাল 7 টা) ছিল। ইঁদুরগুলিকে ট্যাপের জলে বিনামূল্যে প্রবেশাধিকার ছিল এবং স্ট্যান্ডার্ড চাও (খোরাক ড্যাম পার্স কোম্পানি, তেহরান, ইরান) খাওয়ানো হয়েছিল। বয়সের সাথে মিলিত (6 মাস) স্ত্রী (n=10, শরীরের ওজন: 190-230 গ্রাম) এবং পুরুষ (n=10, শরীরের ওজন: 320-370 গ্রাম) উইস্টার ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে নিয়ন্ত্রণ এবং NaHS (30 μM) চিকিত্সা করা গোষ্ঠীতে (প্রতি গ্রুপে n=5) ভাগ করা হয়েছিল। নমুনার আকার নির্ধারণের জন্য, আমরা KISS (Keep It Simple, Stupid) পদ্ধতি ব্যবহার করেছি, যা পূর্ববর্তী অভিজ্ঞতা এবং শক্তি বিশ্লেষণকে একত্রিত করে35। আমরা প্রথমে ৩টি ইঁদুরের উপর একটি পাইলট গবেষণা পরিচালনা করে গড় সিরাম মোট সালফাইড স্তর এবং স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি (৮.১ ± ০.৮১ μM) নির্ধারণ করি। তারপর, ৮০% শক্তি বিবেচনা করে এবং দ্বি-পার্শ্বযুক্ত ৫% তাৎপর্য স্তর ধরে নিয়ে, আমরা একটি প্রাথমিক নমুনা আকার (পূর্ববর্তী সাহিত্যের উপর ভিত্তি করে n = ৫) নির্ধারণ করি যা পরীক্ষামূলক প্রাণীর নমুনা আকার গণনা করার জন্য ফেস্টিং দ্বারা প্রস্তাবিত পূর্বনির্ধারিত মানের সাথে 2.02 এর একটি মানকৃত প্রভাব আকারের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ। এই মানটিকে SD (২.০২ × ০.৮১) দিয়ে গুণ করার পরে, পূর্বাভাসিত সনাক্তযোগ্য প্রভাব আকার (১.৬ μM) ছিল ২০%, যা গ্রহণযোগ্য। এর অর্থ হল n = ৫/গ্রুপ গ্রুপগুলির মধ্যে ২০% গড় পরিবর্তন সনাক্ত করার জন্য যথেষ্ট। এক্সেল সফ্টওয়্যার ৩৬ (পরিপূরক চিত্র ১) এর র্যান্ডম ফাংশন ব্যবহার করে ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে নিয়ন্ত্রণ এবং NaSH-চিকিত্সা করা গোষ্ঠীতে ভাগ করা হয়েছিল। ফলাফল স্তরে ব্লাইন্ডিং করা হয়েছিল, এবং জৈব রাসায়নিক পরিমাপ সম্পাদনকারী তদন্তকারীরা গ্রুপ অ্যাসাইনমেন্ট সম্পর্কে অবগত ছিলেন না।
উভয় লিঙ্গের NaHS গ্রুপের 30 μM NaHS দ্রবণ পানীয় জলে প্রস্তুত করে 2 সপ্তাহ ধরে চিকিৎসা করা হয়েছিল; প্রতি 24 ঘন্টা অন্তর তাজা দ্রবণ সরবরাহ করা হয়েছিল, এই সময়কালে শরীরের ওজন পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রথম এবং দ্বিতীয় সপ্তাহের শেষে প্রতি দুই দিন অন্তর আইসোফ্লুরেন অ্যানেস্থেসিয়ার অধীনে সমস্ত ইঁদুরের লেজের ডগা থেকে রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। রক্তের নমুনাগুলিকে 10 মিনিটের জন্য 3000 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল, সিরাম আলাদা করে -80°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল পরবর্তীকালে সিরাম ইউরিয়া, ক্রিয়েটিনিন (Cr) এবং মোট সালফাইড পরিমাপের জন্য। সিরাম ইউরিয়া এনজাইমেটিক ইউরেজ পদ্ধতি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল এবং সিরাম ক্রিয়েটিনিন বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ কিট (ম্যান কোম্পানি, তেহরান, ইরান) এবং একটি স্বয়ংক্রিয় বিশ্লেষক (সিলেক্ট্রা E, সিরিয়াল নম্বর 0-2124, নেদারল্যান্ডস) ব্যবহার করে ফটোমেট্রিক জাফে পদ্ধতি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। ইউরিয়া এবং Cr এর জন্য পরিবর্তনের আন্তঃ- এবং আন্তঃ-পরীক্ষা সহগ 2.5% এর কম ছিল।
