তথ্য তত্ত্ব বিপাকের জন্য উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্বের গুরুত্বপূর্ণ ভবিষ্যদ্বাণী পরীক্ষা করে

বিভিন্ন উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্ব উদ্ভিদ বিশেষায়িত বিপাকের ধরণ ব্যাখ্যা করার জন্য গুরুত্বপূর্ণ তাত্ত্বিক দিকনির্দেশনা প্রদান করে, তবে তাদের মূল ভবিষ্যদ্বাণীগুলি পরীক্ষা করা বাকি রয়েছে। এখানে, আমরা পৃথক উদ্ভিদ থেকে জনসংখ্যা এবং ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত প্রজাতিগুলিতে তামাক ক্ষয়প্রাপ্ত স্ট্রেনের বিপাক পদ্ধতিগতভাবে অন্বেষণ করার জন্য নিরপেক্ষ ট্যান্ডেম ভর স্পেকট্রোমেট্রি (MS/MS) বিশ্লেষণ ব্যবহার করেছি এবং তথ্যে যৌগিক বর্ণালীর উপর ভিত্তি করে বিপুল সংখ্যক ভর স্পেকট্রোমেট্রিক বৈশিষ্ট্য তত্ত্ব প্রক্রিয়া করেছি। সর্বোত্তম প্রতিরক্ষা (OD) এবং চলমান লক্ষ্য (MT) তত্ত্বের মূল ভবিষ্যদ্বাণী পরীক্ষা করার জন্য কাঠামো। উদ্ভিদ বিপাকের তথ্য উপাদান OD তত্ত্বের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, তবে তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিপাকীয় গতিবিদ্যার উপর MT তত্ত্বের মূল ভবিষ্যদ্বাণীর বিরোধিতা করে। মাইক্রো থেকে ম্যাক্রো বিবর্তনীয় স্কেল পর্যন্ত, জ্যাসমোনেট সংকেতকে OD এর প্রধান নির্ধারক হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল, যেখানে ইথিলিন সংকেত MS/MS আণবিক নেটওয়ার্ক দ্বারা টীকাযুক্ত তৃণভোজী-নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়ার সূক্ষ্ম-সুরকরণ প্রদান করেছিল।
পরিবেশের সাথে উদ্ভিদের অভিযোজনে, বিশেষ করে শত্রুদের প্রতিরক্ষায় (১) প্রধান অংশগ্রহণকারী হল বিভিন্ন কাঠামোর বিশেষ বিপাক। উদ্ভিদে পাওয়া বিশেষ বিপাকের আশ্চর্যজনক বৈচিত্র্য পরিবেশগত কার্যকারিতার বিভিন্ন দিক নিয়ে কয়েক দশক ধরে গভীর গবেষণাকে উদ্দীপিত করেছে এবং উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্বের একটি দীর্ঘ তালিকা তৈরি করেছে, যা উদ্ভিদ-পোকামাকড়ের মিথস্ক্রিয়ার বিবর্তনীয় এবং পরিবেশগত বিকাশ। অভিজ্ঞতামূলক গবেষণা গুরুত্বপূর্ণ নির্দেশনা প্রদান করে (২)। যাইহোক, এই উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্বগুলি অনুমানমূলক ডিডাক্টিভ যুক্তির আদর্শিক পথ অনুসরণ করেনি, যেখানে মূল ভবিষ্যদ্বাণীগুলি বিশ্লেষণের একই স্তরে ছিল (৩) এবং তাত্ত্বিক বিকাশের পরবর্তী চক্রকে এগিয়ে নেওয়ার জন্য পরীক্ষামূলকভাবে পরীক্ষা করা হয়েছিল (৪)। প্রযুক্তিগত সীমাবদ্ধতাগুলি নির্দিষ্ট বিপাকীয় বিভাগে ডেটা সংগ্রহকে সীমাবদ্ধ করে এবং বিশেষায়িত বিপাকীয়গুলির ব্যাপক বিশ্লেষণকে বাদ দেয়, এইভাবে তাত্ত্বিক বিকাশের জন্য প্রয়োজনীয় আন্তঃ-শ্রেণী তুলনা প্রতিরোধ করে (৫)। বিস্তৃত বিপাকীয় তথ্যের অভাব এবং বিভিন্ন উদ্ভিদ গোষ্ঠীর মধ্যে বিপাকীয় স্থানের প্রক্রিয়াকরণ কর্মপ্রবাহের তুলনা করার জন্য একটি সাধারণ মুদ্রা ক্ষেত্রের বৈজ্ঞানিক পরিপক্কতাকে বাধাগ্রস্ত করে।
টেন্ডেম মাস স্পেকট্রোমেট্রি (MS/MS) বিপাকবিদ্যার ক্ষেত্রে সর্বশেষ উন্নয়নগুলি একটি নির্দিষ্ট সিস্টেম ক্লেডের প্রজাতির মধ্যে এবং এর মধ্যে বিপাকীয় পরিবর্তনগুলিকে ব্যাপকভাবে চিহ্নিত করতে পারে এবং এই জটিল মিশ্রণগুলির মধ্যে কাঠামোগত সাদৃশ্য গণনা করার জন্য গণনামূলক পদ্ধতির সাথে একত্রিত করা যেতে পারে। রসায়নের পূর্ব জ্ঞান (5)। বিশ্লেষণ এবং কম্পিউটিংয়ে উন্নত প্রযুক্তির সংমিশ্রণ বিপাকীয় বৈচিত্র্যের বাস্তুসংস্থান এবং বিবর্তনীয় তত্ত্ব দ্বারা করা অনেক ভবিষ্যদ্বাণীর দীর্ঘমেয়াদী পরীক্ষার জন্য একটি প্রয়োজনীয় কাঠামো প্রদান করে। শ্যানন (6) 1948 সালে তার মৌলিক প্রবন্ধে প্রথমবারের মতো তথ্য তত্ত্ব প্রবর্তন করেন, তথ্যের গাণিতিক বিশ্লেষণের ভিত্তি স্থাপন করেন, যা এর মূল প্রয়োগ ব্যতীত অন্যান্য অনেক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়েছে। জিনোমিক্সে, তথ্য তত্ত্ব সফলভাবে রক্ষণশীল তথ্যের ক্রম পরিমাপ করার জন্য প্রয়োগ করা হয়েছে (7)। ট্রান্সক্রিপ্টমিক্স গবেষণায়, তথ্য তত্ত্ব ট্রান্সক্রিপ্টোমের সামগ্রিক পরিবর্তনগুলি বিশ্লেষণ করে (8)। ​​পূর্ববর্তী গবেষণায়, আমরা উদ্ভিদের টিস্যু স্তরের বিপাকীয় দক্ষতা বর্ণনা করার জন্য তথ্য তত্ত্বের পরিসংখ্যানগত কাঠামো বিপাকবিদ্যায় প্রয়োগ করেছি (9)। এখানে, আমরা MS/MS-ভিত্তিক কর্মপ্রবাহকে তথ্য তত্ত্বের পরিসংখ্যানগত কাঠামোর সাথে একত্রিত করি, যা সাধারণ মুদ্রায় বিপাকীয় বৈচিত্র্য দ্বারা চিহ্নিত করা হয়, তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা প্ররোচিত বিপাকের উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্বের মূল ভবিষ্যদ্বাণীগুলির তুলনা করার জন্য।
উদ্ভিদ প্রতিরক্ষার তাত্ত্বিক কাঠামো সাধারণত পারস্পরিকভাবে অন্তর্ভুক্ত এবং দুটি বিভাগে বিভক্ত করা যেতে পারে: যেগুলি প্রতিরক্ষা ফাংশনের উপর ভিত্তি করে উদ্ভিদ-নির্দিষ্ট বিপাকীয় পদার্থের বন্টন ব্যাখ্যা করার চেষ্টা করে, যেমন সর্বোত্তম প্রতিরক্ষা (OD) (10), চলমান লক্ষ্য (MT) (11) ) এবং উপস্থিতি (12) তত্ত্ব, অন্যরা সম্পদের প্রাপ্যতার পরিবর্তন কীভাবে উদ্ভিদের বৃদ্ধি এবং বিশেষায়িত বিপাকীয় পদার্থের সঞ্চয়কে প্রভাবিত করে তার যান্ত্রিক ব্যাখ্যা খোঁজে, যেমন কার্বন: পুষ্টির ভারসাম্য অনুমান (13), বৃদ্ধির হার অনুমান (14), এবং বৃদ্ধি এবং পার্থক্য ভারসাম্য অনুমান (15)। তত্ত্বের দুটি সেট বিশ্লেষণের বিভিন্ন স্তরে রয়েছে (4)। যাইহোক, কার্যকরী স্তরে প্রতিরক্ষামূলক ফাংশন জড়িত দুটি তত্ত্ব উদ্ভিদ গঠনমূলক এবং প্ররোচিত প্রতিরক্ষা সম্পর্কে কথোপকথনে প্রাধান্য পায়: OD তত্ত্ব, যা ধরে নেয় যে উদ্ভিদগুলি তাদের ব্যয়বহুল রাসায়নিক প্রতিরক্ষায় বিনিয়োগ করে শুধুমাত্র যখন প্রয়োজন হয়, উদাহরণস্বরূপ, যখন সেগুলি গ্রহণ করা হয় যখন একটি ঘাস প্রাণী আক্রমণ করে, অতএব, ভবিষ্যতের আক্রমণের সম্ভাবনা অনুসারে, একটি প্রতিরক্ষামূলক ফাংশন সহ যৌগ বরাদ্দ করা হয় (10); MT হাইপোথিসিস প্রস্তাব করে যে দিকনির্দেশক বিপাক পরিবর্তনের কোনও অক্ষ নেই, তবে বিপাকটি এলোমেলোভাবে পরিবর্তিত হয়, ফলে আক্রমণকারী তৃণভোজী প্রাণীর বিপাকীয় "গতি লক্ষ্য" কে বাধা দেওয়ার সম্ভাবনা তৈরি হয়। অন্য কথায়, এই দুটি তত্ত্ব তৃণভোজী প্রাণীর আক্রমণের পরে ঘটে যাওয়া বিপাকীয় পুনর্নির্মাণ সম্পর্কে বিপরীত ভবিষ্যদ্বাণী করে: প্রতিরক্ষামূলক ফাংশন (OD) এবং অ-নির্দেশিত বিপাকীয় পরিবর্তন (MT) এর সাথে বিপাকীয় পদার্থের একমুখী সঞ্চয়ের মধ্যে সম্পর্ক (11)।
OD এবং MT অনুমানগুলি কেবল বিপাকের প্ররোচিত পরিবর্তনগুলিই নয়, বরং এই বিপাকীয় পদার্থগুলির জমা হওয়ার পরিবেশগত এবং বিবর্তনীয় পরিণতিও জড়িত, যেমন একটি নির্দিষ্ট পরিবেশগত পরিবেশে এই বিপাকীয় পরিবর্তনগুলির অভিযোজিত খরচ এবং সুবিধা (16)। যদিও উভয় অনুমানই বিশেষায়িত বিপাকীয় পদার্থের প্রতিরক্ষামূলক কার্যকারিতা স্বীকার করে, যা ব্যয়বহুল হতে পারে বা নাও হতে পারে, OD এবং MT অনুমানগুলিকে আলাদা করার মূল ভবিষ্যদ্বাণীটি প্ররোচিত বিপাকীয় পরিবর্তনের দিকনির্দেশনার মধ্যে নিহিত। OD তত্ত্বের ভবিষ্যদ্বাণী এখন পর্যন্ত সবচেয়ে পরীক্ষামূলক মনোযোগ পেয়েছে। এই পরীক্ষাগুলির মধ্যে গ্রিনহাউস এবং প্রাকৃতিক পরিস্থিতিতে নির্দিষ্ট যৌগের বিভিন্ন টিস্যুর প্রত্যক্ষ বা পরোক্ষ প্রতিরক্ষামূলক কার্যকারিতার অধ্যয়ন, সেইসাথে উদ্ভিদ বিকাশের পর্যায়ে পরিবর্তন (17-19) অন্তর্ভুক্ত রয়েছে। তবে, এখনও পর্যন্ত, কোনও জীবের বিপাকীয় বৈচিত্র্যের বিশ্বব্যাপী ব্যাপক বিশ্লেষণের জন্য একটি কর্মপ্রবাহ এবং পরিসংখ্যানগত কাঠামোর অভাবের কারণে, দুটি তত্ত্বের (অর্থাৎ, বিপাকীয় পরিবর্তনের দিকনির্দেশনা) মধ্যে প্রধান পার্থক্য পূর্বাভাস পরীক্ষা করা বাকি রয়েছে। এখানে, আমরা এমন একটি বিশ্লেষণ প্রদান করি।
উদ্ভিদ-নির্দিষ্ট বিপাকীয় পদার্থের সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে একটি হল একক উদ্ভিদ, জনসংখ্যা থেকে শুরু করে একই প্রজাতির সকল স্তরে তাদের চরম কাঠামোগত বৈচিত্র্য (20)। জনসংখ্যার স্কেলে বিশেষায়িত বিপাকের অনেক পরিমাণগত পরিবর্তন লক্ষ্য করা যায়, যখন শক্তিশালী গুণগত পার্থক্য সাধারণত প্রজাতি স্তরে বজায় থাকে (20)। অতএব, উদ্ভিদ বিপাকীয় বৈচিত্র্য হল কার্যকরী বৈচিত্র্যের প্রধান দিক, যা বিভিন্ন কুলুঙ্গির সাথে অভিযোজনযোগ্যতা প্রতিফলিত করে, বিশেষ করে সেই কুলুঙ্গিগুলিতে যেখানে বিশেষ পোকামাকড় এবং সাধারণ তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা বিভিন্ন আক্রমণের সম্ভাবনা রয়েছে (21)। উদ্ভিদ-নির্দিষ্ট বিপাকের অস্তিত্বের কারণ সম্পর্কে ফ্রেনকেলের (22) যুগান্তকারী নিবন্ধ থেকে, বিভিন্ন পোকামাকড়ের সাথে মিথস্ক্রিয়াকে গুরুত্বপূর্ণ নির্বাচন চাপ হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছে এবং এই মিথস্ক্রিয়াগুলি বিবর্তনের সময় উদ্ভিদকে আকৃতি দিয়েছে বলে বিশ্বাস করা হয়। বিপাকীয় পথ (23)। বিশেষায়িত বিপাকের বৈচিত্র্যের আন্তঃপ্রজাতির পার্থক্যগুলি তৃণভোজী কৌশলগুলির বিরুদ্ধে গঠনমূলক এবং প্ররোচিত উদ্ভিদ প্রতিরক্ষার সাথে সম্পর্কিত শারীরবৃত্তীয় ভারসাম্যকেও প্রতিফলিত করতে পারে, কারণ দুটি প্রজাতি প্রায়শই একে অপরের সাথে নেতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত (24)। যদিও সর্বদা একটি ভালো প্রতিরক্ষা বজায় রাখা উপকারী হতে পারে, প্রতিরক্ষার সাথে যুক্ত সময়োপযোগী বিপাকীয় পরিবর্তনগুলি উদ্ভিদকে অন্যান্য শারীরবৃত্তীয় বিনিয়োগের জন্য মূল্যবান সম্পদ বরাদ্দ করার সুযোগ দেওয়ার ক্ষেত্রে স্পষ্ট সুবিধা প্রদান করে (19, 24), এবং সিম্বিওসিসের প্রয়োজনীয়তা এড়ায়। সমান্তরাল ক্ষতি (25)। এছাড়াও, পোকামাকড়ের তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিশেষায়িত বিপাকীয় পদার্থের এই পুনর্গঠন জনসংখ্যার মধ্যে ধ্বংসাত্মক বন্টনের দিকে পরিচালিত করতে পারে (26), এবং জেসমোনিক অ্যাসিড (JA) সংকেতে উল্লেখযোগ্য প্রাকৃতিক পরিবর্তনের সরাসরি পাঠ প্রতিফলিত করতে পারে, যা জনসংখ্যার মধ্যে বজায় থাকতে পারে। উচ্চ এবং নিম্ন JA সংকেত হল তৃণভোজী প্রাণীদের বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষা এবং নির্দিষ্ট প্রজাতির সাথে প্রতিযোগিতার মধ্যে বিনিময় (27)। এছাড়াও, বিবর্তনের সময় বিশেষায়িত বিপাকীয় জৈবসংশ্লেষণ পথগুলি দ্রুত ক্ষতি এবং রূপান্তরের মধ্য দিয়ে যাবে, যার ফলে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত প্রজাতির মধ্যে বিপাকীয় বন্টন বিপাকীয় বন্টন ঘটবে (28)। পরিবর্তিত তৃণভোজী প্রাণীর ধরণগুলির প্রতিক্রিয়ায় এই বহুরূপতাগুলি দ্রুত প্রতিষ্ঠিত হতে পারে (29), যার অর্থ হল তৃণভোজী সম্প্রদায়ের ওঠানামা বিপাকীয় বৈচিত্র্যকে চালিত করার একটি মূল কারণ।