পানীয় জলে মোট সালফাইড এবং NaHS ধারণকারী সিরাম পরিমাপ করার জন্য মিথিলিন ব্লু (MB) পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়; বাল্ক দ্রবণ এবং জৈবিক নমুনায় সালফাইড পরিমাপের জন্য MB হল সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত পদ্ধতি11,37। MB পদ্ধতিটি মোট সালফাইড পুল38 অনুমান করতে এবং জলীয় পর্যায়ে H2S, HS- এবং S2 আকারে অজৈব সালফাইড পরিমাপ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে39। এই পদ্ধতিতে, জিঙ্ক অ্যাসিটেটের উপস্থিতিতে সালফার জিঙ্ক সালফাইড (ZnS) হিসাবে অবক্ষেপিত হয়11,38। জিঙ্ক অ্যাসিটেটের বৃষ্টিপাত হল অন্যান্য ক্রোমোফোর থেকে সালফাইড পৃথক করার জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত পদ্ধতি11। তীব্র অ্যাসিডিক পরিস্থিতিতে HCl11 ব্যবহার করে ZnS পুনরায় দ্রবীভূত করা হয়েছিল। ফেরিক ক্লোরাইড (Fe3+ একটি অক্সিডাইজিং এজেন্ট হিসাবে কাজ করে) দ্বারা অনুঘটকিত বিক্রিয়ায় সালফাইড 1:2 স্টোইচিওমেট্রিক অনুপাতে DMPD এর সাথে বিক্রিয়া করে ডাই MB তৈরি করে, যা 670 nm40,41 এ বর্ণালীগতভাবে সনাক্ত করা হয়। MB পদ্ধতির সনাক্তকরণ সীমা প্রায় 1 μM11।
এই গবেষণায়, প্রতিটি নমুনার (দ্রবণ বা সিরাম) ১০০ μL একটি টিউবে যোগ করা হয়েছিল; তারপর ২০০ μL জিঙ্ক অ্যাসিটেট (পাতিত জলে ১% w/v), ১০০ μL DMPD (৭.২ M HCl-এ ২০ mM), এবং ১৩৩ μL FeCl3 (১.২ M HCl-এ ৩০ mM) যোগ করা হয়েছিল। মিশ্রণটি ৩৭°C তাপমাত্রায় ৩০ মিনিটের জন্য অন্ধকারে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। দ্রবণটি ১০,০০০ গ্রাম তাপমাত্রায় ১০ মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (বায়োটেক, MQX2000R2, উইনোস্কি, VT, USA) ব্যবহার করে সুপারনেট্যান্টের শোষণ ৬৭০ nm-এ পড়া হয়েছিল। সালফাইডের ঘনত্ব ddH2O-তে NaHS (০-১০০ μM) এর একটি ক্যালিব্রেশন বক্ররেখা ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র ২)। পরিমাপের জন্য ব্যবহৃত সমস্ত দ্রবণ নতুনভাবে প্রস্তুত করা হয়েছিল। সালফাইড পরিমাপের জন্য আন্তঃপরীক্ষা এবং আন্তঃপরীক্ষা সহগ যথাক্রমে 2.8% এবং 3.4% ছিল। আমরা ফোর্টিফাইড নমুনা পদ্ধতি ব্যবহার করে সোডিয়াম থায়োসালফেট-ধারণকারী পানীয় জল এবং সিরাম নমুনা থেকে প্রাপ্ত মোট সালফাইডও নির্ধারণ করেছি। সোডিয়াম থায়োসালফেট-ধারণকারী পানীয় জল এবং সিরাম নমুনার জন্য পুনরুদ্ধার যথাক্রমে 91 ± 1.1% (n = 6) এবং 93 ± 2.4% (n = 6) ছিল।
পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণটি উইন্ডোজের জন্য গ্রাফপ্যাড প্রিজম সফ্টওয়্যার সংস্করণ 8.0.2 (গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার, সান ডিয়েগো, সিএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র, www.graphpad.com) ব্যবহার করে করা হয়েছিল। NaHS সংযোজনের আগে এবং পরে পানীয় জলের তাপমাত্রা এবং pH তুলনা করার জন্য একটি জোড়া টি-পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছিল। NaHS-ধারণকারী দ্রবণে H2S এর ক্ষতি বেসলাইন গ্রহণের শতাংশ হ্রাস হিসাবে গণনা করা হয়েছিল এবং ক্ষতি পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ কিনা তা মূল্যায়ন করার জন্য, আমরা একটি একমুখী পুনরাবৃত্তি-পরিমাপ ANOVA সম্পাদন করেছি এবং তারপরে Dunnett-এর একাধিক তুলনামূলক পরীক্ষা করেছি। সময়ের সাথে সাথে শরীরের ওজন, সিরাম ইউরিয়া, সিরাম ক্রিয়েটিনিন এবং মোট সিরাম সালফাইড নিয়ন্ত্রণ এবং NaHS-চিকিত্সা করা বিভিন্ন লিঙ্গের ইঁদুরের মধ্যে দ্বিমুখী মিশ্র (মধ্যে-ভিতরে) ANOVA ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছিল এবং তারপরে একটি বনফেরোনি পোস্ট হক পরীক্ষা করা হয়েছিল। দ্বি-লেজযুক্ত P মান < 0.05 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল।
NaHS যোগ করার আগে পানীয় জলের pH ছিল 7.60 ± 0.01 এবং NaHS যোগ করার পরে 7.71 ± 0.03 (n = 13, p = 0.0029)। পানীয় জলের তাপমাত্রা ছিল 26.5 ± 0.2 এবং NaHS যোগ করার পরে 26.2 ± 0.2 এ কমে যায় (n = 13, p = 0.0128)। পানীয় জলে 30 μM NaHS দ্রবণ প্রস্তুত করুন এবং এটি একটি জলের বোতলে সংরক্ষণ করুন। NaHS দ্রবণ অস্থির এবং সময়ের সাথে সাথে এর ঘনত্ব হ্রাস পায়। জলের বোতলের ঘাড় থেকে নমুনা নেওয়ার সময়, প্রথম ঘন্টার মধ্যে একটি উল্লেখযোগ্য হ্রাস (68.0%) পরিলক্ষিত হয়েছিল এবং দ্রবণে NaHS এর পরিমাণ যথাক্রমে 12 এবং 24 ঘন্টা পরে 72% এবং 75% হ্রাস পেয়েছে। পানির বোতল থেকে প্রাপ্ত নমুনাগুলিতে, NaHS-এর হ্রাস 2 ঘন্টা পর্যন্ত উল্লেখযোগ্য ছিল না, তবে 12 এবং 24 ঘন্টা পরে এটি যথাক্রমে 47% এবং 72% হ্রাস পেয়েছে। এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে পানীয় জলে প্রস্তুত 30 μM দ্রবণে NaHS-এর শতাংশ 24 ঘন্টা পরে প্রাথমিক মানের প্রায় এক-চতুর্থাংশে হ্রাস পেয়েছে, নমুনার অবস্থান নির্বিশেষে (চিত্র 1)।
ইঁদুর/ইঁদুরের বোতলে পানীয় জলে NaHS দ্রবণের স্থিতিশীলতা (30 μM)। দ্রবণ তৈরির পর, পানির বোতলের ডগা এবং ভেতরের দিক থেকে নমুনা নেওয়া হয়েছিল। তথ্য গড় ± SD (n = 6/গ্রুপ) হিসাবে উপস্থাপন করা হয়েছে। * এবং #, P < 0.05 সময় 0 এর সাথে তুলনা করা হয়েছে। পানির বোতলের ছবিতে ডগা (খোলা সহ) এবং বোতলের বডি দেখানো হয়েছে। ডগার আয়তন প্রায় 740 μL।
সদ্য প্রস্তুত 30 μM দ্রবণে NaHS এর ঘনত্ব ছিল 30.3 ± 0.4 μM (পরিসীমা: 28.7–31.9 μM, n = 12)। তবে, 24 ঘন্টা পরে, NaHS এর ঘনত্ব কম মান (গড়: 3.0 ± 0.6 μM) এ হ্রাস পায়। চিত্র 2-তে দেখানো হয়েছে, গবেষণার সময়কালে ইঁদুরগুলি যে NaHS এর সংস্পর্শে এসেছিল তা স্থির ছিল না।
সময়ের সাথে সাথে স্ত্রী ইঁদুরের শরীরের ওজন উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে ২০৫.২ ± ৫.২ গ্রাম থেকে ২১৩.৮ ± ৭.০ গ্রাম এবং NaHS-চিকিৎসা করা গ্রুপে ২০৪.০ ± ৮.৬ গ্রাম থেকে ২১১.৮ ± ৭.৫ গ্রাম); তবে, NaHS চিকিৎসা শরীরের ওজনের উপর কোন প্রভাব ফেলেনি (চিত্র ৩)। সময়ের সাথে সাথে পুরুষ ইঁদুরের শরীরের ওজন উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে ৩৩৮.৬ ± ৮.৩ গ্রাম থেকে ৩৫২.৪ ± ৬.০ গ্রাম এবং NaHS-চিকিৎসা করা গ্রুপে ৩৫২.৪ ± ৫.৯ গ্রাম থেকে ৩৬৩.২ ± ৪.৩ গ্রাম); তবে, NaHS চিকিৎসা শরীরের ওজনের উপর কোন প্রভাব ফেলেনি (চিত্র ৩)।
NaHS (30 μM) প্রয়োগের পর স্ত্রী ও পুরুষ ইঁদুরের শরীরের ওজনে পরিবর্তন। তথ্যগুলি গড় ± SEM হিসাবে উপস্থাপন করা হয়েছে এবং বনফেরোনি পোস্টহক পরীক্ষার সাথে বৈচিত্র্যের দ্বি-মুখী মিশ্র (মাঝখানে) বিশ্লেষণ ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছে। প্রতিটি গ্রুপে প্রতিটি লিঙ্গের n = 5।
সমগ্র গবেষণা জুড়ে নিয়ন্ত্রণ এবং NaSH-চিকিৎসা করা ইঁদুরের ক্ষেত্রে সিরাম ইউরিয়া এবং ক্রিয়েটিন ফসফেটের ঘনত্ব তুলনামূলক ছিল। অধিকন্তু, NaSH চিকিত্সা সিরাম ইউরিয়া এবং ক্রিয়েটিনক্রোম ঘনত্বকে প্রভাবিত করেনি (সারণী 1)।
নিয়ন্ত্রণ এবং NaHS-চিকিৎসা করা পুরুষ (8.1 ± 0.5 μM বনাম 9.3 ± 0.2 μM) এবং মহিলা (9.1 ± 1.0 μM বনাম 6.1 ± 1.1 μM) ইঁদুরের মধ্যে বেসলাইন সিরাম মোট সালফাইড ঘনত্ব তুলনীয় ছিল। 14 দিন ধরে NaHS প্রশাসন পুরুষ বা মহিলা ইঁদুরের মধ্যে সিরাম মোট সালফাইড স্তরের উপর কোনও প্রভাব ফেলেনি (চিত্র 4)।
NaHS (30 μM) প্রয়োগের পর পুরুষ ও মহিলা ইঁদুরের সিরাম মোট সালফাইড ঘনত্বের পরিবর্তন। তথ্যগুলি গড় ± SEM হিসাবে উপস্থাপন করা হয়েছে এবং বনফেরোনি পোস্টহক পরীক্ষার সাথে বৈচিত্র্যের দ্বি-মুখী মিশ্র (অভ্যন্তরীণ) বিশ্লেষণ ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছে। প্রতিটি লিঙ্গ, n = 5/গ্রুপ।
এই গবেষণার মূল উপসংহার হল যে NaHS যুক্ত পানীয় জল অস্থির: ইঁদুর/ইঁদুরের পানির বোতলের ডগা এবং ভেতর থেকে নমুনা নেওয়ার 24 ঘন্টা পরে প্রাথমিক মোট সালফাইডের মাত্র এক-চতুর্থাংশ সনাক্ত করা যায়। অধিকন্তু, NaHS দ্রবণে H2S হ্রাসের কারণে ইঁদুরগুলি অস্থির NaHS ঘনত্বের সংস্পর্শে এসেছিল এবং পানীয় জলে NaHS যোগ করার ফলে শরীরের ওজন, সিরাম ইউরিয়া এবং ক্রিয়েটিন ক্রোমিয়াম বা মোট সিরাম সালফাইডের উপর কোনও প্রভাব পড়েনি।