এখানে, আমরা বিশেষভাবে নিম্নলিখিত সমস্যাগুলি সমাধান করেছি। (I) তৃণভোজী পোকামাকড় কীভাবে উদ্ভিদ বিপাককে পুনর্গঠন করে? (Ii) দীর্ঘমেয়াদী প্রতিরক্ষা তত্ত্বের ভবিষ্যদ্বাণী পরীক্ষা করার জন্য বিপাকীয় প্লাস্টিসিটির প্রধান তথ্য উপাদানগুলি কী কী পরিমাপ করা যেতে পারে? (Iii) আক্রমণকারীর জন্য অনন্য উপায়ে উদ্ভিদ বিপাককে পুনরায় প্রোগ্রাম করা উচিত কিনা, যদি তাই হয়, তাহলে একটি নির্দিষ্ট বিপাকীয় প্রতিক্রিয়া তৈরিতে উদ্ভিদ হরমোন কী ভূমিকা পালন করে এবং কোন বিপাকীয় পদার্থগুলি প্রতিরক্ষার প্রজাতির নির্দিষ্টতায় অবদান রাখে? (Iv) যেহেতু অনেক প্রতিরক্ষা তত্ত্ব দ্বারা করা ভবিষ্যদ্বাণীগুলি জৈবিক টিস্যুর সমস্ত স্তরে প্রসারিত করা যেতে পারে, তাই আমরা জিজ্ঞাসা করেছি যে অভ্যন্তরীণ তুলনা থেকে আন্তঃপ্রজাতি তুলনার ফলে সৃষ্ট বিপাকীয় প্রতিক্রিয়া কতটা সামঞ্জস্যপূর্ণ? এই লক্ষ্যে, আমরা তামাক নিকোটিনের পাতার বিপাক পদ্ধতিগতভাবে অধ্যয়ন করেছি, যা একটি পরিবেশগত মডেল উদ্ভিদ যার সমৃদ্ধ বিশেষায়িত বিপাক রয়েছে এবং দুটি স্থানীয় তৃণভোজী, লেপিডোপ্টেরা ডাতুরা (Ms) (খুব আক্রমণাত্মক, প্রধানত খাওয়া হয়) এর লার্ভার বিরুদ্ধে কার্যকর। Solanaceae এবং Spodoptera littoralis (Sl) -এ, তুলার পাতার কৃমি হল এক ধরণের "জেনাস", যার পোষক Solanaceae এবং অন্যান্য বংশ এবং পরিবারের অন্যান্য পোষক উদ্ভিদ খাদ্য। আমরা MS/MS বিপাক বর্ণালী বিশ্লেষণ করেছি এবং OD এবং MT তত্ত্বের তুলনা করার জন্য তথ্য তত্ত্ব পরিসংখ্যানগত বর্ণনাকারী বের করেছি। মূল বিপাকগুলির পরিচয় প্রকাশ করার জন্য নির্দিষ্টতা মানচিত্র তৈরি করেছি। উদ্ভিদ হরমোন সংকেত এবং OD আবেশনের মধ্যে সহ-প্রকৃতি আরও বিশ্লেষণ করার জন্য বিশ্লেষণটি N. nasi এবং ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত তামাক প্রজাতির স্থানীয় জনসংখ্যার উপর প্রসারিত করা হয়েছিল।
তৃণভোজী তামাকের পাতার বিপাকের প্লাস্টিকতা এবং গঠন সম্পর্কে একটি সামগ্রিক মানচিত্র ক্যাপচার করার জন্য, আমরা উদ্ভিদের নির্যাস থেকে উচ্চ-রেজোলিউশন ডেটা স্বাধীন MS/MS স্পেকট্রাকে ব্যাপকভাবে সংগ্রহ এবং বিকনভোলিউট করার জন্য পূর্বে তৈরি একটি বিশ্লেষণ এবং গণনা কর্মপ্রবাহ ব্যবহার করেছি (9)। এই অভেদ্য পদ্ধতি (যাকে MS/MS বলা হয়) অ-অপ্রয়োজনীয় যৌগ বর্ণালী তৈরি করতে পারে, যা পরে এখানে বর্ণিত সমস্ত যৌগ-স্তরের বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। এই বিকনভোলিউটেড উদ্ভিদ বিপাকগুলি বিভিন্ন ধরণের, যার মধ্যে শত শত থেকে হাজার হাজার বিপাক থাকে (এখানে প্রায় 500-1000-s/MS/MS)। এখানে, আমরা তথ্য তত্ত্বের কাঠামোর মধ্যে বিপাকীয় প্লাস্টিকতা বিবেচনা করি এবং বিপাকীয় ফ্রিকোয়েন্সি বিতরণের শ্যানন এনট্রপির উপর ভিত্তি করে বিপাকের বৈচিত্র্য এবং পেশাদারিত্ব পরিমাপ করি। পূর্বে বাস্তবায়িত সূত্র (8) ব্যবহার করে, আমরা সূচকগুলির একটি সেট গণনা করেছি যা বিপাকীয় বৈচিত্র্য (Hj সূচক), বিপাকীয় প্রোফাইল বিশেষীকরণ (δj সূচক) এবং একটি একক বিপাকের (Si সূচক) বিপাকীয় নির্দিষ্টতা পরিমাপ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। এছাড়াও, আমরা তৃণভোজী প্রাণীদের বিপাকীয় অপ্রচলিততা পরিমাপ করার জন্য আপেক্ষিক দূরত্ব প্লাস্টিকতা সূচক (RDPI) প্রয়োগ করেছি (চিত্র 1A) (30)। এই পরিসংখ্যানগত কাঠামোর মধ্যে, আমরা MS/MS বর্ণালীকে মৌলিক তথ্য একক হিসেবে বিবেচনা করি এবং MS/MS এর আপেক্ষিক প্রাচুর্যকে একটি ফ্রিকোয়েন্সি বিতরণ মানচিত্রে প্রক্রিয়া করি এবং তারপর শ্যানন এনট্রপি ব্যবহার করে এটি থেকে বিপাকীয় বৈচিত্র্য অনুমান করি। বিপাকীয় বিশেষীকরণ একটি একক MS/MS বর্ণালীর গড় নির্দিষ্টতা দ্বারা পরিমাপ করা হয়। অতএব, তৃণভোজী প্রাণীদের আবেশনের পরে কিছু MS/MS শ্রেণীর প্রাচুর্য বৃদ্ধি বর্ণালী অপ্রচলিততা, RDPI এবং বিশেষীকরণে রূপান্তরিত হয়, অর্থাৎ δj সূচকের বৃদ্ধি, কারণ আরও বিশেষায়িত বিপাক তৈরি হয় এবং একটি উচ্চ Si সূচক তৈরি হয়। Hj বৈচিত্র্য সূচকের হ্রাস প্রতিফলিত করে যে হয় উৎপন্ন MS/MS এর সংখ্যা হ্রাস পেয়েছে, অথবা প্রোফাইল ফ্রিকোয়েন্সি বিতরণ কম অভিন্ন দিকে পরিবর্তিত হয়েছে, একই সাথে এর সামগ্রিক অনিশ্চয়তা হ্রাস করেছে। Si সূচক গণনার মাধ্যমে, কোন MS/MS নির্দিষ্ট তৃণভোজী প্রাণীর দ্বারা প্ররোচিত হয় তা তুলে ধরা সম্ভব, বিপরীতে, কোন MS/MS আবেশনে সাড়া দেয় না, যা MT এবং OD পূর্বাভাসের পার্থক্য করার জন্য একটি মূল সূচক।
(ক) তৃণভোজী (H1 থেকে Hx) MS/MS ডেটা-ইনডুসিবিলিটি (RDPI), বৈচিত্র্য (Hj সূচক), বিশেষীকরণ (δj সূচক) এবং বিপাকীয় নির্দিষ্টতা (Si সূচক) এর জন্য ব্যবহৃত পরিসংখ্যানগত বর্ণনাকারী। বিশেষীকরণের মাত্রা (δj) বৃদ্ধি ইঙ্গিত করে যে, গড়ে, আরও তৃণভোজী নির্দিষ্ট বিপাক তৈরি হবে, যেখানে বৈচিত্র্য (Hj) হ্রাস বিপাকীয় উৎপাদন হ্রাস বা বিতরণ মানচিত্রে বিপাকের অসম বন্টন নির্দেশ করে। Si মান মূল্যায়ন করে যে বিপাকটি একটি নির্দিষ্ট অবস্থার (এখানে, তৃণভোজী) সাথে নির্দিষ্ট কিনা নাকি বিপরীতভাবে একই স্তরে বজায় রাখা হয়েছে। (খ) তথ্য তত্ত্ব অক্ষ ব্যবহার করে প্রতিরক্ষা তত্ত্বের পূর্বাভাসের ধারণাগত চিত্র। OD তত্ত্ব ভবিষ্যদ্বাণী করে যে তৃণভোজী আক্রমণ প্রতিরক্ষা বিপাক বৃদ্ধি করবে, যার ফলে δj বৃদ্ধি পাবে। একই সময়ে, Hj হ্রাস পায় কারণ প্রোফাইলটি বিপাকীয় তথ্যের হ্রাসকৃত অনিশ্চয়তার দিকে পুনর্গঠিত হয়। MT তত্ত্ব ভবিষ্যদ্বাণী করে যে তৃণভোজী প্রাণীর আক্রমণ বিপাকের অ-দিকনির্দেশক পরিবর্তন ঘটাবে, যার ফলে Hj বৃদ্ধি পাবে যা বিপাকীয় তথ্যের অনিশ্চয়তার সূচক এবং Si-এর এলোমেলো বন্টন ঘটাবে। আমরা একটি মিশ্র মডেল, সেরা MT-এর প্রস্তাবও করেছি, যেখানে উচ্চতর প্রতিরক্ষামূলক মান সহ কিছু বিপাক বিশেষভাবে বৃদ্ধি পাবে (উচ্চ Si মান), অন্যরা এলোমেলো প্রতিক্রিয়া প্রদর্শন করবে (নিম্ন Si মান)।
তথ্য তত্ত্ব বর্ণনাকারী ব্যবহার করে, আমরা OD তত্ত্ব ব্যাখ্যা করে ভবিষ্যদ্বাণী করি যে একটি অপ্ররোচিত গঠনমূলক অবস্থায় তৃণভোজী প্রাণী-প্ররোচিত বিশেষ বিপাকীয় পরিবর্তনের ফলে (i) বিপাকীয় নির্দিষ্টতা বৃদ্ধি (Si সূচক) বিপাকীয় নির্দিষ্টতা (δj সূচক) চালনা করবে। (ii) উচ্চ প্রতিরক্ষা মান সহ কিছু বিশেষ বিপাকীয় গোষ্ঠীর বৃদ্ধি, এবং (ii) বিপাকীয় ফ্রিকোয়েন্সি বিতরণকে আরও লেপটিন বডি বিতরণে পরিবর্তনের কারণে বিপাকীয় বৈচিত্র্য (Hj সূচক) হ্রাস পাবে। একটি একক বিপাকের স্তরে, একটি ক্রমযুক্ত Si বিতরণ প্রত্যাশিত, যেখানে বিপাক তার প্রতিরক্ষা মান অনুসারে Si মান বৃদ্ধি করবে (চিত্র 1B)। এই লাইন বরাবর, আমরা MT তত্ত্ব ব্যাখ্যা করি যে উত্তেজনার ফলে (i) বিপাকীয় পদার্থে অ-দিকনির্দেশক পরিবর্তন হবে যার ফলে δj সূচক হ্রাস পাবে এবং (ii) বিপাকীয় অনিশ্চয়তা বৃদ্ধির কারণে Hj সূচক বৃদ্ধি পাবে। অথবা এলোমেলোতা, যা শ্যানন এনট্রপি দ্বারা সাধারণীকৃত বৈচিত্র্যের আকারে পরিমাপ করা যেতে পারে। বিপাকীয় গঠনের ক্ষেত্রে, MT তত্ত্ব Si এর এলোমেলো বিতরণের পূর্বাভাস দেবে। নির্দিষ্ট কিছু বিপাক নির্দিষ্ট অবস্থার অধীনে নির্দিষ্ট অবস্থায় থাকে এবং অন্যান্য অবস্থা নির্দিষ্ট অবস্থার অধীনে থাকে না এবং তাদের প্রতিরক্ষা মান পরিবেশের উপর নির্ভর করে, এই বিষয়টি বিবেচনা করে আমরা একটি মিশ্র প্রতিরক্ষা মডেলও প্রস্তাব করেছি, যেখানে δj এবং Hj দুটি ভাগে Si বরাবর বিতরণ করা হয়। সমস্ত দিকে বৃদ্ধি, শুধুমাত্র কিছু বিপাকীয় গোষ্ঠী, যাদের প্রতিরক্ষা মান বেশি, তারা বিশেষ করে Si বৃদ্ধি করবে, অন্যদের একটি এলোমেলো বিতরণ থাকবে (চিত্র 1B)।
তথ্য তত্ত্ব বর্ণনাকারীর অক্ষে পুনর্নির্ধারিত প্রতিরক্ষা তত্ত্বের ভবিষ্যদ্বাণী পরীক্ষা করার জন্য, আমরা নেপেনথেস প্যালেনসের পাতায় বিশেষজ্ঞ (Ms) বা সাধারণবাদী (Sl) তৃণভোজী লার্ভা উত্থাপন করেছি (চিত্র 2A)। MS/MS বিশ্লেষণ ব্যবহার করে, আমরা শুঁয়োপোকা খাওয়ানোর পরে সংগৃহীত পাতার টিস্যুর মিথানল নির্যাস থেকে 599টি অ-অপ্রয়োজনীয় MS/MS স্পেকট্রা (ডেটা ফাইল S1) উদ্ধার করেছি। MS/MS কনফিগারেশন ফাইলগুলিতে তথ্য সামগ্রীর পুনর্গঠন কল্পনা করার জন্য RDPI, Hj, এবং δj সূচক ব্যবহার করে আকর্ষণীয় নিদর্শনগুলি প্রকাশ করে (চিত্র 2B)। সামগ্রিক প্রবণতা হল, তথ্য বর্ণনাকারীর বর্ণনা অনুসারে, শুঁয়োপোকারা পাতা খেতে থাকলে, সময়ের সাথে সাথে সমস্ত বিপাকীয় পুনর্গঠনের মাত্রা বৃদ্ধি পায়: তৃণভোজী প্রাণী খাওয়ার 72 ঘন্টা পরে, RDPI উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পায়। অক্ষত নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করে, Hj উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল, যা বিপাকীয় প্রোফাইলের বর্ধিত বিশেষীকরণের ডিগ্রির কারণে হয়েছিল, যা δj সূচক দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। এই আপাত প্রবণতাটি OD তত্ত্বের ভবিষ্যদ্বাণীর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, কিন্তু MT তত্ত্বের মূল ভবিষ্যদ্বাণীর সাথে অসঙ্গতিপূর্ণ, যা বিশ্বাস করে যে বিপাকীয় স্তরের এলোমেলো (অ-দিকনির্দেশক) পরিবর্তনগুলি একটি প্রতিরক্ষামূলক ছদ্মবেশ হিসাবে ব্যবহৃত হয় (চিত্র 1B)। যদিও এই দুটি তৃণভোজী প্রাণীর মৌখিক স্রাব (OS) এলিসিটর সামগ্রী এবং খাওয়ানোর আচরণ ভিন্ন, তাদের সরাসরি খাওয়ানোর ফলে 24-ঘন্টা এবং 72-ঘন্টা ফসল কাটার সময়কালে Hj এবং δj এর দিকে একই রকম পরিবর্তন ঘটে। RDPI এর 72 ঘন্টার মধ্যে একমাত্র পার্থক্যটি ঘটে। Ms খাওয়ানোর ফলে সৃষ্ট বিপাকের তুলনায়, Sl খাওয়ানোর ফলে সৃষ্ট সামগ্রিক বিপাক বেশি ছিল।
(A) পরীক্ষামূলক নকশা: সাধারণ শূকর (S1) বা বিশেষজ্ঞ (Ms) তৃণভোজীদের কলস গাছের লবণাক্ত পাতা দিয়ে খাওয়ানো হয়, অন্যদিকে সিমুলেটেড তৃণভোজীদের জন্য, Ms (W + OSMs) এর OS মানসম্মত পাতার অবস্থানের ক্ষতের ছিদ্র পরিচালনা করার জন্য ব্যবহৃত হয়। S1 (W + OSSl) লার্ভা বা জল (W + W)। নিয়ন্ত্রণ (C) একটি অক্ষত পাতা। (B) বিশেষ বিপাক মানচিত্রের জন্য গণনা করা ইনডুসিবিলিটি (RDPI নিয়ন্ত্রণ চার্টের সাথে তুলনা করা হয়েছে), বৈচিত্র্য (Hj সূচক) এবং বিশেষীকরণ (δj সূচক) সূচক (599 MS/MS; ডেটা ফাইল S1)। তারকাচিহ্নগুলি সরাসরি তৃণভোজীদের খাওয়ানো এবং নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে (শিক্ষার্থীর টি-পরীক্ষা জোড়াযুক্ত টি-পরীক্ষা সহ, *P<0.05 এবং ***P<0.001)। ns, গুরুত্বপূর্ণ নয়। (গ) সিমুলেটেড ভেষজভোজী চিকিৎসার পর প্রধান (নীল বাক্স, অ্যামিনো অ্যাসিড, জৈব অ্যাসিড এবং চিনি; ডেটা ফাইল S2) এবং বিশেষ বিপাকীয় বর্ণালী (লাল বাক্স 443 MS/MS; ডেটা ফাইল S1) এর সময় রেজোলিউশন সূচক। রঙের ব্যান্ডটি 95% আত্মবিশ্বাস ব্যবধানকে বোঝায়। তারকাচিহ্নটি চিকিৎসা এবং নিয়ন্ত্রণের মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে [চতুর্ভুজ বিশ্লেষণ অফ ভ্যারিয়েন্স (ANOVA), তারপরে টুকির সত্যই উল্লেখযোগ্য পার্থক্য (HSD) পোস্ট হক একাধিক তুলনার জন্য, *P<0.05, **P<0.01 এবং *** P <0.001]। (ঘ) স্ক্যাটার প্লট এবং বিশেষ বিপাকীয় প্রোফাইলের বিশেষীকরণ (বিভিন্ন চিকিৎসার সাথে পুনরাবৃত্তি নমুনা)।