এই গবেষণায়, পানীয় জলে প্রস্তুত 30 μM NaHS দ্রবণ থেকে H2S ক্ষতির হার প্রতি ঘন্টায় প্রায় 3% ছিল। একটি বাফার দ্রবণে (10 mM PBS-এ 100 μM সোডিয়াম সালফাইড, pH 7.4), সালফাইডের ঘনত্ব 8 h11-এর তুলনায় সময়ের সাথে সাথে 7% হ্রাস পেয়েছে বলে জানা গেছে। আমরা পূর্বে NaHS-এর ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল প্রশাসনকে সমর্থন করে বলেছি যে পানীয় জলে 54 μM NaHS দ্রবণ থেকে সালফাইড ক্ষতির হার প্রতি ঘন্টায় প্রায় 2.3% ছিল (প্রথম 12 ঘন্টায় 4%/ঘন্টা এবং প্রস্তুতির পর শেষ 12 ঘন্টায় 1.4%/ঘন্টা)। পূর্ববর্তী গবেষণায়43 NaHS দ্রবণ থেকে H2S এর ধ্রুবক ক্ষতি পাওয়া গেছে, মূলত উদ্বায়ীকরণ এবং জারণের কারণে। এমনকি বুদবুদ যোগ না করেও, H2S উদ্বায়ীকরণের কারণে স্টক দ্রবণে সালফাইড দ্রুত নষ্ট হয়ে যায়11। গবেষণায় দেখা গেছে যে তরলীকরণ প্রক্রিয়ার সময়, যা প্রায় 30-60 সেকেন্ড সময় নেয়, বাষ্পীভবনের কারণে প্রায় 5-10% H2S নষ্ট হয়ে যায়। দ্রবণ থেকে H2S এর বাষ্পীভবন রোধ করার জন্য, গবেষকরা বেশ কয়েকটি ব্যবস্থা গ্রহণ করেছেন, যার মধ্যে রয়েছে দ্রবণটি মৃদুভাবে নাড়ানো12, প্লাস্টিক ফিল্ম দিয়ে স্টক দ্রবণটি ঢেকে দেওয়া6 এবং বাতাসে দ্রবণের এক্সপোজার কমানো, কারণ H2S বাষ্পীভবনের হার বায়ু-তরল ইন্টারফেসের উপর নির্ভর করে।13 H2S এর স্বতঃস্ফূর্ত জারণ মূলত ট্রানজিশন ধাতু আয়ন, বিশেষ করে ফেরিক আয়রনের কারণে ঘটে, যা জলে অমেধ্য।13 H2S এর জারণ পলিসালফাইড (সমযোজী বন্ধন দ্বারা সংযুক্ত সালফার পরমাণু) তৈরি করে11। এর জারণ এড়াতে, H2S ধারণকারী দ্রবণগুলি অক্সিজেনবিহীন দ্রাবকগুলিতে প্রস্তুত করা হয়44,45 এবং তারপর আর্গন বা নাইট্রোজেন দিয়ে 20-30 মিনিটের জন্য শুদ্ধ করা হয় যাতে অক্সিজেনবিহীনতা নিশ্চিত করা যায়।11,12,37,44,45,46 ডাইথাইলেনেট্রিয়ামিনপেন্টাসেটিক অ্যাসিড (DTPA) হল একটি ধাতব চেলেটর (10-4 M) যা বায়বীয় দ্রবণে HS- এর অটোক্সিডেশন প্রতিরোধ করে। DTPA এর অনুপস্থিতিতে, 25°C তাপমাত্রায় প্রায় 3 ঘন্টা ধরে HS- এর অটোক্সিডেশন হার প্রায় 50%। অধিকন্তু, যেহেতু 1e-সালফাইডের জারণ অতিবেগুনী রশ্মি দ্বারা অনুঘটকিত হয়, তাই দ্রবণটি বরফের উপর সংরক্ষণ করা উচিত এবং আলো থেকে রক্ষা করা উচিত11।
চিত্র ৫-এ দেখানো হয়েছে, পানিতে দ্রবীভূত হলে NaHS Na+ এবং HS-6-এ বিয়োজিত হয়; এই বিয়োগফল বিক্রিয়ার pK1 দ্বারা নির্ধারিত হয়, যা তাপমাত্রা নির্ভর: pK1 = 3.122 + 1132/T, যেখানে T 5 থেকে 30°C পর্যন্ত এবং কেলভিন (K), K = °C + 273.1548 ডিগ্রিতে পরিমাপ করা হয়। HS- এর উচ্চ pK2 (pK2 = 19) থাকে, তাই pH < 96.49 এ, S2- গঠিত হয় না বা খুব কম পরিমাণে গঠিত হয়। বিপরীতে, HS- একটি ক্ষার হিসাবে কাজ করে এবং একটি H2O অণু থেকে H+ গ্রহণ করে, এবং H2O একটি অ্যাসিড হিসাবে কাজ করে এবং H2S এবং OH- তে রূপান্তরিত হয়।
NaHS দ্রবণে (30 µM) দ্রবীভূত H2S গ্যাসের গঠন। aq, জলীয় দ্রবণ; g, গ্যাস; l, তরল। সমস্ত গণনা ধরে নেয় যে জলের pH = 7.0 এবং জলের তাপমাত্রা = 20 °C। BioRender.com দিয়ে তৈরি।
NaHS দ্রবণ অস্থির হওয়ার প্রমাণ থাকা সত্ত্বেও, বেশ কয়েকটি প্রাণী গবেষণায় পানীয় জলে NaHS দ্রবণকে H2S দাতা যৌগ হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছে15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 যার হস্তক্ষেপের সময়কাল 1 থেকে 21 সপ্তাহ (সারণী 2)। এই গবেষণার সময়, NaHS দ্রবণটি প্রতি 12 ঘন্টা, 15, 17, 18, 24, 25 ঘন্টা বা 24 ঘন্টা, 19, 20, 21, 22, 23 ঘন্টা অন্তর পুনর্নবীকরণ করা হয়েছিল। আমাদের ফলাফলে দেখা গেছে যে NaHS দ্রবণ থেকে H2S হ্রাসের কারণে ইঁদুরগুলি অস্থির ওষুধের ঘনত্বের সংস্পর্শে এসেছিল এবং ইঁদুরের পানীয় জলে NaHS এর পরিমাণ 12 বা 24 ঘন্টার মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে ওঠানামা করেছিল (চিত্র 2 দেখুন)। এই দুটি গবেষণায় দেখা গেছে যে ২৪ ঘন্টা ধরে পানিতে H2S এর মাত্রা স্থিতিশীল ছিল অথবা ১২ ঘন্টা ধরে মাত্র ২-৩% H2S এর ক্ষতি লক্ষ্য করা গেছে, কিন্তু তারা কোনও সহায়ক তথ্য বা পরিমাপের বিবরণ প্রদান করেনি। দুটি গবেষণায় দেখা গেছে যে জলের বোতলের ছোট ব্যাস H2S বাষ্পীভবন কমাতে পারে15,19। যাইহোক, আমাদের ফলাফল দেখিয়েছে যে এটি জলের বোতল থেকে H2S এর ক্ষতি ১২-২৪ ঘন্টার পরিবর্তে কেবল ২ ঘন্টা বিলম্বিত করতে পারে। উভয় গবেষণায়ই উল্লেখ করা হয়েছে যে আমরা ধরে নিই যে পানীয় জলে NaHS এর মাত্রা পরিবর্তিত হয়নি কারণ আমরা জলে রঙের পরিবর্তন লক্ষ্য করিনি; অতএব, বায়ু দ্বারা H2S এর জারণ উল্লেখযোগ্য ছিল না19,20। আশ্চর্যজনকভাবে, এই বিষয়গত পদ্ধতিটি সময়ের সাথে সাথে এর ঘনত্বের পরিবর্তন পরিমাপ করার পরিবর্তে জলে NaHS এর স্থায়িত্ব মূল্যায়ন করে।
NaHS দ্রবণে H2S এর ক্ষতি pH এবং তাপমাত্রার সাথে সম্পর্কিত। আমাদের গবেষণায় যেমন উল্লেখ করা হয়েছে, পানিতে NaHS দ্রবীভূত করার ফলে একটি ক্ষারীয় দ্রবণ তৈরি হয়50। যখন NaHS পানিতে দ্রবীভূত হয়, তখন দ্রবীভূত H2S গ্যাসের গঠন pH মানের উপর নির্ভর করে6। দ্রবণের pH যত কম হবে, H2S গ্যাসের অণু হিসাবে উপস্থিত NaHS এর অনুপাত তত বেশি হবে এবং জলীয় দ্রবণ থেকে সালফাইড তত বেশি ক্ষয় হবে11। এই গবেষণাগুলির কোনওটিই NaHS এর দ্রাবক হিসাবে ব্যবহৃত পানীয় জলের pH রিপোর্ট করেনি। WHO সুপারিশ অনুসারে, যা বেশিরভাগ দেশ দ্বারা গৃহীত হয়, পানীয় জলের pH 6.5–8.551 এর মধ্যে হওয়া উচিত। এই pH পরিসরে, H2S এর স্বতঃস্ফূর্ত জারণের হার প্রায় দশগুণ বৃদ্ধি পায়13। এই pH পরিসরে পানিতে NaHS দ্রবীভূত করার ফলে দ্রবীভূত H2S গ্যাসের ঘনত্ব 1 থেকে 22.5 μM হবে, যা NaHS দ্রবীভূত করার আগে পানির pH পর্যবেক্ষণের গুরুত্বকে জোর দেয়। উপরন্তু, উপরোক্ত গবেষণায় উল্লিখিত তাপমাত্রার পরিসর (১৮-২৬ °সে) দ্রবণে দ্রবীভূত H2S গ্যাসের ঘনত্বের প্রায় ১০% পরিবর্তন ঘটাবে, কারণ তাপমাত্রার পরিবর্তন pK1 কে পরিবর্তন করে, এবং pK1 এর ছোট পরিবর্তন দ্রবীভূত H2S গ্যাসের ঘনত্বের উপর উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলতে পারে48। এছাড়াও, কিছু গবেষণার দীর্ঘ সময়কাল (৫ মাস)22, যার সময়কালে তাপমাত্রার ব্যাপক পরিবর্তনশীলতা প্রত্যাশিত, এই সমস্যাটিকে আরও বাড়িয়ে তোলে।
এক২১ ব্যতীত সকল গবেষণায় পানীয় জলে ৩০ μM NaHS দ্রবণ ব্যবহার করা হয়েছে। ব্যবহৃত ডোজ (অর্থাৎ ৩০ μM) ব্যাখ্যা করার জন্য, কিছু লেখক উল্লেখ করেছেন যে জলীয় পর্যায়ে NaHS ঠিক একই ঘনত্ব H2S গ্যাস তৈরি করে এবং H2S এর শারীরবৃত্তীয় পরিসর ১০ থেকে ১০০ μM, তাই এই ডোজটি শারীরবৃত্তীয় পরিসরের মধ্যে ১৫,১৬। অন্যরা ব্যাখ্যা করেছেন যে ৩০ μM NaHS প্লাজমা H2S স্তরকে শারীরবৃত্তীয় পরিসরের মধ্যে, অর্থাৎ ৫-৩০০ μM ১৯,২০ বজায় রাখতে পারে। আমরা ৩০ μM (pH = ৭.০, T = ২০ °C) জলে NaHS এর ঘনত্ব বিবেচনা করি, যা কিছু গবেষণায় H2S এর প্রভাব অধ্যয়নের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। আমরা গণনা করতে পারি যে দ্রবীভূত H2S গ্যাসের ঘনত্ব ১৪.৭ μM, যা প্রাথমিক NaHS ঘনত্বের প্রায় ৫০%। এই মানটি একই অবস্থার অধীনে অন্যান্য লেখকদের দ্বারা গণনা করা মানের অনুরূপ। ১৩,৪৮।