বিপাক স্তরে তৃণভোজী প্রাণী-প্ররোচিত পুনর্গঠন পৃথক বিপাকের স্তরের পরিবর্তনের ক্ষেত্রে প্রতিফলিত হয় কিনা তা অন্বেষণ করার জন্য, আমরা প্রথমে নেপেন্থেস প্যালেনের পাতায় পূর্বে অধ্যয়ন করা বিপাকগুলির উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছিলাম যার প্রমাণিত তৃণভোজী প্রাণীর প্রতিরোধ ক্ষমতা রয়েছে। ফেনোলিক অ্যামাইড হল হাইড্রোক্সিসিনামামাইড-পলিয়ামিন কনজুগেট যা পোকামাকড়ের তৃণভোজী প্রক্রিয়ার সময় জমা হয় এবং পোকামাকড়ের কর্মক্ষমতা হ্রাস করার জন্য পরিচিত (32)। আমরা সংশ্লিষ্ট MS/MS এর পূর্বসূরী অনুসন্ধান করেছি এবং তাদের ক্রমবর্ধমান গতিশীল বক্ররেখা প্লট করেছি (চিত্র S1)। আশ্চর্যজনকভাবে, ক্লোরোজেনিক অ্যাসিড (CGA) এবং রুটিনের মতো তৃণভোজী প্রাণীর বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষায় সরাসরি জড়িত নয় এমন ফেনল ডেরিভেটিভগুলি তৃণভোজী প্রাণীর পরে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত হয়। বিপরীতে, তৃণভোজী প্রাণীরা ফেনল অ্যামাইডকে অত্যন্ত শক্তিশালী করে তুলতে পারে। দুটি তৃণভোজী প্রাণীর ক্রমাগত খাওয়ানোর ফলে ফেনোলামাইডের প্রায় একই উত্তেজনা বর্ণালী তৈরি হয়েছিল এবং এই ধরণটি বিশেষভাবে ফেনোলামাইডের ডি নভো সংশ্লেষণের জন্য স্পষ্ট ছিল। ১৭-হাইড্রোক্সিজেরানাইল ননানেডিওল ডাইটারপিন গ্লাইকোসাইড (১৭-এইচজিএল-ডিটিজি) পথ অন্বেষণ করার সময় একই ঘটনা লক্ষ্য করা যাবে, যা কার্যকর অ্যান্টি-হার্বিভোর ফাংশন সহ প্রচুর পরিমাণে অ্যাসাইক্লিক ডাইটারপিন তৈরি করে (৩৩), যার মধ্যে এমএস ফিডিং উইথ এসএল একই রকম এক্সপ্রেশন প্রোফাইল ট্রিগার করেছে (চিত্র এস১)।
সরাসরি তৃণভোজীদের খাওয়ানোর পরীক্ষা-নিরীক্ষার সম্ভাব্য অসুবিধা হল পাতা খাওয়ার হার এবং তৃণভোজীদের খাওয়ানোর সময়ের পার্থক্য, যা ক্ষত এবং তৃণভোজীদের দ্বারা সৃষ্ট তৃণভোজী-নির্দিষ্ট প্রভাব দূর করা কঠিন করে তোলে। প্ররোচিত পাতার বিপাকীয় প্রতিক্রিয়ার তৃণভোজী প্রজাতির নির্দিষ্টতা আরও ভালভাবে সমাধান করার জন্য, আমরা তাৎক্ষণিকভাবে সংগৃহীত OS (OSM এবং OSS1) তাৎক্ষণিকভাবে সামঞ্জস্যপূর্ণ পাতার অবস্থানের স্ট্যান্ডার্ড পাংচার W-তে প্রয়োগ করে Ms এবং Sl লার্ভার খাওয়ানোর অনুকরণ করেছি। এই পদ্ধতিটিকে W + OS চিকিৎসা বলা হয়, এবং এটি টিস্যু ক্ষতির হার বা পরিমাণে পার্থক্যের বিভ্রান্তিকর প্রভাব সৃষ্টি না করে তৃণভোজীদের দ্বারা উদ্ভূত প্রতিক্রিয়ার সূত্রপাতের সময়সূচী সঠিকভাবে নির্ধারণ করে আবেশনকে মানসম্মত করে (চিত্র 2A) (34)। MS/MS বিশ্লেষণ এবং গণনা পাইপলাইন ব্যবহার করে, আমরা 443 MS/MS বর্ণালী (ডেটা ফাইল S1) উদ্ধার করেছি, যা সরাসরি খাদ্য পরীক্ষা থেকে পূর্বে সংগৃহীত বর্ণালীর সাথে ওভারল্যাপ করেছিল। এই MS/MS ডেটা সেটের তথ্য তত্ত্ব বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে তৃণভোজী প্রাণীদের অনুকরণ করে পাতা-বিশেষায়িত বিপাকগুলির পুনঃপ্রোগ্রামিং OS-নির্দিষ্ট প্ররোচনা দেখিয়েছে (চিত্র 2C)। বিশেষ করে, OSS1 চিকিত্সার সাথে তুলনা করলে, OSM 4 ঘন্টায় বিপাকীয় বিশেষীকরণের উন্নতি ঘটায়। এটি লক্ষণীয় যে সরাসরি তৃণভোজী প্রাণীদের খাওয়ানোর পরীক্ষামূলক ডেটা সেটের সাথে তুলনা করলে, Hj এবং δj কে স্থানাঙ্ক হিসাবে ব্যবহার করে দ্বি-মাত্রিক স্থানে দৃশ্যমান বিপাকীয় গতিবিদ্যা এবং সময়ের সাথে সাথে সিমুলেটেড তৃণভোজী চিকিত্সার প্রতিক্রিয়ায় বিপাকীয় বিশেষীকরণের দিকনির্দেশনা সামঞ্জস্যপূর্ণ বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 2D)। একই সময়ে, আমরা অ্যামিনো অ্যাসিড, জৈব অ্যাসিড এবং শর্করার (ডেটা ফাইল S2) পরিমাণ নির্ধারণ করেছি যাতে তদন্ত করা যায় যে বিপাকীয় দক্ষতার এই লক্ষ্যবস্তু বৃদ্ধি সিমুলেটেড তৃণভোজী প্রাণীদের প্রতিক্রিয়ায় কেন্দ্রীয় কার্বন বিপাকের পুনর্গঠনের কারণে হয়েছে কিনা (চিত্র S2)। এই প্যাটার্নটি আরও ভালভাবে ব্যাখ্যা করার জন্য, আমরা পূর্বে আলোচিত ফেনোলামাইড এবং 17-HGL-DTG পথের বিপাকীয় সঞ্চয়ন গতিবিদ্যা আরও পর্যবেক্ষণ করেছি। তৃণভোজী প্রাণীদের OS-নির্দিষ্ট আবেশন ফেনোলামাইড বিপাকের মধ্যে একটি ডিফারেনশিয়াল পুনর্বিন্যাস প্যাটার্নে রূপান্তরিত হয় (চিত্র S3)। কুমারিন এবং ক্যাফিওয়েল মোয়েট ধারণকারী ফেনোলিক অ্যামাইডগুলি OSS1 দ্বারা অগ্রাধিকারমূলকভাবে প্ররোচিত হয়, যেখানে OSMগুলি ফেরুলিল কনজুগেটের একটি নির্দিষ্ট আবেশন ট্রিগার করে। 17-HGL-DTG পথের জন্য, ডাউনস্ট্রিম ম্যালোনাইলেশন এবং ডাইম্যালোনাইলেশন পণ্য দ্বারা ডিফারেনশিয়াল OS আবেশন সনাক্ত করা হয়েছিল (চিত্র S3)।
এরপর, আমরা টাইম-কোর্স মাইক্রোঅ্যারে ডেটা সেট ব্যবহার করে OS-প্ররোচিত ট্রান্সক্রিপ্টোম প্লাস্টিসিটি অধ্যয়ন করেছি, যা তৃণভোজী প্রাণীদের মধ্যে রোজেট উদ্ভিদের পাতার পাতার চিকিৎসার জন্য OSM-এর ব্যবহারের অনুকরণ করে। নমুনা গতিবিদ্যা মূলত এই বিপাকীয় গবেষণায় ব্যবহৃত গতিবিদ্যার সাথে ওভারল্যাপ করে (35)। বিপাকীয় পুনর্গঠনের সাথে তুলনা করে যেখানে সময়ের সাথে সাথে বিপাকীয় প্লাস্টিসিটি বিশেষভাবে বৃদ্ধি পায়, আমরা Ms দ্বারা প্ররোচিত পাতায় ক্ষণস্থায়ী ট্রান্সক্রিপশন বিস্ফোরণ লক্ষ্য করি, যেখানে ট্রান্সক্রিপ্টোম ইনডুসিবিলিটি (RDPI) এবং বিশেষীকরণ (δj) 1 এ থাকে। ঘন্টার মধ্যে উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি ছিল, এবং এই সময়ে বৈচিত্র্য (Hj), BMP1 এর অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল, তারপরে ট্রান্সক্রিপ্টোম স্পেশালাইজেশনের শিথিলকরণ (চিত্র S4) হয়েছিল। বিপাকীয় জিন পরিবারগুলি (যেমন P450, গ্লাইকোসিলট্রান্সফেরেজ এবং BAHD অ্যাসিলট্রান্সফেরেজ) উপরে উল্লিখিত প্রাথমিক উচ্চ-বিশেষীকরণ মডেল অনুসরণ করে প্রাথমিক বিপাক থেকে প্রাপ্ত কাঠামোগত ইউনিট থেকে বিশেষ বিপাক একত্রিত করার প্রক্রিয়ায় অংশগ্রহণ করে। কেস স্টাডি হিসাবে, ফেনিল্যালানাইন পথ বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। বিশ্লেষণে নিশ্চিত করা হয়েছে যে, ফেনোলামাইড বিপাকের মূল জিনগুলি অপ্রত্যাশিত উদ্ভিদের তুলনায় তৃণভোজী প্রাণীদের মধ্যে অত্যন্ত OS-প্ররোচিত এবং তাদের প্রকাশের ধরণে ঘনিষ্ঠভাবে সারিবদ্ধ। এই পথের উজানে ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর MYB8 এবং কাঠামোগত জিন PAL1, PAL2, C4H এবং 4CL ট্রান্সক্রিপশনের প্রাথমিক সূচনা দেখিয়েছে। AT1, DH29 এবং CV86 এর মতো ফেনোলামাইডের চূড়ান্ত সমাবেশে ভূমিকা পালনকারী অ্যাসিলট্রান্সফেরাজগুলি দীর্ঘস্থায়ী আপরেগুলেশন প্যাটার্ন প্রদর্শন করে (চিত্র S4)। উপরের পর্যবেক্ষণগুলি ইঙ্গিত দেয় যে ট্রান্সক্রিপ্টোম স্পেশালাইজেশনের প্রাথমিক সূচনা এবং বিপাকীয় বিশেষীকরণের পরবর্তী বর্ধন একটি সংযুক্ত মোড, যা একটি শক্তিশালী প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়া শুরু করে এমন সিঙ্ক্রোনাস নিয়ন্ত্রক ব্যবস্থার কারণে হতে পারে।
উদ্ভিদ হরমোন সংকেতের পুনর্গঠন একটি নিয়ন্ত্রক স্তর হিসেবে কাজ করে যা উদ্ভিদের শারীরবিদ্যা পুনঃপ্রোগ্রাম করার জন্য তৃণভোজী তথ্যকে একীভূত করে। তৃণভোজী সিমুলেশনের পর, আমরা মূল উদ্ভিদ হরমোন বিভাগের ক্রমবর্ধমান গতিবিদ্যা পরিমাপ করেছি এবং তাদের মধ্যে অস্থায়ী সহ-প্রকাশের কল্পনা করেছি [পিয়ারসন পারস্পরিক সম্পর্ক সহগ (PCC)> 0.4] (চিত্র 3A)। যেমনটি প্রত্যাশা করা হয়েছিল, জৈব সংশ্লেষণের সাথে সম্পর্কিত উদ্ভিদ হরমোনগুলি উদ্ভিদ হরমোন সহ-প্রকাশ নেটওয়ার্কের মধ্যে সংযুক্ত। এছাড়াও, বিভিন্ন চিকিত্সা দ্বারা প্ররোচিত উদ্ভিদ হরমোনগুলিকে হাইলাইট করার জন্য বিপাকীয় নির্দিষ্টতা (Si সূচক) এই নেটওয়ার্কের সাথে ম্যাপ করা হয়েছে। তৃণভোজী নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়ার দুটি প্রধান ক্ষেত্র আঁকা হয়েছে: একটি JA ক্লাস্টারে, যেখানে JA (এর জৈবিকভাবে সক্রিয় রূপ JA-Ile) এবং অন্যান্য JA ডেরিভেটিভ সর্বোচ্চ Si স্কোর দেখায়; অন্যটি হল ইথিলিন (ET)। গিব্বেরেলিন তৃণভোজী নির্দিষ্টতায় কেবলমাত্র মাঝারি বৃদ্ধি দেখিয়েছে, যখন অন্যান্য উদ্ভিদ হরমোন, যেমন সাইটোকিনিন, অক্সিন এবং অ্যাবসিসিক অ্যাসিড, তৃণভোজীদের জন্য কম আবেশন নির্দিষ্টতা দেখিয়েছে। শুধুমাত্র W + W ব্যবহারের তুলনায়, OS অ্যাপ্লিকেশন (W + OS) এর মাধ্যমে JA ডেরিভেটিভসের সর্বোচ্চ মানের পরিবর্ধন মূলত JA-এর একটি শক্তিশালী নির্দিষ্ট সূচকে রূপান্তরিত হতে পারে। অপ্রত্যাশিতভাবে, বিভিন্ন এলিসিটর সামগ্রী সহ OSM এবং OSS1 JA এবং JA-Ile-এর অনুরূপ সঞ্চয় ঘটায় বলে জানা যায়। OSS1 এর বিপরীতে, OSM বিশেষভাবে এবং দৃঢ়ভাবে OSM দ্বারা প্ররোচিত হয়, যেখানে OSS1 বেসাল ক্ষতের প্রতিক্রিয়া বৃদ্ধি করে না (চিত্র 3B)।
(ক) তৃণভোজী-প্ররোচিত উদ্ভিদ হরমোন সঞ্চয়ন গতিবিদ্যা সিমুলেশনের PCC গণনার উপর ভিত্তি করে সহ-প্রকাশ নেটওয়ার্ক বিশ্লেষণ। নোডটি একটি একক উদ্ভিদ হরমোনকে প্রতিনিধিত্ব করে এবং নোডের আকার চিকিত্সার মধ্যে উদ্ভিদ হরমোনের জন্য নির্দিষ্ট Si সূচককে প্রতিনিধিত্ব করে। (খ) বিভিন্ন রঙ দ্বারা নির্দেশিত বিভিন্ন চিকিত্সার কারণে পাতায় JA, JA-Ile এবং ET এর সঞ্চয়: এপ্রিকট, W + OSM; নীল, W + OSSl; কালো, W + W; ধূসর, C (নিয়ন্ত্রণ)। তারকাচিহ্নগুলি চিকিত্সা এবং নিয়ন্ত্রণের মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে (দ্বিমুখী ANOVA এর পরে Tukey HSD পোস্ট হক একাধিক তুলনা, *** P <0.001)। JA জৈব সংশ্লেষণ এবং প্রতিবন্ধী উপলব্ধি বর্ণালীতে (C)697 MS/MS (ডেটা ফাইল S1) এবং (D)585 MS/MS (ডেটা ফাইল S1) এর তথ্য তত্ত্ব বিশ্লেষণ ETR1-এ প্রতিবন্ধী ET সংকেত সহ দুটি সিমুলেটেড তৃণভোজী চিকিত্সা উদ্ভিদ লাইন এবং খালি যানবাহন (EV) নিয়ন্ত্রণ উদ্ভিদকে ট্রিগার করেছে। তারকাচিহ্নগুলি W+OS চিকিৎসা এবং অক্ষত নিয়ন্ত্রণের মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে (দ্বিমুখী ANOVA এর পরে Tukey HSD পোস্ট হক মাল্টিপল তুলনা, *P<0.05, **P<0.01 এবং ***P<0.001)। (E) বিশেষীকরণের বিক্ষিপ্ত বিরোধিতার বিক্ষিপ্ত গ্রাফ। রঙগুলি বিভিন্ন জিনগতভাবে পরিবর্তিত স্ট্রেনকে প্রতিনিধিত্ব করে; প্রতীকগুলি বিভিন্ন চিকিৎসা পদ্ধতিকে প্রতিনিধিত্ব করে: ত্রিভুজ, W + OSS1; আয়তক্ষেত্র, W + OSM; বৃত্ত C
এরপর, আমরা JA এবং ET জৈব সংশ্লেষণের (irAOC এবং irACO) এবং উপলব্ধির (irCOI1 এবং sETR1) মূল ধাপগুলিতে ক্ষয়প্রাপ্ত নেপেন্থেসের একটি জেনেটিকালি পরিবর্তিত স্ট্রেন ব্যবহার করি (irCOI1 এবং sETR1) তৃণভোজী প্রাণীর উপর এই দুটি উদ্ভিদ হরমোনের বিপাক বিশ্লেষণ করতে। পুনঃপ্রোগ্রামিংয়ের আপেক্ষিক অবদান। পূর্ববর্তী পরীক্ষাগুলির সাথে সামঞ্জস্য রেখে, আমরা খালি বাহক (EV) উদ্ভিদে তৃণভোজী-OS এর আবেশন (চিত্র 3, C থেকে D) এবং OSM দ্বারা সৃষ্ট Hj সূচকের সামগ্রিক হ্রাস নিশ্চিত করেছি, যেখানে δj সূচক বৃদ্ধি পেয়েছে। OSS1 দ্বারা সৃষ্ট প্রতিক্রিয়ার চেয়ে প্রতিক্রিয়াটি আরও স্পষ্ট। স্থানাঙ্ক হিসাবে Hj এবং δj ব্যবহার করে একটি দুই-লাইন গ্রাফ নির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণহীনতা দেখায় (চিত্র 3E)। সবচেয়ে স্পষ্ট প্রবণতা হল যে JA সংকেতের অভাবযুক্ত স্ট্রেনগুলিতে, তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিপাকীয় বৈচিত্র্য এবং বিশেষীকরণের পরিবর্তনগুলি প্রায় সম্পূর্ণরূপে বাদ দেওয়া হয় (চিত্র 3C)। বিপরীতে, sETR1 উদ্ভিদের নীরব ET উপলব্ধি, যদিও তৃণভোজী বিপাকের পরিবর্তনের উপর সামগ্রিক প্রভাব JA সংকেতের তুলনায় অনেক কম, OSM এবং OSS1 উত্তেজনার মধ্যে Hj এবং δj সূচকের পার্থক্যকে হ্রাস করে (চিত্র 3D এবং চিত্র S5)। । এটি ইঙ্গিত দেয় যে JA সংকেত ট্রান্সডাকশনের মূল কার্যকারিতা ছাড়াও, ET সংকেত ট্রান্সডাকশন তৃণভোজী প্রাণীদের প্রজাতি-নির্দিষ্ট বিপাকীয় প্রতিক্রিয়ার সূক্ষ্ম-সুরকরণ হিসাবেও কাজ করে। এই সূক্ষ্ম-সুরকরণ ফাংশনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, sETR1 উদ্ভিদের সামগ্রিক বিপাকীয় ইনডুসিবিলিটিতে কোনও পরিবর্তন হয়নি। অন্যদিকে, sETR1 উদ্ভিদের সাথে তুলনা করে, irACO উদ্ভিদগুলি তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিপাকীয় পরিবর্তনের একই রকম সামগ্রিক প্রশস্ততা প্ররোচিত করেছে, তবে OSM এবং OSS1 চ্যালেঞ্জের মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন Hj এবং δj স্কোর দেখিয়েছে (চিত্র S5)।