আমাদের গবেষণায়, NaHS প্রয়োগ শরীরের ওজন পরিবর্তন করেনি; এই ফলাফল পুরুষ ইঁদুর 22,23 এবং পুরুষ ইঁদুর 18 এর উপর অন্যান্য গবেষণার ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ; তবে, দুটি গবেষণায় জানা গেছে যে NaSH নেফ্রেকটোমাইজড ইঁদুর 24,26 এর হ্রাসপ্রাপ্ত শরীরের ওজন পুনরুদ্ধার করেছে, যেখানে অন্যান্য গবেষণায় NaSH প্রয়োগ শরীরের ওজনের উপর প্রভাব রিপোর্ট করা হয়নি 15,16,17,19,20,21,25। অধিকন্তু, আমাদের গবেষণায়, NaSH প্রয়োগ সিরাম ইউরিয়া এবং ক্রিয়েটিন ক্রোমিয়াম স্তরকে প্রভাবিত করেনি, যা অন্য একটি প্রতিবেদন 25 এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।
গবেষণায় দেখা গেছে যে ২ সপ্তাহ ধরে পানীয় জলে NaHS যোগ করলে পুরুষ এবং মহিলা ইঁদুরের মোট সিরাম সালফাইড ঘনত্ব প্রভাবিত হয়নি। এই ফলাফল সেন এট আল-এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। (১৬): পানীয় জলে 30 μM NaHS দিয়ে 8 সপ্তাহের চিকিৎসা নিয়ন্ত্রণ ইঁদুরের প্লাজমা সালফাইডের মাত্রা প্রভাবিত করেনি; তবে, তারা রিপোর্ট করেছেন যে এই হস্তক্ষেপ নেফ্রেক্টোমাইজড ইঁদুরের প্লাজমায় হ্রাসপ্রাপ্ত H2S মাত্রা পুনরুদ্ধার করেছে। লি এট আল-(২২) আরও জানিয়েছেন যে 5 মাস ধরে পানীয় জলে 30 μM NaHS দিয়ে চিকিৎসা করলে বয়স্ক ইঁদুরের প্লাজমা মুক্ত সালফাইডের মাত্রা প্রায় 26% বৃদ্ধি পেয়েছে। অন্যান্য গবেষণায় পানীয় জলে NaHS যোগ করার পরে সঞ্চালিত সালফাইডের পরিবর্তনের খবর পাওয়া যায়নি।
সাতটি গবেষণায় সিগমা NaHS15,16,19,20,21,22,23 ব্যবহার করে রিপোর্ট করা হয়েছে কিন্তু হাইড্রেশনের জল সম্পর্কে আরও বিশদ বিবরণ দেওয়া হয়নি, এবং পাঁচটি গবেষণায় তাদের প্রস্তুতি পদ্ধতিতে ব্যবহৃত NaHS এর উৎস উল্লেখ করা হয়নি17,18,24,25,26। NaHS একটি হাইড্রেটেড অণু এবং এর হাইড্রেশনের জলের পরিমাণ পরিবর্তিত হতে পারে, যা একটি নির্দিষ্ট মোলারিটির দ্রবণ প্রস্তুত করতে প্রয়োজনীয় NaHS এর পরিমাণকে প্রভাবিত করে। উদাহরণস্বরূপ, আমাদের গবেষণায় NaHS এর পরিমাণ ছিল NaHS•1.3 H2O। সুতরাং, এই গবেষণায় প্রকৃত NaHS ঘনত্ব রিপোর্ট করা তুলনায় কম হতে পারে।
"এইরকম একটি স্বল্পস্থায়ী যৌগ কীভাবে এত দীর্ঘস্থায়ী প্রভাব ফেলতে পারে?" পোজগে এট আল.21 ইঁদুরের কোলাইটিসের উপর NaHS এর প্রভাব মূল্যায়ন করার সময় এই প্রশ্নটি করেছিলেন। তারা আশা করেন যে ভবিষ্যতের গবেষণাগুলি এই প্রশ্নের উত্তর দিতে সক্ষম হবে এবং অনুমান করবে যে NaHS দ্রবণগুলিতে H2S এবং ডাইসালফাইড ছাড়াও আরও স্থিতিশীল পলিসালফাইড থাকতে পারে যা NaHS21 এর প্রভাবকে মধ্যস্থতা করে। আরেকটি সম্ভাবনা হল যে দ্রবণে থাকা NaHS এর খুব কম ঘনত্বও একটি উপকারী প্রভাব ফেলতে পারে। প্রকৃতপক্ষে, ওলসন এট আল. প্রমাণ দিয়েছেন যে রক্তে H2S এর মাইক্রোমোলার স্তর শারীরবৃত্তীয় নয় এবং ন্যানোমোলার পরিসরে থাকা উচিত অথবা সম্পূর্ণরূপে অনুপস্থিত থাকা উচিত। H2S প্রোটিন সালফেশনের মাধ্যমে কাজ করতে পারে, একটি বিপরীতমুখী পোস্ট-ট্রান্সলেশনাল পরিবর্তন যা অনেক প্রোটিনের কার্যকারিতা, স্থিতিশীলতা এবং স্থানীয়করণকে প্রভাবিত করে52,53,54। প্রকৃতপক্ষে, শারীরবৃত্তীয় পরিস্থিতিতে, অনেক লিভার প্রোটিনের প্রায় 10% থেকে 25% সালফাইলেটেড53। উভয় গবেষণায়ই NaHS19,23 এর দ্রুত ধ্বংস স্বীকার করা হয়েছে কিন্তু আশ্চর্যজনকভাবে বলা হয়েছে যে "আমরা প্রতিদিন এটি প্রতিস্থাপন করে পানীয় জলে NaHS এর ঘনত্ব নিয়ন্ত্রণ করেছি।"23 একটি গবেষণায় দুর্ঘটনাক্রমে বলা হয়েছে যে "NaHS একটি আদর্শ H2S দাতা এবং সাধারণত ক্লিনিকাল অনুশীলনে H2S প্রতিস্থাপনের জন্য ব্যবহৃত হয়।"18