তৃণভোজী প্রাণীদের প্রজাতি-নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়ায় গুরুত্বপূর্ণ অবদান রাখে এমন বিশেষায়িত বিপাকীয় পদার্থ সনাক্ত করতে এবং ET সংকেতের মাধ্যমে তাদের উৎপাদনকে সূক্ষ্ম করার জন্য, আমরা পূর্বে বিকশিত কাঠামোগত MS/MS পদ্ধতি ব্যবহার করেছি। এই পদ্ধতিটি MS/MS খণ্ড [স্বাভাবিক বিন্দু পণ্য (NDP)] এবং নিরপেক্ষ ক্ষতির (NL) উপর ভিত্তি করে সাদৃশ্য স্কোর থেকে বিপাকীয় পরিবার পুনরায় অনুমান করার জন্য দ্বি-ক্লাস্টারিং পদ্ধতির উপর নির্ভর করে। ET ট্রান্সজেনিক লাইন বিশ্লেষণের মাধ্যমে নির্মিত MS/MS ডেটা সেট 585 MS/MS (ডেটা ফাইল S1) তৈরি করেছে, যা সাতটি প্রধান MS/MS মডিউল (M) (চিত্র 4A) তে ক্লাস্টার করে সমাধান করা হয়েছিল। এই মডিউলগুলির মধ্যে কিছু পূর্বে চিহ্নিত বিশেষ বিপাকীয় পদার্থ দ্বারা ঘনভাবে পরিপূর্ণ: উদাহরণস্বরূপ, M1, M2, M3, M4 এবং M7 বিভিন্ন ফেনল ডেরিভেটিভস (M1), ফ্ল্যাভোনয়েড গ্লাইকোসাইড (M2), অ্যাসিল সুগার (M3 এবং M4), এবং 17-HGL-DTG (M7) সমৃদ্ধ। এছাড়াও, প্রতিটি মডিউলে একটি একক বিপাকের বিপাকীয় নির্দিষ্ট তথ্য (Si সূচক) গণনা করা হয় এবং এর Si বন্টন স্বজ্ঞাতভাবে দেখা যায়। সংক্ষেপে, উচ্চ তৃণভোজী এবং জিনোটাইপ নির্দিষ্টতা প্রদর্শনকারী MS/MS বর্ণালী উচ্চ Si মান দ্বারা চিহ্নিত করা হয় এবং কার্টোসিস পরিসংখ্যান ডান লেজের কোণে পশমের বন্টন নির্দেশ করে। M1-তে এমন একটি লিন কলয়েড বন্টন সনাক্ত করা হয়েছিল, যেখানে ফেনল অ্যামাইড সর্বোচ্চ Si ভগ্নাংশ দেখিয়েছিল (চিত্র 4B)। M7-তে পূর্বে উল্লিখিত তৃণভোজী ইনডুসিবল 17-HGL-DTG একটি মাঝারি Si স্কোর দেখিয়েছিল, যা দুটি OS ধরণের মধ্যে একটি মাঝারি ডিফারেনশিয়াল নিয়ন্ত্রণ নির্দেশ করে। বিপরীতে, বেশিরভাগ গঠনগতভাবে উত্পাদিত বিশেষায়িত বিপাক, যেমন রুটিন, CGA এবং অ্যাসিল শর্করা, সর্বনিম্ন Si স্কোরগুলির মধ্যে রয়েছে। বিশেষ বিপাকের মধ্যে কাঠামোগত জটিলতা এবং Si বন্টন আরও ভালভাবে অন্বেষণ করার জন্য, প্রতিটি মডিউলের জন্য একটি আণবিক নেটওয়ার্ক তৈরি করা হয়েছিল (চিত্র 4B)। OD তত্ত্বের একটি গুরুত্বপূর্ণ ভবিষ্যদ্বাণী (চিত্র 1B তে সংক্ষেপিত) হল যে তৃণভোজী প্রাণীর পরে বিশেষ বিপাকীয় পদার্থের পুনর্গঠনের ফলে উচ্চ প্রতিরক্ষা মান সহ বিপাকীয় পদার্থগুলিতে একমুখী পরিবর্তন ঘটবে, বিশেষ করে তাদের নির্দিষ্টতা বৃদ্ধি করে (এলোমেলো বিতরণের বিপরীতে) মোড) MT তত্ত্ব দ্বারা পূর্বাভাসিত প্রতিরক্ষামূলক বিপাক। M1-এ জমে থাকা বেশিরভাগ ফেনল ডেরিভেটিভ কার্যকরীভাবে পোকামাকড়ের কর্মক্ষমতা হ্রাসের সাথে সম্পর্কিত (32)। 24 ঘন্টায় EV নিয়ন্ত্রণ উদ্ভিদের প্ররোচিত পাতা এবং উপাদান পাতার মধ্যে M1 বিপাকীয় পদার্থের Si মান তুলনা করার সময়, আমরা লক্ষ্য করেছি যে তৃণভোজী পোকামাকড়ের পরে অনেক বিপাকীয় পদার্থের বিপাকীয় নির্দিষ্টতা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পাচ্ছে (চিত্র 4C)। Si মানের নির্দিষ্ট বৃদ্ধি শুধুমাত্র প্রতিরক্ষামূলক ফেনোলামাইডে সনাক্ত করা হয়েছিল, তবে এই মডিউলে সহাবস্থানকারী অন্যান্য ফেনল এবং অজানা বিপাকীয় পদার্থগুলিতে Si মানের কোনও বৃদ্ধি সনাক্ত করা হয়নি। এটি একটি বিশেষ মডেল, যা OD তত্ত্বের সাথে সম্পর্কিত। তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিপাকীয় পরিবর্তনের প্রধান ভবিষ্যদ্বাণীগুলি সামঞ্জস্যপূর্ণ। ফেনোলামাইড বর্ণালীর এই বিশেষত্বটি OS-নির্দিষ্ট ET দ্বারা প্ররোচিত কিনা তা পরীক্ষা করার জন্য, আমরা মেটাবোলাইট Si সূচক প্লট করেছি এবং EV এবং sETR1 জিনোটাইপগুলিতে OSM এবং OSS1 এর মধ্যে একটি ডিফারেনশিয়াল এক্সপ্রেশন মান তৈরি করেছি (চিত্র 4D)। sETR1-এ, OSM এবং OSS1 এর মধ্যে ফেনামাইড-প্ররোচিত পার্থক্য ব্যাপকভাবে হ্রাস পেয়েছে। JA-নিয়ন্ত্রিত বিপাকীয় বিশেষীকরণের সাথে সম্পর্কিত প্রধান MS/MS মডিউলগুলি অনুমান করার জন্য অপর্যাপ্ত JA সহ স্ট্রেনে সংগৃহীত MS/MS ডেটাতেও দ্বি-ক্লাস্টারিং পদ্ধতি প্রয়োগ করা হয়েছিল (চিত্র S6)।
(A) ভাগ করা খণ্ড (NDP সাদৃশ্য) এবং ভাগ করা নিরপেক্ষ ক্ষতি (NL সাদৃশ্য) এর উপর ভিত্তি করে 585 MS/MS এর ক্লাস্টারিং ফলাফলের ফলে মডিউল (M) পরিচিত যৌগ পরিবারের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ হয়, অথবা অজানা বা খারাপভাবে বিপাকিত বিপাকীয় রচনা দ্বারা। প্রতিটি মডিউলের পাশে, বিপাক (MS/MS) নির্দিষ্ট (Si) বিতরণ দেখানো হয়। (B) মডিউল আণবিক নেটওয়ার্ক: নোডগুলি MS/MS এবং প্রান্তগুলি, NDP (লাল) এবং NL (নীল) MS/MS স্কোর (কাট-অফ,> 0.6) প্রতিনিধিত্ব করে। গ্রেডেড মেটাবোলাইট স্পেসিফিসিটি সূচক (Si) মডিউল (বামে) এর উপর ভিত্তি করে রঙিন এবং আণবিক নেটওয়ার্কে (ডানে) ম্যাপ করা হয়েছে। (C) EV উদ্ভিদের মডিউল M1 গঠনমূলক (নিয়ন্ত্রণ) এবং প্ররোচিত অবস্থায় (সিমুলেটেড তৃণভোজী) 24 ঘন্টা: আণবিক নেটওয়ার্ক ডায়াগ্রাম (Si মান হল নোডের আকার, প্রতিরক্ষামূলক ফেনোলামাইড নীল রঙে হাইলাইট করা হয়েছে)। (D) প্রতিবন্ধী EV এবং ET উপলব্ধি সহ বর্ণালী রেখা sETR1 এর M1 আণবিক নেটওয়ার্ক ডায়াগ্রাম: সবুজ বৃত্ত নোড দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা ফেনোলিক যৌগ, এবং নোড আকার হিসাবে W + OSM এবং W + OSS1 চিকিত্সার মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য (P মান)। CP, N-caffeoyl-tyrosine; CS, N-caffeoyl-spermidine; FP, N-ferulic acid ester-uric acid; FS, N-ferulyl-spermidine; CoP, N', N “-Coumarolyl-tyrosine; DCS, N', N”-dicaffeoyl-spermidine; CFS, N', N”-caffeoyl, feruloyl-spermidine; উলফবেরি সন-এ Lycium barbarum; Nick. O-AS, O-acyl চিনি।
আমরা একটি একক ক্ষয়প্রাপ্ত নেপেন্থেস জিনোটাইপ থেকে বিশ্লেষণটি প্রাকৃতিক জনসংখ্যা পর্যন্ত প্রসারিত করেছি, যেখানে তৃণভোজী জেএ স্তর এবং নির্দিষ্ট বিপাকীয় স্তরের মধ্যে শক্তিশালী আন্তঃস্পেসিফিক পরিবর্তনগুলি পূর্বে প্রাকৃতিক জনসংখ্যায় বর্ণনা করা হয়েছে (26)। এই ডেটা সেটটি 43 টি জার্মপ্লাজমকে কভার করার জন্য ব্যবহার করুন। এই জার্মপ্লাজমগুলিতে এন. প্যালেন থেকে 123 প্রজাতির উদ্ভিদ রয়েছে। এই উদ্ভিদগুলি উটাহ, নেভাদা, অ্যারিজোনা এবং ক্যালিফোর্নিয়ার বিভিন্ন স্থানীয় আবাসস্থল থেকে সংগৃহীত বীজ থেকে নেওয়া হয়েছিল (চিত্র S7), আমরা বিপাকীয় বৈচিত্র্য (এখানে জনসংখ্যা স্তর বলা হয়) β বৈচিত্র্য) এবং OSM দ্বারা সৃষ্ট বিশেষীকরণ গণনা করেছি। পূর্ববর্তী গবেষণার সাথে সামঞ্জস্য রেখে, আমরা Hj এবং δj অক্ষ বরাবর বিস্তৃত বিপাকীয় পরিবর্তন পর্যবেক্ষণ করেছি, যা নির্দেশ করে যে জার্মপ্লাজমগুলির তৃণভোজী প্রাণীদের প্রতি তাদের বিপাকীয় প্রতিক্রিয়ার প্লাস্টিকতায় উল্লেখযোগ্য পার্থক্য রয়েছে (চিত্র S7)। এই সংস্থাটি তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট জেএ পরিবর্তনের গতিশীল পরিসর সম্পর্কে পূর্ববর্তী পর্যবেক্ষণগুলির স্মরণ করিয়ে দেয় এবং একটি একক জনসংখ্যায় খুব উচ্চ মান বজায় রেখেছে (26, 36)। Hj এবং δj এর মধ্যে সামগ্রিক স্তরের পারস্পরিক সম্পর্ক পরীক্ষা করার জন্য JA এবং JA-Ile ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে JA এবং বিপাক β বৈচিত্র্য এবং বিশেষীকরণ সূচকের মধ্যে একটি উল্লেখযোগ্য ইতিবাচক সম্পর্ক রয়েছে (চিত্র S7)। এটি পরামর্শ দেয় যে জনসংখ্যা স্তরে সনাক্ত করা JA আবেশনে তৃণভোজী-প্ররোচিত বৈচিত্র্য পোকামাকড় তৃণভোজী প্রাণীদের নির্বাচনের ফলে সৃষ্ট মূল বিপাকীয় বহুরূপতার কারণে হতে পারে।
পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে তামাকের প্রকারভেদ এবং প্ররোচিত এবং গঠনমূলক বিপাকীয় প্রতিরক্ষার উপর আপেক্ষিক নির্ভরতার ক্ষেত্রে তামাকের ধরণ অনেক ভিন্ন। এটা বিশ্বাস করা হয় যে অ্যান্টি-ভেষজভোজী সংকেত ট্রান্সডাকশন এবং প্রতিরক্ষা ক্ষমতার এই পরিবর্তনগুলি পোকামাকড়ের জনসংখ্যার চাপ, উদ্ভিদের জীবনচক্র এবং একটি নির্দিষ্ট প্রজাতির বৃদ্ধির ক্ষেত্রে প্রতিরক্ষা উৎপাদন খরচ দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়। আমরা উত্তর আমেরিকা এবং দক্ষিণ আমেরিকার ছয়টি নিকোটিয়ানা প্রজাতির তৃণভোজী প্রাণীর দ্বারা প্ররোচিত পাতার বিপাক পুনর্নির্মাণের ধারাবাহিকতা অধ্যয়ন করেছি। এই প্রজাতিগুলি নেপেনথেস উত্তর আমেরিকার সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত, যথা নিকোলাস বোসিফ্লো। লা, এন. নিকোটিনিস, নিকোটিয়ানা এন. অ্যাটেনুয়েটেড গ্রাস, নিকোটিয়ানা ট্যাবাকাম, লিনিয়ার তামাক, তামাক (নিকোটিয়ানা স্পেগাজিনি) এবং তামাকের পাতার তামাক (নিকোটিয়ানা অবটুসিফোলিয়া) (চিত্র 5A) (37)। এই প্রজাতির মধ্যে ছয়টি, সু-বৈশিষ্ট্যযুক্ত প্রজাতি এন. প্লিজ সহ, পেটুনিয়া ক্লেডের বার্ষিক উদ্ভিদ এবং অবটুসিফোলিয়া এন. হল বোন ক্লেড ট্রাইগোনোফাইলি (38) এর বহুবর্ষজীবী। পরবর্তীকালে, পোকামাকড়ের খাদ্যের প্রজাতি-স্তরের বিপাকীয় পুনর্বিন্যাস অধ্যয়নের জন্য এই সাতটি প্রজাতির উপর W + W, W + OSM এবং W + OSS1 আবেশন করা হয়েছিল।
(ক) সর্বাধিক সম্ভাবনার উপর ভিত্তি করে একটি বুটস্ট্র্যাপ ফাইলোজেনেটিক ট্রি [পারমাণবিক গ্লুটামিন সংশ্লেষণের জন্য (38)] এবং সাতটি ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত নিকোটিয়ানা প্রজাতির (বিভিন্ন রঙ) ভৌগোলিক বিতরণ (37)। (খ) সাতটি নিকোটিয়ানা প্রজাতির (939 MS/MS; ডেটা ফাইল S1) বিপাকীয় প্রোফাইলের জন্য বিশেষায়িত বৈচিত্র্যের একটি বিক্ষিপ্ত প্লট। প্রজাতি স্তরে, বিপাকীয় বৈচিত্র্য বিশেষীকরণের ডিগ্রির সাথে নেতিবাচকভাবে সম্পর্কিত। বিপাকীয় বৈচিত্র্য এবং বিশেষীকরণ এবং JA সঞ্চয়ের মধ্যে প্রজাতি-স্তরের পারস্পরিক সম্পর্কের বিশ্লেষণ চিত্র 2-এ দেখানো হয়েছে। S9। রঙ, বিভিন্ন প্রকার; ত্রিভুজ, W + OSS1; আয়তক্ষেত্র, W + OSM; (গ) নিকোটিয়ানা JA এবং JA-Ile গতিবিদ্যা OS উত্তেজনা প্রশস্ততা অনুসারে স্থান পেয়েছে (দ্বি-মুখী ANOVA এবং Tukey HSD একাধিক-পরবর্তী তুলনা, * P <0.05, ** P <0.01 এবং * ** W + OS এবং W + W, P <0.001 এর তুলনার জন্য)। তৃণভোজী এবং মিথাইল JA (MeJA) অনুকরণের পর প্রতিটি প্রজাতির (D) বৈচিত্র্য এবং (E) বিশেষীকরণের বাক্স প্লট। তারকাচিহ্নটি W + OS এবং W + W বা ল্যানোলিন প্লাস W (Lan + W) বা Lan প্লাস MeJA (Lan + MeJa) এবং Lan নিয়ন্ত্রণের মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে (প্রকরণের দ্বিমুখী বিশ্লেষণ, তারপরে টুকির HSD পোস্ট হক মাল্টিপল তুলনা, *P<0.05, **P<0.01 এবং ***P<0.001)।
দ্বৈত ক্লাস্টার পদ্ধতি ব্যবহার করে, আমরা 939 MS/MS (ডেটা ফাইল S1) এর 9টি মডিউল সনাক্ত করেছি। বিভিন্ন চিকিৎসা দ্বারা পুনর্গঠিত MS/MS এর গঠন প্রজাতির মধ্যে বিভিন্ন মডিউলের মধ্যে ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয় (চিত্র S8)। Hj (এখানে প্রজাতি-স্তরের γ-বৈচিত্র্য হিসাবে উল্লেখ করা হয়েছে) এবং δj কে ভিজ্যুয়ালাইজ করার মাধ্যমে জানা যায় যে বিভিন্ন প্রজাতি বিপাকীয় স্থানে খুব ভিন্ন গোষ্ঠীতে একত্রিত হয়, যেখানে প্রজাতি-স্তরের বিভাজন সাধারণত উত্তেজনার চেয়ে বেশি বিশিষ্ট হয়। N. লিনিয়ার এবং N. obliquus বাদে, তারা বিস্তৃত গতিশীল পরিসরের আবেশন প্রভাব প্রদর্শন করে (চিত্র 5B)। বিপরীতে, N. purpurea এবং N. obtusifolia এর মতো প্রজাতির চিকিৎসার প্রতি কম স্পষ্ট বিপাকীয় প্রতিক্রিয়া থাকে, তবে বিপাক আরও বৈচিত্র্যময়। প্ররোচিত বিপাকীয় প্রতিক্রিয়ার প্রজাতি-নির্দিষ্ট বন্টনের ফলে বিশেষীকরণ এবং গামা বৈচিত্র্যের মধ্যে একটি উল্লেখযোগ্য নেতিবাচক সম্পর্ক তৈরি হয় (PCC = -0.46, P = 4.9×10-8)। JA স্তরে OS-প্ররোচিত পরিবর্তনগুলি বিপাকীয় বিশেষীকরণের সাথে ইতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত, এবং প্রতিটি প্রজাতির দ্বারা প্রদর্শিত বিপাকীয় গামা বৈচিত্র্যের সাথে নেতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত (চিত্র 5B এবং চিত্র S9)। এটি লক্ষণীয় যে চিত্র 5C-তে কথ্য ভাষায় "সংকেত প্রতিক্রিয়া" প্রজাতি হিসাবে উল্লেখ করা প্রজাতি, যেমন নেপেন্থেস নেমাটোড, নেপেন্থেস নেপেন্থেস, নেপেন্থেস অ্যাকিউট এবং নেপেন্থেস অ্যাটেনুয়েটেড, 30 মিনিটে উল্লেখযোগ্য লক্ষণ সৃষ্টি করে। সাম্প্রতিক OS-নির্দিষ্ট JA এবং JA-Ile প্রাদুর্ভাব, যেখানে "সংকেত প্রতিক্রিয়াহীন" নামক অন্যান্য ব্যাকটেরিয়া, যেমন নেপেন্থেস মিলস, নেপেন্থেস পাউডারী এবং N. obtusifolia শুধুমাত্র JA-Ile Edge ইন্ডাকশন দেখায় কোন OS নির্দিষ্টতা ছাড়াই (চিত্র 5C)। বিপাকীয় স্তরে, উপরে উল্লিখিত হিসাবে, অ্যাটেনুয়েটেড নেপেন্থেসের জন্য, সংকেত-প্রতিক্রিয়াশীল পদার্থগুলি OS নির্দিষ্টতা দেখিয়েছে এবং উল্লেখযোগ্যভাবে δj বৃদ্ধি করেছে, যখন Hj হ্রাস করেছে। এই OS-নির্দিষ্ট প্রাইমিং প্রভাবটি সিগন্যাল নন-রিঅ্যাকটিভ প্রজাতি (চিত্র 5, D এবং E) হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ প্রজাতিগুলিতে সনাক্ত করা যায়নি। সিগন্যাল-প্রতিক্রিয়াশীল প্রজাতির মধ্যে OS-নির্দিষ্ট বিপাকগুলি বেশি ঘন ঘন ভাগ করা হয় এবং এই সিগন্যাল ক্লাস্টারগুলি দুর্বল সিগন্যাল প্রতিক্রিয়াযুক্ত প্রজাতির সাথে ক্লাস্টার করে, অন্যদিকে দুর্বল সিগন্যাল প্রতিক্রিয়াযুক্ত প্রজাতিগুলি কম আন্তঃনির্ভরতা দেখায় (চিত্র S8)। এই ফলাফলটি নির্দেশ করে যে JA-এর OS-নির্দিষ্ট আবেশন এবং ডাউনস্ট্রিম বিপাকের OS-নির্দিষ্ট পুনর্গঠন প্রজাতি স্তরে মিলিত হয়।
এরপর, আমরা উদ্ভিদের চিকিৎসার জন্য মিথাইল JA (MeJA) ধারণকারী একটি ল্যানোলিন পেস্ট ব্যবহার করেছি যাতে দেখা যায় যে এই সংযোগ মোডগুলি বহির্মুখী JA দ্বারা প্রয়োগ করা JA-এর প্রাপ্যতা দ্বারা সীমাবদ্ধ কিনা, যা উদ্ভিদের সাইটোপ্লাজমে থাকবে। দ্রুত ডিস্টেরিফিকেশন হল JA। আমরা JA-এর ক্রমাগত সরবরাহের কারণে সংকেত-প্রতিক্রিয়াশীল প্রজাতি থেকে সংকেত-অ-প্রতিক্রিয়াশীল প্রজাতিতে ধীরে ধীরে পরিবর্তনের একই প্রবণতা খুঁজে পেয়েছি (চিত্র 5, D এবং E)। সংক্ষেপে, MeJA চিকিৎসা রৈখিক নেমাটোড, N. obliquus, N. aquaticus, N. pallens এবং N. mikimotoi-এর বিপাকগুলিকে দৃঢ়ভাবে পুনঃপ্রোগ্রাম করেছে, যার ফলে δj-এর উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি এবং Hj-এর হ্রাস ঘটেছে। N. purpurea শুধুমাত্র δj-এর বৃদ্ধি দেখিয়েছে, কিন্তু Hj-এর বৃদ্ধি দেখায়নি। N. obtusifolia, যা পূর্বে অত্যন্ত নিম্ন স্তরের JA জমা করতে দেখা গেছে, বিপাক পুনর্গঠনের ক্ষেত্রে MeJA চিকিৎসার প্রতিও খারাপ প্রতিক্রিয়া দেখায়। এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে সংকেত-প্রতিক্রিয়াশীল প্রজাতিগুলিতে JA উৎপাদন বা সংকেত ট্রান্সডাকশন শারীরবৃত্তীয়ভাবে সীমাবদ্ধ। এই অনুমানটি পরীক্ষা করার জন্য, আমরা W + W, W + OSM এবং W + OSS1 ট্রান্সক্রিপ্টোম (39) দ্বারা প্ররোচিত চারটি প্রজাতি (N. প্যালেনস, N. মিলস, N. পিঙ্ক এবং N. মাইক্রোফিলা) অধ্যয়ন করেছি। বিপাক পুনর্নির্মাণের ধরণ অনুসারে, প্রজাতিগুলি ট্রান্সক্রিপ্টোম স্পেসে ভালভাবে পৃথক করা হয়েছে, যার মধ্যে N. অ্যাটেনুয়েটেড সর্বোচ্চ OS-প্ররোচিত RDPI দেখিয়েছে, যেখানে N. গ্র্যাসিলিস সবচেয়ে কম ছিল (চিত্র 6A)। যাইহোক, এটি পাওয়া গেছে যে N. oblonga দ্বারা প্ররোচিত ট্রান্সক্রিপ্টোম বৈচিত্র্য চারটি প্রজাতির মধ্যে সর্বনিম্ন ছিল, পূর্বে সাতটি প্রজাতিতে দেখানো N. oblonga এর সর্বোচ্চ বিপাকীয় বৈচিত্র্যের বিপরীতে। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে JA সংকেত সহ প্রাথমিক প্রতিরক্ষা সংকেতের সাথে সম্পর্কিত জিনের একটি সেট, নিকোটিয়ানা প্রজাতির (39) তৃণভোজী-সম্পর্কিত এলিসিটর দ্বারা প্ররোচিত প্রাথমিক প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়ার নির্দিষ্টতা ব্যাখ্যা করে। এই চারটি প্রজাতির মধ্যে JA সিগন্যালিং পথের তুলনা করলে একটি আকর্ষণীয় প্যাটার্ন দেখা যায় (চিত্র 6B)। এই পথের বেশিরভাগ জিন, যেমন AOC, OPR3, ACX এবং COI1, এই চারটি প্রজাতির মধ্যে তুলনামূলকভাবে উচ্চ মাত্রার আবেশন দেখিয়েছে। তবে, একটি মূল জিন, JAR4, JA কে তার জৈবিকভাবে সক্রিয় আকারে JA-Ile সঞ্চিত ট্রান্সক্রিপ্টে রূপান্তরিত করে এবং এর ট্রান্সক্রিপশন স্তর খুবই কম, বিশেষ করে N. মিল, Nepenthes pieris এবং N. microphylla-তে। এছাড়াও, N. bifidum-এ শুধুমাত্র অন্য জিন AOS-এর ট্রান্সক্রিপ্ট সনাক্ত করা যায়নি। জিনের প্রকাশের এই পরিবর্তনগুলি সংকেত অ্যানার্জিক প্রজাতির কম JA উৎপাদন এবং N. gracilis-এর আবেশন দ্বারা সৃষ্ট চরম ফেনোটাইপের জন্য দায়ী হতে পারে।
(ক) ভেষজভোজী প্রবর্তনের ৩০ মিনিট পরে নমুনা নেওয়া চারটি ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত তামাক প্রজাতির প্রাথমিক ট্রান্সক্রিপশনাল প্রতিক্রিয়ার পুনঃপ্রোগ্রামিংয়ের তথ্য তত্ত্ব বিশ্লেষণ। ভেষজভোজী OS দ্বারা প্ররোচিত পাতাগুলিকে ক্ষত নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করে RDPI গণনা করা হয়। রঙগুলি বিভিন্ন প্রজাতি নির্দেশ করে এবং প্রতীকগুলি বিভিন্ন চিকিত্সা পদ্ধতি নির্দেশ করে। (খ) চারটি প্রজাতির মধ্যে JA সংকেত পথগুলিতে জিন প্রকাশের বিশ্লেষণ। সরলীকৃত JA পথটি বাক্স প্লটের পাশে দেখানো হয়েছে। বিভিন্ন রঙ বিভিন্ন প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি নির্দেশ করে। তারকাচিহ্নটি নির্দেশ করে যে W + OS চিকিত্সা এবং W + W নিয়ন্ত্রণের মধ্যে একটি উল্লেখযোগ্য পার্থক্য রয়েছে (জোড়া পার্থক্যের জন্য ছাত্রের টি-পরীক্ষার জন্য, *P<0.05, **P<0.01 এবং ***P<0.001)। OPDA, 12-অক্সোফাইটোডিয়ানোয়িক অ্যাসিড; OPC-8: 0,3-oxo-2(2′(Z)-পেনটেনাইল)-সাইক্লোপেন্টেন-1-অক্টানোয়িক অ্যাসিড।
শেষ অংশে, আমরা অধ্যয়ন করেছি যে বিভিন্ন উদ্ভিদ প্রজাতির বিপাকের পোকামাকড়ের প্রজাতি-নির্দিষ্ট পুনর্নির্মাণ কীভাবে তৃণভোজী প্রাণীর বিরুদ্ধে প্রতিরোধী হতে পারে। পূর্ববর্তী গবেষণায় নিকোটিয়ানা গণের উপর জোর দেওয়া হয়েছিল। Ms এবং লার্ভার প্রতি তাদের প্রতিরোধ ক্ষমতা ব্যাপকভাবে ভিন্ন (40)। এখানে, আমরা এই মডেল এবং তাদের বিপাকীয় প্লাস্টিসিটির মধ্যে সংযোগ অধ্যয়ন করেছি। উপরোক্ত চারটি তামাক প্রজাতি ব্যবহার করে, এবং তৃণভোজী প্রাণীর দ্বারা সৃষ্ট বিপাকের বৈচিত্র্য এবং বিশেষীকরণ এবং Ms এবং Sl এর প্রতি উদ্ভিদের প্রতিরোধের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক পরীক্ষা করে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে সাধারণবাদী Sl All এর প্রতিরোধ, বৈচিত্র্য এবং বিশেষীকরণ ইতিবাচকভাবে সম্পর্কিত, যখন বিশেষজ্ঞ মহিলা এবং বিশেষীকরণের প্রতিরোধের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক দুর্বল, এবং বৈচিত্র্যের সাথে সম্পর্ক উল্লেখযোগ্য নয় (চিত্র S10)। S1 প্রতিরোধের ক্ষেত্রে, ক্ষয়প্রাপ্ত N. chinensis এবং N. gracilis উভয়েরই, যা পূর্বে JA সংকেত ট্রান্সডাকশন স্তর এবং বিপাকীয় প্লাস্টিসিটি উভয়ই প্রদর্শন করতে দেখানো হয়েছিল, তৃণভোজী প্রাণীর আবেশনের প্রতি ব্যাপকভাবে ভিন্ন প্রতিক্রিয়া ছিল এবং তারা একই রকম উচ্চ প্রতিরোধ ক্ষমতাও দেখিয়েছিল। লিঙ্গ।
গত ষাট বছরে, উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্ব একটি তাত্ত্বিক কাঠামো প্রদান করেছে, যার ভিত্তিতে গবেষকরা উদ্ভিদ বিশেষায়িত বিপাকের বিবর্তন এবং কার্যকারিতা সম্পর্কে যথেষ্ট সংখ্যক ভবিষ্যদ্বাণী করেছেন। এই তত্ত্বগুলির বেশিরভাগই শক্তিশালী অনুমানের স্বাভাবিক পদ্ধতি অনুসরণ করে না (41)। তারা বিশ্লেষণের একই স্তরে মূল ভবিষ্যদ্বাণী (3) প্রস্তাব করে। যখন মূল ভবিষ্যদ্বাণীগুলির পরীক্ষা নির্দিষ্ট তত্ত্বগুলিকে বিশ্লেষণ করার অনুমতি দেয়, তখন এটি ক্ষেত্রটিকে এগিয়ে নিয়ে যাবে। সমর্থন করুন, কিন্তু অন্যদের প্রত্যাখ্যান করুন (42)। পরিবর্তে, নতুন তত্ত্ব বিশ্লেষণের বিভিন্ন স্তরে ভবিষ্যদ্বাণী করে এবং বর্ণনামূলক বিবেচনার একটি নতুন স্তর যুক্ত করে (42)। যাইহোক, কার্যকরী স্তরে প্রস্তাবিত দুটি তত্ত্ব, MT এবং OD, তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিশেষায়িত বিপাকীয় পরিবর্তনের গুরুত্বপূর্ণ ভবিষ্যদ্বাণী হিসাবে সহজেই ব্যাখ্যা করা যেতে পারে: OD তত্ত্ব বিশ্বাস করে যে বিশেষায়িত বিপাকীয় "স্থান"-এর পরিবর্তনগুলি অত্যন্ত দিকনির্দেশক। MT তত্ত্ব বিশ্বাস করে যে এই পরিবর্তনগুলি অ-দিকনির্দেশক এবং বিপাকীয় স্থানে এলোমেলোভাবে অবস্থিত হবে এবং উচ্চ প্রতিরক্ষা মূল্য বিপাকীয় থাকবে। OD এবং MT পূর্বাভাসের পূর্ববর্তী পরীক্ষাগুলি একটি অগ্রাধিকার "প্রতিরক্ষা" যৌগের একটি সংকীর্ণ সেট ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছে। এই বিপাক-কেন্দ্রিক পরীক্ষাগুলি তৃণভোজী প্রাণীদের সময় বিপাকীয় পুনর্গঠনের পরিমাণ এবং গতিপথ বিশ্লেষণ করার ক্ষমতাকে বাধাগ্রস্ত করে এবং একটি সুসংগত পরিসংখ্যানগত কাঠামোর মধ্যে পরীক্ষা করার অনুমতি দেয় না যাতে মূল ভবিষ্যদ্বাণীগুলির প্রয়োজন হয় যা সামগ্রিকভাবে বিবেচনা করা যেতে পারে উদ্ভিদ বিপাকের পরিবর্তনের পরিমাণ নির্ধারণ করুন। এখানে, আমরা গণনামূলক MS-এর উপর ভিত্তি করে বিপাকবিদ্যায় উদ্ভাবনী প্রযুক্তি ব্যবহার করেছি এবং বিশ্বব্যাপী বিপাকীয় স্তরে প্রস্তাবিত দুটির মধ্যে পার্থক্য পরীক্ষা করার জন্য তথ্য তত্ত্ব বর্ণনাকারীদের সাধারণ মুদ্রায় ডিকনভোলিউশন MS বিশ্লেষণ সম্পাদন করেছি। এই তত্ত্বের মূল ভবিষ্যদ্বাণী। তথ্য তত্ত্ব অনেক ক্ষেত্রে প্রয়োগ করা হয়েছে, বিশেষ করে জীববৈচিত্র্য এবং পুষ্টি প্রবাহ গবেষণার প্রেক্ষাপটে (43)। যাইহোক, যতদূর আমরা জানি, এটিই প্রথম প্রয়োগ যা উদ্ভিদের বিপাকীয় তথ্য স্থান বর্ণনা করতে এবং পরিবেশগত ইঙ্গিতের প্রতিক্রিয়ায় অস্থায়ী বিপাকীয় পরিবর্তনের সাথে সম্পর্কিত পরিবেশগত সমস্যা সমাধানের জন্য ব্যবহৃত হয়। বিশেষ করে, এই পদ্ধতির ক্ষমতা উদ্ভিদ প্রজাতির মধ্যে এবং এর মধ্যে প্যাটার্ন তুলনা করার ক্ষমতার মধ্যে নিহিত, যাতে বিবর্তনের বিভিন্ন স্তরে তৃণভোজী প্রাণীরা বিভিন্ন প্রজাতি থেকে আন্তঃপ্রজাতি বৃহৎ বিবর্তনীয় প্যাটার্নে কীভাবে বিবর্তিত হয়েছে তা পরীক্ষা করা যায়। বিপাক।