উপরের আলোচনা থেকে দেখা যায় যে, NaHS দ্রবণ থেকে উদ্বায়ীকরণ, জারণ এবং আলোক বিশ্লেষণের মাধ্যমে হারিয়ে যায়, এবং তাই দ্রবণ থেকে H2S এর ক্ষতি কমানোর জন্য কিছু পরামর্শ দেওয়া হল। প্রথমত, H2S এর বাষ্পীভবন গ্যাস-তরল ইন্টারফেস13 এবং দ্রবণের pH11 এর উপর নির্ভর করে; অতএব, বাষ্পীভবনের ক্ষতি কমাতে, পূর্বে বর্ণিত হিসাবে জলের বোতলের ঘাড় যতটা সম্ভব ছোট করা যেতে পারে15,19, এবং বাষ্পীভবনের ক্ষতি কমাতে জলের pH একটি গ্রহণযোগ্য ঊর্ধ্ব সীমাতে (অর্থাৎ, 6.5–8.551) সামঞ্জস্য করা যেতে পারে11। দ্বিতীয়ত, অক্সিজেনের প্রভাব এবং পানীয় জলে ট্রানজিশন ধাতু আয়নের উপস্থিতির কারণে H2S এর স্বতঃস্ফূর্ত জারণ ঘটে13, তাই আর্গন বা নাইট্রোজেন দিয়ে পানীয় জলের অক্সিজেনেশন44,45 এবং ধাতব চেলেটর37,47 ব্যবহার সালফাইডের জারণ কমাতে পারে। তৃতীয়ত, H2S এর আলোক পচন রোধ করার জন্য, জলের বোতলগুলি অ্যালুমিনিয়াম ফয়েল দিয়ে মুড়িয়ে রাখা যেতে পারে; এই পদ্ধতিটি স্ট্রেপ্টোজোটোসিনের মতো আলো-সংবেদনশীল পদার্থের ক্ষেত্রেও প্রযোজ্য। পরিশেষে, অজৈব সালফাইড লবণ (NaHS, Na2S, এবং CaS) পানীয় জলে দ্রবীভূত না করে গ্যাভেজের মাধ্যমে দেওয়া যেতে পারে, যেমনটি পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছিল56,57,58; গবেষণায় দেখা গেছে যে গ্যাভেজের মাধ্যমে ইঁদুরকে দেওয়া তেজস্ক্রিয় সোডিয়াম সালফাইড ভালভাবে শোষিত হয় এবং কার্যত সমস্ত টিস্যুতে বিতরণ করা হয়59। আজ অবধি, বেশিরভাগ গবেষণায় অজৈব সালফাইড লবণগুলি ইন্ট্রাপেরিটোনলি প্রয়োগ করা হয়েছে; তবে, ক্লিনিকাল সেটিংসে এই পথটি খুব কমই ব্যবহৃত হয়60। অন্যদিকে, মৌখিক পথটি মানুষের মধ্যে প্রশাসনের সবচেয়ে সাধারণ এবং পছন্দের পথ61। অতএব, আমরা মৌখিক পথ দ্বারা ইঁদুরের উপর H2S দাতাদের প্রভাব মূল্যায়ন করার পরামর্শ দিই।
একটি সীমাবদ্ধতা হল আমরা MB পদ্ধতি ব্যবহার করে জলীয় দ্রবণ এবং সিরামে সালফাইড পরিমাপ করেছি। সালফাইড পরিমাপের পদ্ধতিগুলির মধ্যে রয়েছে আয়োডিন টাইট্রেশন, স্পেকট্রোফটোমেট্রি, ইলেক্ট্রোকেমিক্যাল পদ্ধতি (পোটেনশিওমেট্রি, অ্যাম্পেরোমেট্রি, কুলোমেট্রিক পদ্ধতি এবং অ্যাম্পেরোমেট্রিক পদ্ধতি) এবং ক্রোমাটোগ্রাফি (গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি এবং উচ্চ-কার্যক্ষমতাসম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি), যার মধ্যে সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত পদ্ধতি হল MB স্পেকট্রোফটোমেট্রিক পদ্ধতি62। জৈবিক নমুনায় H2S পরিমাপের জন্য MB পদ্ধতির একটি সীমাবদ্ধতা হল এটি সমস্ত সালফারযুক্ত যৌগ পরিমাপ করে এবং মুক্ত H2S63 নয় কারণ এটি অ্যাসিডিক পরিস্থিতিতে সঞ্চালিত হয়, যার ফলে জৈবিক উৎস থেকে সালফার নিষ্কাশন হয়64। তবে, আমেরিকান পাবলিক হেলথ অ্যাসোসিয়েশনের মতে, MB হল পানিতে সালফাইড পরিমাপের জন্য আদর্শ পদ্ধতি65। অতএব, এই সীমাবদ্ধতা NaHS ধারণকারী দ্রবণের অস্থিরতার উপর আমাদের প্রধান ফলাফলকে প্রভাবিত করে না। তদুপরি, আমাদের গবেষণায়, জলে সালফাইড পরিমাপ এবং NaHS ধারণকারী সিরাম নমুনায় সালফাইড পরিমাপের পুনরুদ্ধার যথাক্রমে 91% এবং 93% ছিল। এই মানগুলি পূর্বে রিপোর্ট করা রেঞ্জ (77-92)66 এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, যা গ্রহণযোগ্য বিশ্লেষণাত্মক নির্ভুলতা নির্দেশ করে42। এটি লক্ষণীয় যে আমরা ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হেলথ (NIH) নির্দেশিকা অনুসারে পুরুষ এবং মহিলা উভয় ইঁদুর ব্যবহার করেছি যাতে প্রি-ক্লিনিক্যাল স্টাডিতে পুরুষ-কেবল প্রাণীর উপর অতিরিক্ত নির্ভরতা এড়ানো যায়67 এবং যখনই সম্ভব পুরুষ এবং মহিলা উভয় ইঁদুরকেই অন্তর্ভুক্ত করা যায়68। এই বিষয়টি অন্যরা জোর দিয়েছেন69,70,71।
উপসংহারে, এই গবেষণার ফলাফল ইঙ্গিত দেয় যে পানীয় জল থেকে প্রস্তুত NaHS দ্রবণগুলি তাদের অস্থিরতার কারণে H2S তৈরি করতে ব্যবহার করা যায় না। প্রশাসনের এই পদ্ধতি প্রাণীদের NaHS এর অস্থির এবং প্রত্যাশিত স্তরের চেয়ে কম মাত্রার মুখোমুখি করবে; তাই, ফলাফলগুলি মানুষের ক্ষেত্রে প্রযোজ্য নাও হতে পারে।