প্রিন্সিপাল কম্পোনেন্ট অ্যানালাইসিস (PCA) একটি মাল্টিভেরিয়েট ডেটা সেটকে একটি ডাইমেনশন্যালিটি রিডাকশন স্পেসে রূপান্তর করে যাতে ডেটার মূল প্রবণতা ব্যাখ্যা করা যায়, তাই এটি সাধারণত ডেটা সেট বিশ্লেষণ করার জন্য একটি অনুসন্ধানমূলক কৌশল হিসাবে ব্যবহৃত হয়, যেমন ডিকনভোলিউশন মেটাবোলোম। যাইহোক, ডাইমেনশন্যালিটি রিডাকশন ডেটা সেটের তথ্য সামগ্রীর কিছু অংশ হারাবে এবং PCA এমন বৈশিষ্ট্য সম্পর্কে পরিমাণগত তথ্য প্রদান করতে পারবে না যা বিশেষভাবে পরিবেশগত তত্ত্বের সাথে প্রাসঙ্গিক, যেমন: তৃণভোজীরা কীভাবে বিশেষ ক্ষেত্রে বৈচিত্র্য পুনর্গঠন করে (উদাহরণস্বরূপ, সমৃদ্ধি, বিতরণ) এবং প্রাচুর্য) বিপাক? কোন বিপাকগুলি একটি নির্দিষ্ট তৃণভোজীর প্ররোচিত অবস্থার ভবিষ্যদ্বাণীকারী? নির্দিষ্টতা, বৈচিত্র্য এবং প্ররোচনাযোগ্যতার দৃষ্টিকোণ থেকে, পাতা-নির্দিষ্ট বিপাক প্রোফাইলের তথ্য সামগ্রী পচে যায় এবং দেখা যায় যে তৃণভোজীদের খাওয়া নির্দিষ্ট বিপাক সক্রিয় করতে পারে। অপ্রত্যাশিতভাবে, আমরা লক্ষ্য করেছি যে, বাস্তবায়িত তথ্য তত্ত্ব সূচকগুলিতে বর্ণিত হিসাবে, দুটি তৃণভোজী প্রাণীর (রাতের খাবার খাওয়ানো জেনারেলিস্ট Sl) এবং Solanaceae বিশেষজ্ঞ Ms. এর আক্রমণের পরে ফলস্বরূপ বিপাকীয় পরিস্থিতির একটি বড় ওভারল্যাপ রয়েছে। যদিও তাদের খাওয়ানোর আচরণ এবং ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন। OS (31) তে ফ্যাটি অ্যাসিড-অ্যামিনো অ্যাসিড কনজুগেট (FAC) ইনিশিয়েটার। মানসম্মত পাংচার ক্ষতের চিকিৎসার জন্য তৃণভোজী OS ব্যবহার করে, সিমুলেটেড তৃণভোজী চিকিৎসাও একই রকম প্রবণতা দেখিয়েছে। তৃণভোজী প্রাণীর আক্রমণের প্রতি উদ্ভিদের প্রতিক্রিয়া অনুকরণের জন্য এই মানসম্মত পদ্ধতি তৃণভোজী প্রাণীর খাওয়ার আচরণের পরিবর্তনের ফলে সৃষ্ট বিভ্রান্তিকর কারণগুলিকে দূর করে, যা বিভিন্ন সময়ে বিভিন্ন মাত্রার ক্ষতির দিকে পরিচালিত করে (34)। FAC, যা OSM-এর প্রধান কারণ হিসাবে পরিচিত, OSS1-এ JAS এবং অন্যান্য উদ্ভিদ হরমোন প্রতিক্রিয়া হ্রাস করে, যেখানে OSS1 শতগুণ হ্রাস করে (31)। যাইহোক, OSS1 OSM-এর তুলনায় JA সঞ্চয়ের একই স্তরের সৃষ্টি করে। পূর্বে এটি প্রমাণিত হয়েছে যে অ্যাটেনুয়েটেড নেপেন্থেসের JA প্রতিক্রিয়া OSM-এর প্রতি খুবই সংবেদনশীল, যেখানে FAC 1:1000 জল দিয়ে মিশ্রিত করলেও তার কার্যকলাপ বজায় রাখতে পারে (44)। অতএব, OSM-এর তুলনায়, যদিও OSS1-এ FAC খুব কম, এটি পর্যাপ্ত JA প্রাদুর্ভাব ঘটাতে যথেষ্ট। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে OSS1-এ উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা প্রতিক্রিয়া ট্রিগার করার জন্য পোরিন-সদৃশ প্রোটিন (45) এবং অলিগোস্যাকারাইড (46) আণবিক সূত্র হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। তবে, বর্তমান গবেষণায় পর্যবেক্ষণ করা JA জমা হওয়ার জন্য OSS1-এর এই এলিসিটরগুলি দায়ী কিনা তা এখনও স্পষ্ট নয়।
যদিও বিভিন্ন তৃণভোজী প্রাণী বা বহির্মুখী JA বা SA (স্যালিসিলিক অ্যাসিড) (47) প্রয়োগের ফলে সৃষ্ট ডিফারেনশিয়াল বিপাকীয় আঙুলের ছাপ বর্ণনা করার মতো খুব কম গবেষণা রয়েছে, তবুও কেউ উদ্ভিদ ঘাসের নেটওয়ার্কে তৃণভোজী প্রজাতি-নির্দিষ্ট বিশৃঙ্খলা এবং নির্দিষ্ট বিপাকের সামগ্রিক প্রভাবের উপর এর প্রভাব সম্পর্কে বিচলিত হয়নি। ব্যক্তিগত তথ্য। এই বিশ্লেষণ আরও নিশ্চিত করেছে যে JA ব্যতীত অন্যান্য উদ্ভিদ হরমোনের সাথে অভ্যন্তরীণ হরমোন নেটওয়ার্ক সংযোগ তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিপাকীয় পুনর্গঠনের নির্দিষ্টতাকে আকার দেয়। বিশেষ করে, আমরা আবিষ্কার করেছি যে OSM দ্বারা সৃষ্ট ET OSS1 দ্বারা সৃষ্ট ET এর চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। এই মোডটি OSM-এ আরও FAC সামগ্রীর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, যা ET বিস্ফোরণ ঘটানোর জন্য একটি প্রয়োজনীয় এবং পর্যাপ্ত শর্ত (48)। উদ্ভিদ এবং তৃণভোজী প্রাণীর মধ্যে মিথস্ক্রিয়ার প্রেক্ষাপটে, উদ্ভিদ-নির্দিষ্ট বিপাকীয় গতিবিদ্যার উপর ET-এর সংকেত ফাংশন এখনও বিক্ষিপ্ত এবং শুধুমাত্র একটি একক যৌগিক গোষ্ঠীকে লক্ষ্য করে। এছাড়াও, বেশিরভাগ গবেষণায় ET-এর বহির্মুখী প্রয়োগ বা এর পূর্বসূরী বা বিভিন্ন বাধাদানকারী ব্যবহার করা হয়েছে ET-এর নিয়ন্ত্রণ অধ্যয়নের জন্য, যার মধ্যে এই বহির্মুখী রাসায়নিক প্রয়োগগুলি অনেক অ-নির্দিষ্ট পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া তৈরি করবে। আমাদের জানা মতে, এই গবেষণাটি উদ্ভিদ বিপাকীয় গতিবিদ্যা সমন্বয় করার জন্য প্রতিবন্ধী ট্রান্সজেনিক উদ্ভিদ উৎপাদন এবং উপলব্ধি করার জন্য ET-এর ভূমিকার প্রথম বৃহৎ-স্কেল পদ্ধতিগত পরীক্ষা। তৃণভোজী-নির্দিষ্ট ET আবেশন শেষ পর্যন্ত বিপাকীয় প্রতিক্রিয়াকে সংশোধন করতে পারে। সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ হল ET জৈব সংশ্লেষণ (ACO) এবং উপলব্ধি (ETR1) জিনের ট্রান্সজেনিক ম্যানিপুলেশন যা তৃণভোজী-নির্দিষ্ট ফেনোলামাইডের ডি নভো সঞ্চয় প্রকাশ করে। পূর্বে এটি দেখানো হয়েছে যে ET পুট্রেসসিন N-মিথাইলট্রান্সফেরেজ নিয়ন্ত্রণ করে JA-প্ররোচিত নিকোটিন সঞ্চয়কে সূক্ষ্ম-সুর করতে পারে (49)। তবে, যান্ত্রিক দৃষ্টিকোণ থেকে, এটি স্পষ্ট নয় যে ET কীভাবে ফেনামাইডের আবেশনকে সূক্ষ্ম-সুর করে। ET-এর সিগন্যাল ট্রান্সডাকশন ফাংশন ছাড়াও, পলিঅ্যামিনোফেনল অ্যামাইডে বিনিয়োগ নিয়ন্ত্রণ করার জন্য বিপাকীয় প্রবাহকে S-adenosyl-1-methionine-এ স্থানান্তরিত করা যেতে পারে। S-adenosyl-1-methionine হল ET এবং পলিঅ্যামিন জৈবসংশ্লেষণ পথের সাধারণ মধ্যবর্তী। ET সংকেত যে প্রক্রিয়ার মাধ্যমে ফেনোলামাইডের মাত্রা নিয়ন্ত্রণ করে তা আরও অধ্যয়নের প্রয়োজন।
দীর্ঘদিন ধরে, অজানা কাঠামোর বিপুল সংখ্যক বিশেষ বিপাকের কারণে, নির্দিষ্ট বিপাকীয় শ্রেণীর প্রতি তীব্র মনোযোগ জৈবিক মিথস্ক্রিয়ার পরে বিপাকীয় বৈচিত্র্যের সাময়িক পরিবর্তনগুলিকে কঠোরভাবে মূল্যায়ন করতে অক্ষম হয়েছে। বর্তমানে, তথ্য তত্ত্ব বিশ্লেষণের ভিত্তিতে, নিরপেক্ষ বিপাকীয় পদার্থের উপর ভিত্তি করে MS/MS বর্ণালী অধিগ্রহণের প্রধান ফলাফল হল যে তৃণভোজীরা তৃণভোজী প্রাণী খায় বা অনুকরণ করে পাতার বিপাকের সামগ্রিক বিপাকীয় বৈচিত্র্য হ্রাস করে চলেছে, একই সাথে এর বিশেষীকরণের মাত্রা বৃদ্ধি করে। তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা সৃষ্ট বিপাকীয় নির্দিষ্টতার এই অস্থায়ী বৃদ্ধি ট্রান্সক্রিপ্টোম নির্দিষ্টতার একটি সমন্বয়মূলক বৃদ্ধির সাথে সম্পর্কিত। এই বৃহত্তর বিপাকীয় বিশেষীকরণে (যার Si মান বেশি) সবচেয়ে বেশি অবদান রাখে তা হল পূর্বে চিহ্নিত তৃণভোজী ফাংশন সহ বিশেষ বিপাক। এই মডেলটি OD তত্ত্বের পূর্বাভাসের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, তবে বিপাকীয় পুনঃপ্রোগ্রামিংয়ের এলোমেলোতার সাথে সম্পর্কিত MT এর পূর্বাভাস সামঞ্জস্যপূর্ণ নয়। তবে, এই তথ্যটি মিশ্র মডেলের পূর্বাভাসের সাথেও সামঞ্জস্যপূর্ণ (সেরা MT; চিত্র 1B), কারণ অজানা প্রতিরক্ষা ফাংশন সহ অন্যান্য অ-চরিত্রযুক্ত বিপাকগুলি এখনও একটি এলোমেলো Si বিতরণ অনুসরণ করতে পারে।
এই গবেষণার দ্বারা আরও একটি উল্লেখযোগ্য ধরণ ধরা পড়েছে যে মাইক্রো-বিবর্তন স্তর (একক উদ্ভিদ এবং তামাকের জনসংখ্যা) থেকে বৃহত্তর বিবর্তনীয় স্কেলে (ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত তামাক প্রজাতি) বিবর্তনীয় সংগঠনের বিভিন্ন স্তর "সেরা প্রতিরক্ষা"-এ রয়েছে। তৃণভোজী প্রাণীদের ক্ষমতার মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য রয়েছে। মুর এট আল। (20) এবং কেসলার এবং কালস্কে (1) স্বাধীনভাবে হুইটেকার (50) দ্বারা মূলত পৃথক জীববৈচিত্র্যের তিনটি কার্যকরী স্তরকে রাসায়নিক বৈচিত্র্যের গঠনমূলক এবং প্ররোচিত সাময়িক পরিবর্তনে রূপান্তর করার প্রস্তাব করেছিলেন; এই লেখকরা উভয়ই সংক্ষিপ্তসারিত করেননি। বৃহৎ আকারের বিপাকীয় তথ্য সংগ্রহের পদ্ধতিগুলিও এই তথ্য থেকে বিপাকীয় বৈচিত্র্য কীভাবে গণনা করা যায় তা রূপরেখা দেয় না। এই গবেষণায়, হুইটেকারের কার্যকরী শ্রেণিবিন্যাসের ছোটখাটো সমন্বয়গুলি α-বিপাকীয় বৈচিত্র্যকে একটি নির্দিষ্ট উদ্ভিদে MS/MS বর্ণালীর বৈচিত্র্য হিসাবে এবং β-বিপাকীয় বৈচিত্র্যকে একটি নির্দিষ্ট উদ্ভিদের মৌলিক আন্তঃস্পেসিফিক বিপাক হিসাবে বিবেচনা করবে। স্থান, এবং γ-বিপাকীয় বৈচিত্র্য হবে অনুরূপ প্রজাতির বিশ্লেষণের একটি সম্প্রসারণ।
তৃণভোজী প্রাণীর বিপাকীয় প্রতিক্রিয়ার বিস্তৃত পরিসরের জন্য JA সংকেত অপরিহার্য। তবে, বিপাকীয় বৈচিত্র্যে JA জৈব সংশ্লেষণের আন্তঃনির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণের অবদানের কঠোর পরিমাণগত পরীক্ষার অভাব রয়েছে এবং JA সংকেত উচ্চতর ম্যাক্রোইভোলশনারি স্কেলে চাপ-প্ররোচিত বিপাকীয় বৈচিত্র্যের জন্য একটি সাধারণ স্থান কিনা তা এখনও অধরা। আমরা লক্ষ্য করেছি যে নেপেন্থেস তৃণভোজী প্রাণীর তৃণভোজী প্রকৃতি বিপাকীয় বিশেষীকরণকে প্ররোচিত করে এবং নিকোটিয়ানা প্রজাতির জনসংখ্যার মধ্যে এবং ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত নিকোটিয়ানা প্রজাতির মধ্যে বিপাকীয় বিশেষীকরণের বৈচিত্র্য JA সংকেতের সাথে পদ্ধতিগতভাবে ইতিবাচকভাবে সম্পর্কিত। উপরন্তু, যখন JA সংকেত প্রতিবন্ধী হয়, তখন একটি একক জিনোটাইপ তৃণভোজী প্রাণী দ্বারা প্ররোচিত বিপাকীয় নির্দিষ্টতা বাতিল করা হবে (চিত্র 3, C এবং E)। যেহেতু প্রাকৃতিকভাবে ক্ষয়প্রাপ্ত নেপেন্থেস জনসংখ্যার বিপাকীয় বর্ণালী পরিবর্তনগুলি বেশিরভাগই পরিমাণগত, তাই এই বিশ্লেষণে বিপাকীয় β বৈচিত্র্য এবং নির্দিষ্টতার পরিবর্তনগুলি মূলত বিপাক-সমৃদ্ধ যৌগিক বিভাগগুলির শক্তিশালী উত্তেজনার কারণে হতে পারে। এই যৌগিক শ্রেণীগুলি বিপাকীয় প্রোফাইলের কিছু অংশকে প্রাধান্য দেয় এবং JA সংকেতের সাথে একটি ইতিবাচক সম্পর্কের দিকে পরিচালিত করে।
যেহেতু তামাক প্রজাতির সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত জৈব রাসায়নিক প্রক্রিয়াগুলি খুব আলাদা, বিপাকগুলি গুণগত দিক থেকে বিশেষভাবে চিহ্নিত করা হয়, তাই এটি আরও বিশ্লেষণাত্মক। তথ্য তত্ত্বের ক্যাপচার করা বিপাকীয় প্রোফাইলের প্রক্রিয়াকরণ প্রকাশ করে যে তৃণভোজী আবেশ বিপাকীয় গামা বৈচিত্র্য এবং বিশেষীকরণের মধ্যে বাণিজ্য-বন্ধকে আরও বাড়িয়ে তোলে। এই বাণিজ্য-বন্ধে JA সংকেত একটি কেন্দ্রীয় ভূমিকা পালন করে। বিপাকীয় বিশেষীকরণের বৃদ্ধি প্রধান OD পূর্বাভাসের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ এবং JA সংকেতের সাথে ইতিবাচকভাবে সম্পর্কিত, যখন JA সংকেত বিপাকীয় গামা বৈচিত্র্যের সাথে নেতিবাচকভাবে সম্পর্কিত। এই মডেলগুলি নির্দেশ করে যে উদ্ভিদের OD ক্ষমতা মূলত JA এর প্লাস্টিকতা দ্বারা নির্ধারিত হয়, তা মাইক্রোইভোলশনারি স্কেলে হোক বা বৃহত্তর বিবর্তনীয় স্কেলে। JA জৈব সংশ্লেষণ ত্রুটিগুলিকে এড়িয়ে যাওয়া বহির্মুখী JA প্রয়োগ পরীক্ষাগুলি আরও প্রকাশ করে যে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত তামাক প্রজাতিগুলিকে সংকেত-প্রতিক্রিয়াশীল এবং সংকেত-অ-প্রতিক্রিয়াশীল প্রজাতিতে আলাদা করা যেতে পারে, ঠিক যেমন তাদের JA এর মোড এবং তৃণভোজী প্রাণীদের দ্বারা প্ররোচিত বিপাকীয় প্লাস্টিসিটি। সংকেত-প্রতিক্রিয়াশীল প্রজাতিগুলি অন্তঃসত্ত্বা JA তৈরি করতে অক্ষমতার কারণে প্রতিক্রিয়া জানাতে পারে না এবং তাই শারীরবৃত্তীয় সীমাবদ্ধতার অধীন। এটি JA সিগন্যালিং পথের কিছু মূল জিনের (N. crescens-এ AOS এবং JAR4) মিউটেশনের কারণে হতে পারে। এই ফলাফলটি তুলে ধরে যে এই আন্তঃপ্রজাতির ম্যাক্রোইভোলিউশনারি প্যাটার্নগুলি মূলত অভ্যন্তরীণ হরমোন উপলব্ধি এবং প্রতিক্রিয়াশীলতার পরিবর্তনের দ্বারা চালিত হতে পারে।
উদ্ভিদ এবং তৃণভোজী প্রাণীর মধ্যে মিথস্ক্রিয়া ছাড়াও, বিপাকীয় বৈচিত্র্যের অন্বেষণ পরিবেশের সাথে জৈবিক অভিযোজন এবং জটিল ফেনোটাইপিক বৈশিষ্ট্যের বিবর্তনের গবেষণায় সমস্ত গুরুত্বপূর্ণ তাত্ত্বিক অগ্রগতির সাথে সম্পর্কিত। আধুনিক MS যন্ত্র দ্বারা অর্জিত তথ্যের পরিমাণ বৃদ্ধির সাথে সাথে, বিপাকীয় বৈচিত্র্যের উপর অনুমান পরীক্ষা এখন ব্যক্তি/শ্রেণীর বিপাকীয় পার্থক্য অতিক্রম করতে পারে এবং অপ্রত্যাশিত নিদর্শনগুলি প্রকাশ করার জন্য বিশ্বব্যাপী বিশ্লেষণ করতে পারে। বৃহৎ-স্কেল বিশ্লেষণের প্রক্রিয়ায়, একটি গুরুত্বপূর্ণ রূপক হল অর্থপূর্ণ মানচিত্র কল্পনা করার ধারণা যা ডেটা অন্বেষণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। অতএব, নিরপেক্ষ MS/MS বিপাকবিদ্যা এবং তথ্য তত্ত্বের বর্তমান সংমিশ্রণের একটি গুরুত্বপূর্ণ ফলাফল হল এটি একটি সহজ মেট্রিক প্রদান করে যা বিভিন্ন ট্যাক্সোনমিক স্কেলে বিপাকীয় বৈচিত্র্য ব্রাউজ করার জন্য মানচিত্র তৈরি করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। এটি এই পদ্ধতির মৌলিক প্রয়োজনীয়তা। মাইক্রো/ম্যাক্রো বিবর্তন এবং সম্প্রদায় বাস্তুবিদ্যার অধ্যয়ন।
ম্যাক্রো-বিবর্তনমূলক স্তরে, এহরলিচ এবং র‍্যাভেন (51) এর উদ্ভিদ-পোকামাকড় সহ-বিবর্তন তত্ত্বের মূল লক্ষ্য হল ভবিষ্যদ্বাণী করা যে আন্তঃপ্রজাতির বিপাকীয় বৈচিত্র্যের বৈচিত্র্য উদ্ভিদ বংশের বৈচিত্র্যের কারণ। যাইহোক, এই মৌলিক কাজ প্রকাশের পর থেকে পঞ্চাশ বছরে, এই অনুমানটি খুব কমই পরীক্ষা করা হয়েছে (52)। এটি মূলত দীর্ঘ-দূরত্বের উদ্ভিদ বংশ জুড়ে তুলনীয় বিপাকীয় বৈশিষ্ট্যের ফাইলোজেনেটিক বৈশিষ্ট্যের কারণে। বিরলতা লক্ষ্য বিশ্লেষণ পদ্ধতিগুলিকে নোঙ্গর করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। তথ্য তত্ত্ব দ্বারা প্রক্রিয়াকৃত বর্তমান MS/MS কর্মপ্রবাহ অজানা বিপাকের MS/MS কাঠামোগত মিলকে পরিমাপ করে (পূর্ববর্তী বিপাক নির্বাচন ছাড়াই) এবং এই MS/MSগুলিকে MS/MS-এর একটি সেটে রূপান্তর করে, এইভাবে পেশাদার বিপাকবিদ্যায় এই ম্যাক্রো-বিবর্তনীয় মডেলগুলিকে শ্রেণিবিন্যাস স্কেলে তুলনা করা হয়। সহজ পরিসংখ্যানগত সূচক। প্রক্রিয়াটি ফাইলোজেনেটিক বিশ্লেষণের অনুরূপ, যা পূর্ব পূর্বাভাস ছাড়াই বৈচিত্র্য বা চরিত্র বিবর্তনের হার পরিমাপ করতে ক্রম সারিবদ্ধকরণ ব্যবহার করতে পারে।
জৈব রাসায়নিক স্তরে, ফিরন এবং জোন্স (53) এর স্ক্রিনিং হাইপোথিসিস দেখায় যে পূর্বে সম্পর্কহীন বা প্রতিস্থাপিত বিপাকগুলির জৈবিক ক্রিয়াকলাপগুলি প্রয়োগ করার জন্য কাঁচামাল সরবরাহ করার জন্য বিভিন্ন স্তরে বিপাকীয় বৈচিত্র্য বজায় রাখা হয়। তথ্য তত্ত্ব পদ্ধতিগুলি এমন একটি কাঠামো প্রদান করে যেখানে বিপাকীয় বিশেষীকরণের সময় ঘটে যাওয়া এই বিপাক-নির্দিষ্ট বিবর্তনীয় রূপান্তরগুলিকে প্রস্তাবিত বিবর্তনীয় স্ক্রিনিং প্রক্রিয়ার অংশ হিসাবে পরিমাপ করা যেতে পারে: জৈবিকভাবে সক্রিয় অভিযোজন নিম্ন নির্দিষ্টতা থেকে উচ্চ নির্দিষ্টতায় একটি নির্দিষ্ট পরিবেশের বাধাপ্রাপ্ত বিপাক।
সব মিলিয়ে, আণবিক জীববিজ্ঞানের প্রাথমিক দিনগুলিতে, গুরুত্বপূর্ণ উদ্ভিদ প্রতিরক্ষা তত্ত্বগুলি বিকশিত হয়েছিল এবং ডিডাক্টিভ হাইপোথিসিস-চালিত পদ্ধতিগুলিকে বৈজ্ঞানিক অগ্রগতির একমাত্র উপায় হিসাবে ব্যাপকভাবে বিবেচনা করা হয়। এটি মূলত সমগ্র বিপাক পরিমাপের প্রযুক্তিগত সীমাবদ্ধতার কারণে। যদিও হাইপোথিসিস-চালিত পদ্ধতিগুলি অন্যান্য কার্যকারণ প্রক্রিয়া নির্বাচনের ক্ষেত্রে বিশেষভাবে কার্যকর, জৈব রাসায়নিক নেটওয়ার্ক সম্পর্কে আমাদের বোধগম্যতাকে এগিয়ে নেওয়ার ক্ষমতা সমসাময়িক ডেটা-নিবিড় বিজ্ঞানে বর্তমানে উপলব্ধ গণনা পদ্ধতিগুলির তুলনায় বেশি সীমিত। অতএব, যে তত্ত্বগুলি ভবিষ্যদ্বাণী করা যায় না সেগুলি উপলব্ধ তথ্যের পরিধির বাইরে, তাই গবেষণা ক্ষেত্রে অগ্রগতির অনুমানমূলক সূত্র/পরীক্ষা চক্র বাতিল করা যাবে না (4)। আমরা পূর্বাভাস দিচ্ছি যে এখানে প্রবর্তিত বিপাকীয় বৈচিত্র্যের সাম্প্রতিক (কীভাবে) এবং চূড়ান্ত (কেন) বিষয়গুলিতে আগ্রহ পুনরুজ্জীবিত করতে পারে এবং তাত্ত্বিকভাবে পরিচালিত ডেটা বিজ্ঞানের একটি নতুন যুগে অবদান রাখতে পারে। যুগটি পূর্ববর্তী প্রজন্মকে অনুপ্রাণিত করে এমন গুরুত্বপূর্ণ তত্ত্বগুলিকে পুনরায় পরীক্ষা করেছে।
একটি গোলাপ ফুল ফোটানো গাছের একটি ফ্যাকাশে রঙের কলসি গাছের পাতায় দ্বিতীয় ইনস্টার লার্ভা বা Sl লার্ভা উত্থাপন করে সরাসরি তৃণভোজী প্রাণীদের খাওয়ানো হয়, প্রতি গাছে ১০টি করে গাছের প্রতিলিপি তৈরি করা হয়। পোকামাকড়ের লার্ভাগুলিকে ক্ল্যাম্প দিয়ে আটকে রাখা হয় এবং সংক্রমণের ২৪ এবং ৭২ ঘন্টা পরে অবশিষ্ট পাতার টিস্যু সংগ্রহ করে দ্রুত হিমায়িত করা হয় এবং বিপাকীয় পদার্থগুলি বের করা হয়।
অত্যন্ত সুসংগত পদ্ধতিতে তৃণভোজী চিকিৎসা অনুকরণ করুন। পদ্ধতিটি হল ফ্যাব্রিক মালার বৃদ্ধির পর্যায়ে গাছের তিনটি সম্পূর্ণ প্রসারিত পাতার মধ্যশিরার প্রতিটি পাশে তিনটি কাঁটার সারি ছিদ্র করার জন্য ফ্যাব্রিক প্যাটার্ন চাকা ব্যবহার করা এবং অবিলম্বে 1:5 পাতলা Ms প্রয়োগ করা। অথবা গ্লাভসযুক্ত আঙ্গুল ব্যবহার করে পাঞ্চার ক্ষতে S1 OS প্রবেশ করান। উপরে বর্ণিত হিসাবে একটি পাতা সংগ্রহ করুন এবং প্রক্রিয়াজাত করুন। প্রাথমিক বিপাক এবং উদ্ভিদ হরমোন নিষ্কাশন করতে পূর্বে বর্ণিত পদ্ধতি ব্যবহার করুন (54)।
বহির্মুখী JA প্রয়োগের জন্য, প্রতিটি প্রজাতির ছয়টি গোলাপ ফুলের গাছের প্রতিটির তিনটি বৃন্ত পাতাকে ২০μl ল্যানোলিন পেস্ট দিয়ে শোধন করা হয় যার মধ্যে ১৫০μg MeJA (Lan + MeJA) এবং ২০μl ল্যানোলিন প্লাস ক্ষত চিকিৎসা (Lan + W) থাকে, অথবা নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ২০μl বিশুদ্ধ ল্যানোলিন ব্যবহার করা হয়। পাতাগুলি চিকিত্সার ৭২ ঘন্টা পরে সংগ্রহ করা হয়, তরল নাইট্রোজেনে স্ন্যাপ-ফ্রোজেন করা হয় এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত -৮০°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়।
আমাদের গবেষণা দলে চারটি JA এবং ET ট্রান্সজেনিক লাইন, যথা irAOC (36), irCOI1 (55), irACO এবং sETR1 (48), চিহ্নিত করা হয়েছে। irAOC JA এবং JA-Ile স্তরে দৃঢ়ভাবে হ্রাস দেখিয়েছে, যেখানে irCOI1 JA-এর প্রতি সংবেদনশীল ছিল না। EV-এর তুলনায়, JA-Ile সঞ্চয় বৃদ্ধি পেয়েছে। একইভাবে, irACO ET-এর উৎপাদন কমাবে, এবং EV-এর তুলনায়, sETR1, যা ET-এর প্রতি সংবেদনশীল নয়, ET-এর উৎপাদন বৃদ্ধি করবে।
একটি ফটোঅ্যাকোস্টিক লেজার স্পেকট্রোমিটার (সেন্সর সেন্স ETD-300 রিয়েল-টাইম ET সেন্সর) ব্যবহার করে অ-আক্রমণাত্মকভাবে ET পরিমাপ করা হয়। চিকিৎসার পরপরই, অর্ধেক পাতা কেটে 4-মিলি সিল করা কাচের শিশিতে স্থানান্তরিত করা হয় এবং 5 ঘন্টার মধ্যে হেডস্পেস জমা হতে দেওয়া হয়। পরিমাপের সময়, প্রতিটি শিশি 8 মিনিটের জন্য 2 লিটার/ঘন্টা বিশুদ্ধ বাতাসের স্রোতে ধুয়ে ফেলা হয়, যা পূর্বে CO2 এবং জল অপসারণের জন্য সেন্সর সেন্স দ্বারা সরবরাহিত একটি অনুঘটকের মধ্য দিয়ে গিয়েছিল।
মাইক্রোঅ্যারে ডেটা মূলত (35) সালে প্রকাশিত হয়েছিল এবং ন্যাশনাল সেন্টার ফর বায়োটেকনোলজি ইনফরমেশন (NCBI) জিন এক্সপ্রেশন কম্প্রিহেনসিভ ডাটাবেসে (অ্যাক্সেশন নম্বর GSE30287) সংরক্ষিত হয়েছিল। W + OSMs চিকিত্সা এবং অক্ষত নিয়ন্ত্রণের ফলে সৃষ্ট পাতার সাথে সম্পর্কিত ডেটা এই গবেষণার জন্য বের করা হয়েছিল। কাঁচা তীব্রতা হল log2। পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের আগে, R সফ্টওয়্যার প্যাকেজ ব্যবহার করে বেসলাইনকে রূপান্তরিত করা হয়েছিল এবং এর 75 তম শতাংশে স্বাভাবিক করা হয়েছিল।
নিকোটিয়ানা প্রজাতির মূল RNA সিকোয়েন্সিং (RNA-seq) ডেটা NCBI শর্ট রিডিং আর্কাইভস (SRA) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছে, প্রকল্প নম্বর হল PRJNA301787, যা Zhou et al. (39) দ্বারা রিপোর্ট করা হয়েছে এবং (56) এ বর্ণিত পদ্ধতিতে এগিয়ে যায়। নিকোটিয়ানা প্রজাতির সাথে সম্পর্কিত W + W, W + OSM এবং W + OSS1 দ্বারা প্রক্রিয়াকৃত কাঁচা ডেটা এই গবেষণায় বিশ্লেষণের জন্য নির্বাচন করা হয়েছে এবং নিম্নলিখিত পদ্ধতিতে প্রক্রিয়াজাত করা হয়েছে: প্রথমে, কাঁচা RNA-seq রিডিংগুলিকে FASTQ ফর্ম্যাটে রূপান্তরিত করা হয়েছে। HISAT2 FASTQ কে SAM এ রূপান্তর করে, এবং SAMtools SAM ফাইলগুলিকে সাজানো BAM ফাইলে রূপান্তর করে। StringTie জিন এক্সপ্রেশন গণনা করতে ব্যবহৃত হয়, এবং এর এক্সপ্রেশন পদ্ধতি হল প্রতি মিলিয়ন সিকোয়েন্সড ট্রান্সক্রিপশন ফ্র্যাগমেন্টে প্রতি হাজার বেস ফ্র্যাগমেন্টে টুকরো থাকে।
বিশ্লেষণে ব্যবহৃত অ্যাক্লেইম ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম (১৫০ মিমি x ২.১ মিমি; কণার আকার ২.২μm) এবং ৪ মিমি x ৪ মিমি গার্ড কলাম একই উপাদান দিয়ে তৈরি। ডায়োনেক্স আল্ট্রা হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (UHPLC) সিস্টেমে নিম্নলিখিত বাইনারি গ্রেডিয়েন্ট ব্যবহার করা হয়েছে: ০ থেকে ০.৫ মিনিট, আইসোক্রেটিক ৯০% A [ডিআয়নাইজড ওয়াটার, ০.১% (v/v) অ্যাসিটোনিট্রাইল এবং ০.০৫% ফর্মিক অ্যাসিড], ১০% B (অ্যাসিটোনিট্রাইল এবং ০.০৫% ফর্মিক অ্যাসিড); ০.৫ থেকে ২৩.৫ মিনিট, গ্রেডিয়েন্ট ফেজ যথাক্রমে ১০% A এবং ৯০% B; ২৩.৫ থেকে ২৫ মিনিট, আইসোক্রেটিক ১০% A এবং ৯০% B। প্রবাহ হার ৪০০μl/মিনিট। সমস্ত MS বিশ্লেষণের জন্য, কলাম ইলুয়েন্টকে একটি কোয়াড্রপোল এবং টাইম-অফ-ফ্লাইট (qTOF) বিশ্লেষককে ইনজেক্ট করুন যা পজিটিভ আয়নাইজেশন মোডে কাজ করে এমন একটি ইলেক্ট্রোস্প্রে উৎস দিয়ে সজ্জিত (কৈশিক ভোল্টেজ, 4500 V; কৈশিক আউটলেট 130 V; শুকানোর তাপমাত্রা 200°C; শুকানোর বায়ুপ্রবাহ 10 লিটার/মিনিট)।