বর্তমান গবেষণায় ব্যবহৃত এবং/অথবা বিশ্লেষণ করা ডেটাসেটগুলি যুক্তিসঙ্গত অনুরোধের ভিত্তিতে সংশ্লিষ্ট লেখকের কাছ থেকে পাওয়া যাবে।
সাজাবো, কে. হাইড্রোজেন সালফাইড (H2S) গবেষণার সময়রেখা: পরিবেশগত বিষ থেকে জৈবিক মধ্যস্থতাকারী। জৈব রসায়ন এবং ফার্মাকোলজি 149, 5–19। https://doi.org/10.1016/j.bcp.2017.09.010 (2018)।
আবে, কে. এবং কিমুরা, এইচ. একটি অন্তঃসত্ত্বা নিউরোমডুলেটর হিসেবে হাইড্রোজেন সালফাইডের সম্ভাব্য ভূমিকা। জার্নাল অফ নিউরোসায়েন্স, 16, 1066–1071। https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.16-03-01066.1996 (1996)।
চিরিনো, জি., সাজাবো, সি. এবং পাপাপেট্রোপোলোস, এ. স্তন্যপায়ী কোষ, টিস্যু এবং অঙ্গগুলিতে হাইড্রোজেন সালফাইডের শারীরবৃত্তীয় ভূমিকা। ফিজিওলজি এবং আণবিক জীববিজ্ঞানের পর্যালোচনা 103, 31–276। https://doi.org/10.1152/physrev.00028.2021 (2023)।
ডিলন, কেএম, ক্যারাজোন, আরজে, ম্যাটসন, জেবি, এবং কাশফি, কে। নাইট্রিক অক্সাইড এবং হাইড্রোজেন সালফাইডের জন্য সেলুলার ডেলিভারি সিস্টেমের বিকশিত প্রতিশ্রুতি: ব্যক্তিগতকৃত ঔষধের একটি নতুন যুগ। জৈব রসায়ন এবং ফার্মাকোলজি 176, 113931। https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113931 (2020)।
সান, এক্স., প্রমুখ। ধীর-নিঃসরণকারী হাইড্রোজেন সালফাইড দাতা দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহার মায়োকার্ডিয়াল ইস্কেমিয়া/রিপারফিউশন আঘাত প্রতিরোধ করতে পারে। বৈজ্ঞানিক প্রতিবেদন 7, 3541। https://doi.org/10.1038/s41598-017-03941-0 (2017)।
সিটডিকোভা, জিএফ, ফুচস, আর., কাইঞ্জ, ডব্লিউ., ওয়েইগার, টিএম এবং হারম্যান, এ. বিকে চ্যানেল ফসফোরাইলেশন হাইড্রোজেন সালফাইড (H2S) সংবেদনশীলতা নিয়ন্ত্রণ করে। ফ্রন্টিয়ার্স ইন ফিজিওলজি 5, 431। https://doi.org/10.3389/fphys.2014.00431 (2014)।
সিটডিকোভা, জিএফ, ওয়েইগার, টিএম এবং হারম্যান, এ। হাইড্রোজেন সালফাইড ইঁদুরের পিটুইটারি টিউমার কোষে ক্যালসিয়াম-সক্রিয় পটাসিয়াম (বিকে) চ্যানেলের কার্যকলাপ বৃদ্ধি করে। আর্কিট। ফ্লুয়েজার্স। 459, 389–397। https://doi.org/10.1007/s00424-009-0737-0 (2010)।
জেডি, এস., প্রমুখ। হাইড্রোজেন সালফাইড টাইপ 2 ডায়াবেটিক ইঁদুরের মায়োকার্ডিয়াল ইস্কেমিয়া-রিপারফিউশন আঘাতের বিরুদ্ধে নাইট্রাইটের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব বাড়ায়। নাইট্রিক অক্সাইড 124, 15–23। https://doi.org/10.1016/j.niox.2022.04.004 (2022)।
করভিনো, এ., প্রমুখ। H2S দাতা রসায়নের প্রবণতা এবং হৃদরোগের উপর এর প্রভাব। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট 10, 429। https://doi.org/10.3390/antiox10030429 (2021)।
ডিলিওন, ইআর, স্টয়, জিএফ, এবং ওলসন, কেআর (২০১২)। জৈবিক পরীক্ষায় হাইড্রোজেন সালফাইডের নিষ্ক্রিয় ক্ষতি। বিশ্লেষণাত্মক জৈব রসায়ন ৪২১, ২০৩–২০৭। https://doi.org/10.1016/j.ab.2011.10.016 (২০১২)।
ন্যাগি, পি., প্রমুখ। শারীরবৃত্তীয় নমুনায় হাইড্রোজেন সালফাইড পরিমাপের রাসায়নিক দিক। বায়োচিমিকা এট বায়োফিজিক্যাল অ্যাক্টা 1840, 876–891। https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.05.037 (2014)।
ক্লাইন, এলএল.ডি. প্রাকৃতিক জলে হাইড্রোজেন সালফাইডের স্পেকট্রোফটোমেট্রিক নির্ধারণ। লিমনল। ওশেনোগ্র। ১৪, ৪৫৪–৪৫৮। https://doi.org/10.4319/lo.1969.14.3.0454 (১৯৬৯)।
ওলসন, কেআর (২০১২)। হাইড্রোজেন সালফাইডের রসায়ন এবং জীববিজ্ঞানের ব্যবহারিক প্রশিক্ষণ। "অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট।" রেডক্স সিগন্যালিং। ১৭, ৩২–৪৪। https://doi.org/10.1089/ars.2011.4401 (২০১২)।