সামগ্রিক সনাক্তযোগ্য বিপাকীয় প্রোফাইল সম্পর্কে কাঠামোগত তথ্য পেতে ডেটা থেকে অপ্রাসঙ্গিক বা অস্পষ্ট MS/MS খণ্ড বিশ্লেষণ (এরপরে MS/MS হিসাবে উল্লেখ করা হয়েছে) সম্পাদন করুন। নির্বিচার MS/MS পদ্ধতির ধারণাটি এই সত্যের উপর নির্ভর করে যে কোয়াড্রপোলের একটি খুব বড় ভর বিচ্ছিন্নতা উইন্ডো রয়েছে [অতএব, সমস্ত ভর-থেকে-চার্জ অনুপাত (m/z) সংকেতকে খণ্ড হিসাবে বিবেচনা করুন]। এই কারণে, যেহেতু ইমপ্যাক্ট II যন্ত্রটি CE টিল্ট তৈরি করতে অক্ষম ছিল, তাই বর্ধিত সংঘর্ষ-প্ররোচিত বিচ্ছিন্নতা সংঘর্ষ শক্তি (CE) মান ব্যবহার করে বেশ কয়েকটি স্বাধীন বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, প্রথমে একক ভর স্পেকট্রোমেট্রি মোড (ইন-সোর্স ফ্র্যাগমেন্টেশন দ্বারা উত্পন্ন কম ফ্র্যাগমেন্টেশন শর্ত) ব্যবহার করে UHPLC-ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন/qTOF-MS দ্বারা নমুনা বিশ্লেষণ করুন, 5 Hz এর পুনরাবৃত্তি ফ্রিকোয়েন্সিতে m/z 50 থেকে 1500 পর্যন্ত স্ক্যান করুন। MS/MS বিশ্লেষণের জন্য সংঘর্ষ গ্যাস হিসেবে নাইট্রোজেন ব্যবহার করুন এবং নিম্নলিখিত চারটি ভিন্ন সংঘর্ষ-প্ররোচিত বিচ্ছিন্নতা ভোল্টেজে স্বাধীন পরিমাপ করুন: 20, 30, 40, এবং 50 eV। পরিমাপ প্রক্রিয়া জুড়ে, কোয়াড্রোপোলের ভর বিচ্ছিন্নতা উইন্ডো সবচেয়ে বড়, m/z 50 থেকে 1500 পর্যন্ত। যখন সামনের বডি m/z এবং বিচ্ছিন্নতা প্রস্থ পরীক্ষা 200 এ সেট করা হয়, তখন ভর পরিসীমা স্বয়ংক্রিয়ভাবে যন্ত্রের অপারেটিং সফ্টওয়্যার এবং 0 Da দ্বারা সক্রিয় হয়। একক ভর মোডের মতো ভর খণ্ডগুলির জন্য স্ক্যান করুন। ভর ক্রমাঙ্কনের জন্য সোডিয়াম ফর্মেট (50 মিলি আইসোপ্রোপানল, 200 μl ফর্মিক অ্যাসিড এবং 1 মিলি 1M NaOH জলীয় দ্রবণ) ব্যবহার করুন। ব্রুকারের উচ্চ-নির্ভুলতা ক্রমাঙ্কন অ্যালগরিদম ব্যবহার করে, একটি নির্দিষ্ট সময়ের মধ্যে গড় বর্ণালী চালানোর পরে ডেটা ফাইলটি ক্রমাঙ্কিত করা হয়। কাঁচা ডেটা ফাইলগুলিকে NetCDF ফর্ম্যাটে রূপান্তর করতে ডেটা বিশ্লেষণ v4.0 সফ্টওয়্যার (ব্রুক ডাল্টন, ব্রেমেন, জার্মানি) এর রপ্তানি ফাংশন ব্যবহার করুন। MS/MS ডেটা সেটটি ওপেন মেটাবোলোমিক্স ডাটাবেস মেটাবোলাইটস (www.ebi.ac.uk) এ সংরক্ষিত হয়েছে, যার সাথে অ্যাকসেসন নম্বর রয়েছে। MTBLS1471।
MS/MS অ্যাসেম্বলি MS1 এবং MS/MS মানের সংকেতের মধ্যে নিম্ন এবং উচ্চ সংঘর্ষ শক্তি এবং নতুন বাস্তবায়িত নিয়মের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক বিশ্লেষণের মাধ্যমে বাস্তবায়িত করা যেতে পারে। পণ্যের পূর্বসূরীর বিতরণের পারস্পরিক সম্পর্ক বিশ্লেষণ বাস্তবায়নের জন্য R স্ক্রিপ্ট ব্যবহার করা হয় এবং নিয়মগুলি বাস্তবায়নের জন্য C# স্ক্রিপ্ট (https://github.com/MPI-DL/indiscriminant-MS-MS-assembly-pipeline) ব্যবহার করা হয়।
ব্যাকগ্রাউন্ড নয়েজের ফলে সৃষ্ট মিথ্যা ইতিবাচক ত্রুটি এবং মাত্র কয়েকটি নমুনায় নির্দিষ্ট m/z বৈশিষ্ট্য সনাক্ত করার ফলে সৃষ্ট মিথ্যা সম্পর্ক কমাতে, আমরা R প্যাকেজ XCMS এর "ভরাট শীর্ষ" ফাংশন ব্যবহার করি (পটভূমির শব্দ সংশোধনের জন্য) যা "NA" (অনির্ধারিত শীর্ষ) তীব্রতা প্রতিস্থাপন করতে ব্যবহার করা উচিত। যখন ফিল পিক ফাংশন ব্যবহার করা হয়, তখনও ডেটা সেটে অনেক "0" তীব্রতা মান থাকে যা পারস্পরিক সম্পর্ক গণনাকে প্রভাবিত করবে। তারপরে, আমরা যখন ভরাট শীর্ষ ফাংশন ব্যবহার করা হয় এবং যখন ভরাট শীর্ষ ফাংশন ব্যবহার করা হয় না তখন প্রাপ্ত ডেটা প্রক্রিয়াকরণ ফলাফলের তুলনা করি এবং গড় সংশোধন করা আনুমানিক মানের উপর ভিত্তি করে ব্যাকগ্রাউন্ড নয়েজ মান গণনা করি এবং তারপরে এই 0 তীব্রতা মানগুলিকে গণনা করা ব্যাকগ্রাউন্ড মানের সাথে প্রতিস্থাপন করি। আমরা কেবলমাত্র সেই বৈশিষ্ট্যগুলি বিবেচনা করেছি যার তীব্রতা ব্যাকগ্রাউন্ড মানের তিনগুণ বেশি এবং সেগুলিকে "সত্য শিখর" হিসাবে বিবেচনা করি। PCC গণনার জন্য, কেবলমাত্র নমুনা পূর্বসূরী (MS1) এবং কমপক্ষে আটটি সত্য শিখর সহ খণ্ড ডেটা সেটের m/z সংকেত বিবেচনা করা হয়।
যদি সমগ্র নমুনায় পূর্বসূরী গুণমান বৈশিষ্ট্যের তীব্রতা কম বা উচ্চ সংঘর্ষ শক্তির শিকার একই গুণমান বৈশিষ্ট্যের হ্রাসপ্রাপ্ত তীব্রতার সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে সম্পর্কযুক্ত হয় এবং CAMERA দ্বারা বৈশিষ্ট্যটিকে আইসোটোপ পিক হিসাবে লেবেল করা না হয়, তাহলে এটি আরও সংজ্ঞায়িত করা যেতে পারে। তারপর, 3 সেকেন্ডের মধ্যে সমস্ত সম্ভাব্য পূর্বসূরী-পণ্য জোড়া গণনা করে (শীর্ষ ধারণের জন্য আনুমানিক ধারণ সময় উইন্ডো), পারস্পরিক সম্পর্ক বিশ্লেষণ করা হয়। শুধুমাত্র যখন m/z মান পূর্বসূরী মানের চেয়ে কম হয় এবং MS/MS ফ্র্যাগমেন্টেশন পূর্বসূরী মানের সাথে ডেটা সেটের একই নমুনা অবস্থানে ঘটে যেখানে এটি প্রাপ্ত পূর্বসূরী, তখন এটি একটি ফ্র্যাগমেন্ট হিসাবে বিবেচিত হয়।
এই দুটি সহজ নিয়মের উপর ভিত্তি করে, আমরা চিহ্নিত পূর্বসূরীর m/z মান থেকে m/z মান বেশি থাকা নির্দিষ্ট টুকরোগুলিকে বাদ দিই, এবং পূর্বসূরীর প্রদর্শিত নমুনা অবস্থান এবং নির্দিষ্ট খণ্ডের উপর ভিত্তি করে। MS1 মোডে উৎপন্ন অনেক ইন-সোর্স খণ্ড দ্বারা উৎপন্ন গুণমানের বৈশিষ্ট্যগুলিকে প্রার্থী পূর্বসূর হিসাবে নির্বাচন করাও সম্ভব, যার ফলে অপ্রয়োজনীয় MS/MS যৌগ তৈরি হয়। এই ডেটা রিডানডেন্সি কমাতে, যদি বর্ণালীর NDP সাদৃশ্য 0.6 অতিক্রম করে এবং তারা CAMERA দ্বারা টীকাযুক্ত ক্রোমাটোগ্রাম "pcgroup" এর অন্তর্গত হয়, তাহলে আমরা তাদের একত্রিত করব। অবশেষে, আমরা পূর্বসূরীর সাথে সম্পর্কিত চারটি CE ফলাফল এবং খণ্ডগুলিকে চূড়ান্ত ডিকনভোলুটেড যৌগিক বর্ণালীতে একত্রিত করি, বিভিন্ন সংঘর্ষ শক্তিতে একই m/z মান সহ সমস্ত প্রার্থী শীর্ষের মধ্যে সর্বোচ্চ তীব্রতা শীর্ষ নির্বাচন করে। পরবর্তী প্রক্রিয়াকরণ পদক্ষেপগুলি যৌগিক বর্ণালীর ধারণার উপর ভিত্তি করে এবং খণ্ডিত হওয়ার সম্ভাবনা সর্বাধিক করার জন্য প্রয়োজনীয় বিভিন্ন CE শর্ত বিবেচনা করে, কারণ কিছু খণ্ড শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট সংঘর্ষ শক্তির অধীনে সনাক্ত করা যেতে পারে।
বিপাকীয় প্রোফাইলের ইনডুসিবিলিটি গণনা করার জন্য RDPI (30) ব্যবহার করা হয়েছিল। মার্টিনেজ এবং অন্যান্যদের দ্বারা বর্ণিত নিম্নলিখিত সমীকরণ ব্যবহার করে MS/MS ফ্রিকোয়েন্সি বিতরণের শ্যানন এনট্রপি ব্যবহার করে MS/MS পূর্বসূরীদের প্রাচুর্য থেকে বিপাকীয় বর্ণালী বৈচিত্র্য (Hj সূচক) উদ্ভূত হয়। (8)। ​​Hj = −∑i = 1mPijlog2(Pij) যেখানে Pij j-th নমুনায় i-th MS/MS এর আপেক্ষিক ফ্রিকোয়েন্সির সাথে মিলে যায় (j = 1, 2,…, m) (i = 1, 2, …, m) t)।
বিপাকীয় নির্দিষ্টতা (Si সূচক) কে বিবেচনা করা হচ্ছে এমন নমুনাগুলির মধ্যে ফ্রিকোয়েন্সির সাথে সম্পর্কিত একটি প্রদত্ত MS/MS এর অভিব্যক্তি পরিচয় হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়। MS/MS নির্দিষ্টতা Si = 1t (∑j = 1tPijPilog2PijPi) হিসাবে গণনা করা হয়।
প্রতিটি j নমুনার বিপাক-নির্দিষ্ট δj সূচক এবং MS/MS নির্দিষ্টতার গড় δj = ∑i = 1mPijSi পরিমাপ করতে নিম্নলিখিত সূত্রটি ব্যবহার করুন
MS/MS স্পেকট্রা জোড়ায় সারিবদ্ধ করা হয় এবং দুটি স্কোরের উপর ভিত্তি করে সাদৃশ্য গণনা করা হয়। প্রথমে, স্ট্যান্ডার্ড NDP (যা কোসাইন পারস্পরিক সম্পর্ক পদ্ধতি নামেও পরিচিত) ব্যবহার করে, স্পেকট্রা NDP = (∑iS1 & S2WS1, iWS2, i) 2∑iWS1, i2∑iWS2, i2 এর মধ্যে সেগমেন্ট সাদৃশ্য স্কোর করতে নিম্নলিখিত সমীকরণটি ব্যবহার করুন যেখানে S1 এবং S2 অনুরূপভাবে, স্পেকট্রাম 1 এবং স্পেকট্রাম 2, সেইসাথে WS1, i এবং WS2 এর জন্য, i সর্বোচ্চ তীব্রতার উপর ভিত্তি করে ওজনকে প্রতিনিধিত্ব করে যে দুটি স্পেকট্রার মধ্যে i-তম সাধারণ শীর্ষের পার্থক্য 0.01 Da এর কম। ওজন নিম্নরূপ গণনা করা হয়: W = [শিখর তীব্রতা] m [গুণমান] n, m = 0.5, n = 2, যেমন MassBank দ্বারা প্রস্তাবিত।
দ্বিতীয় স্কোরিং পদ্ধতি প্রয়োগ করা হয়েছিল, যার মধ্যে MS/MS-এর মধ্যে ভাগ করা NL বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। এই লক্ষ্যে, আমরা MS ফ্র্যাগমেন্টেশন প্রক্রিয়ার সময় প্রায়শই সম্মুখীন হওয়া 52টি NL তালিকা এবং দুর্বল নেপেন্থেস প্রজাতির (9, 26) সেকেন্ডারি মেটাবোলাইটের MS/MS বর্ণালীর জন্য পূর্বে টীকাযুক্ত আরও নির্দিষ্ট NL (ডেটা ফাইল S1) একসাথে ব্যবহার করেছি। প্রতিটি MS/MS-এর জন্য যথাক্রমে 1 এবং 0 এর একটি বাইনারি ভেক্টর তৈরি করুন, যা কিছু NL-এর বর্তমান এবং অস্তিত্বহীনতার সাথে সঙ্গতিপূর্ণ। ইউক্লিডীয় দূরত্বের মিলের উপর ভিত্তি করে, প্রতিটি জোড়া বাইনারি NL ভেক্টরের জন্য NL সাদৃশ্য স্কোর গণনা করা হয়।
ডুয়াল ক্লাস্টারিং করার জন্য, আমরা R প্যাকেজ DiffCoEx ব্যবহার করেছি, যা ওয়েটেড জিন কো-এক্সপ্রেশন অ্যানালাইসিস (WGCNA) এর এক্সটেনশনের উপর ভিত্তি করে তৈরি। MS/MS স্পেকট্রার NDP এবং NL স্কোরিং ম্যাট্রিক্স ব্যবহার করে, আমরা তুলনামূলক পারস্পরিক সম্পর্ক ম্যাট্রিক্স গণনা করতে DiffCoEx ব্যবহার করেছি। "cutreeDynamic" প্যারামিটারকে method = "hybrid", cutHeight = 0.9999, deepSplit = T, এবং minClusterSize = 10 এ সেট করে বাইনারি ক্লাস্টারিং করা হয়। DiffCoEx এর R সোর্স কোডটি Tesson et al. (57) দ্বারা অতিরিক্ত ফাইল 1 থেকে ডাউনলোড করা হয়েছে; প্রয়োজনীয় R WGCNA সফ্টওয়্যার প্যাকেজটি https://horvath.genetics.ucla.edu/html/CoexpressionNetwork/Rpackages/WGCNA এ পাওয়া যাবে।
MS/MS আণবিক নেটওয়ার্ক বিশ্লেষণ করার জন্য, আমরা NDP এবং NL সাদৃশ্যের ধরণের উপর ভিত্তি করে জোড়া বর্ণালী সংযোগ গণনা করেছি এবং CyFilescape yFiles লেআউট অ্যালগরিদম এক্সটেনশন অ্যাপ্লিকেশনে জৈব লেআউট ব্যবহার করে নেটওয়ার্ক টপোলজি কল্পনা করার জন্য Cytoscape সফ্টওয়্যার ব্যবহার করেছি।
তথ্যের পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করতে R সংস্করণ 3.0.1 ব্যবহার করুন। দ্বিমুখী বিশ্লেষণ অফ ভ্যারিয়েন্স (ANOVA) ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত তাৎপর্য মূল্যায়ন করা হয়েছিল, তারপরে টুকির সততাপূর্ণ উল্লেখযোগ্য পার্থক্য (HSD) পোস্ট-হক পরীক্ষা করা হয়েছিল। তৃণভোজী চিকিৎসা এবং নিয়ন্ত্রণের মধ্যে পার্থক্য বিশ্লেষণ করার জন্য, একই ভ্যারিয়েন্স সহ দুটি গ্রুপের নমুনার দ্বি-লেজযুক্ত বন্টন শিক্ষার্থীর t পরীক্ষা ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।
এই প্রবন্ধের জন্য সম্পূরক উপকরণের জন্য, অনুগ্রহ করে http://advances.sciencemag.org/cgi/content/full/6/24/eaaz0381/DC1 দেখুন।
এটি একটি উন্মুক্ত প্রবেশাধিকার নিবন্ধ যা ক্রিয়েটিভ কমন্স অ্যাট্রিবিউশন-নন-কমার্শিয়াল লাইসেন্সের শর্তাবলীর অধীনে বিতরণ করা হয়েছে, যা যেকোনো মাধ্যমে ব্যবহার, বিতরণ এবং পুনরুৎপাদনের অনুমতি দেয়, যতক্ষণ না চূড়ান্ত ব্যবহার বাণিজ্যিক লাভের জন্য না হয় এবং মূল কাজটি সঠিক বলে মনে করা হয়। তথ্যসূত্র।
দ্রষ্টব্য: আমরা আপনাকে কেবল আপনার ইমেল ঠিকানাটি সরবরাহ করতে বলব যাতে আপনি পৃষ্ঠাটিতে যাকে সুপারিশ করবেন তিনি জানেন যে আপনি চান যে তারা ইমেলটি দেখুক এবং এটি স্প্যাম নয়। আমরা কোনও ইমেল ঠিকানা ক্যাপচার করব না।
এই প্রশ্নটি আপনি একজন ভিজিটর কিনা তা পরীক্ষা করতে এবং স্বয়ংক্রিয় স্প্যাম জমা প্রতিরোধ করতে ব্যবহৃত হয়।
তথ্য তত্ত্ব বিশেষ বিপাকের তুলনা এবং পরীক্ষা প্রতিরক্ষা তত্ত্বের ভবিষ্যদ্বাণীর জন্য একটি সর্বজনীন মুদ্রা প্রদান করে।
তথ্য তত্ত্ব বিশেষ বিপাকের তুলনা এবং পরীক্ষা প্রতিরক্ষা তত্ত্বের ভবিষ্যদ্বাণীর জন্য একটি সর্বজনীন মুদ্রা প্রদান করে।
©2021 আমেরিকান অ্যাসোসিয়েশন ফর দ্য অ্যাডভান্সমেন্ট অফ সায়েন্স। সমস্ত অধিকার সংরক্ষিত AAAS HINARI, AGORA, OARE, CHORUS, CLOCKSS, CrossRef এবং COUNTER এর অংশীদার। Science Advances ISSN 2375-2548.


পোস্টের সময়: ফেব্রুয়ারী-২২-২০২১